MÉTHODE

Les expériences ont été effectuées chez des larves de Salamandre et chez des Tritons adultes dont j'ai donné les conditions d'élevage dans la première partie de ce travail.

Les régénérats ont été obtenus par amputation en deux temps, au miveau du stylopode, vers son milieu. La température est main- ÉOUe er

Lorsque le régénérat est au stade voulu, l'animal est endormi

dans une émulsion d'éther à 3 ou 4%. puis est placé sur un linge. Le bourgeon est alors dessiné à la chambre claire: il est ensuite prélevé, soit avec des ciseaux fins, soit avec un scalpel constitué par un fragment de lame Gilette fixé au bout d’un tube de verre. Le prélèvement est effectué à la limite du régénérat et des vieux tissus (greffe sans base). Le greffon est ensuite placé dans une loge constituée par une incision longitudinale où cruciforme que l'on a préalablement effectuée sur la tête, le dos ou la queue du même individu qui sert ainsi à la fois de donneur et d'hôte (homogreffe).

Le plus souvent, le bourgeon a été implanté suivant une orientation définie. Dans ce dernier cas, un choisit un repère que l’on surveille pendant le prélèvement et le transport de manière à éviter toute confusion. Quand un doute est possible, la greffe a été consideérée comme « non orientée ».

Lorsque l'opération est terminée, il suffit, chez la Salamandre, de mettre l'animal dans un cristallisoir plein d'eau, qui est ensuite replacé à l'étuve.

Dans mes premières expériences sur le Triton, j'avais employé la même méthode et mis mes animaux dans l'eau aussitôt après la greffe: mais, dans ces conditions, le bourgeon qui paraissait bien fixé, tombe ou régresse au bout de quelques jours et ceci quel que soit son degré de développement. Par la suite, j'ai maintenu Îles animaux dans des sacs de toile humide (suivant la méthode décrite par K. Ponse, 1924) pendant les 8 jours qui suivent l'opération. Le développement s'est alors effectué dans de très bonnes conditions. Il semble que la dégénérescence et la chute des bourgeons, dans mes premières expériences, soient dues au contact de l'eau avec la blessure qui entrainerait une infection locale. Celle-ci n'a pas lieu chez la Salamandre, où la soudure de l'épiderme du lieu avec celui du greffon s'effectue plus rapidement.

Lorsque l'évolution, suivie par des dessins effectués à la chambre claire, semble achevée, l'animal est photographié: puis. le transplant est fixé au Bouin en même temps que la zone voisine du point d'implantation.

L'étude du greffon a été effectuée soit au moyen de coupes sériées, suivies d’une coloration à l’hémalun-éosine, soit par simple éclaircissement des pièces colorées préalablement au vert de méthyle et à l’alizarine ‘). Dans quelques cas, j'ai coupé, à titre de contrôie, les

1) Je dois cette méthode à l’obligeance de M. J.L. Perrot. Le cartilage

est vert, les parties ossifiées, rouges.

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pièces ainsi obtenues. L'examen par transparence permet de préciser plus facilement la forme et les rapports mutuels des éléments du squelette; l'étude histologique renseigne sur l'état de différenciation des parties molles.

Les axes de la patte ont été définis suivant les indications données par Vialleton pour le membre type: le premier doigt est alors cranial, la face palmaire, ventrale. J'appellerai donc axe antéropostérieur celui qui relie le doigt « 1 » au doigt « 5»: axe dorsoventral celui qui relie la face dorsale à la face palmaire bien que ces axes ne coincident pas avec ceux du corps de l'animal.