TABLEAU XIII ET TABLEAU XIV

Les formations obtenues sont dans l’ensemble d'autant plus complètes que le régénérat était plus âgé au moment du prélèvement. Cet accroissement des potentialités se manifeste, d’une part, 1° par un meilleur degré de réalisation de l'autopode et, d'autre part, 2° par la possibilité de différencier le zeugopode.

1 — Les plus jeunes cônes ne développent qu’un nombre réduit de doigts (3 au plus): au contraire, lorsque la hauteur est supérieure au quart du diamètre de la base (stade cône III et suivants), l’autopode peut être complet. Il existe ainsi une relation très générale entre le stade du bourgeon prélevé et le degré de réalisation de l’autopode, exprimé par le nombre des doigts.

Cette relation peut être modifiée par l’action de facteurs extrinsèques réduisant le développement du transplant qui, habituellement,

n'exprimera qu'une partie de ses capacités: c'est ainsi que des régénérats aux stades 2 doigts, palette, cône [IT à VI peuvent, selon les conditions, former 5 doigts ou seulement 4, 3, 2 où 1 seul.

L'influence des conditions locales s’observe directement sur les ereffons présentant déjà une différenciation au moment du prélèvement (stade 2 doigts). On constate alors que, dans les premiers jours qui suivent l'implantation, l'évolution se poursuit après un arrêt, relativement court dans certains cas, et aboutit alors à des réalisations complètes: dans d’autres cas, Île greffon régresse, formant soit un cône, soit une excroissance atypique, puis la différenciation réapparaît, mais elle aboutit alors à une morphologie incomplète: le degré de développement de l’autopode dépend en grande partie des premiers processus. Les régénérats âgés peuvent donner des formations semblables à celles obtenues à partir des plus jeunes cônes. et les différences de stade et de conditions d'implantation aboutissent à des résultats identiques.

L'action de ces deux facteurs semble se ramener à une modification de la masse du régénérat qui, comme l'ont montré Guyénot et Schotté (1926), conditionne le nombre des doigts. L'action de la quantité du matériel sur la morphologie permet d'expliquer à la fois la règle générale d’une augmentation des potentialités avec l’âge et les variations individuelles, souvent considérables, que l’on peut observer entre les greffons à un même stade. En effet, la masse du transplant, au moment de la différenciation de ses ébauches, dépend de 3 facteurs.

a) L'âge du régénérat prélevé. L’accroissement du bourgeon résulte principalement, au moins au début, de l'émigration d'éléments de la base (voir page 49): il en résulte qu'un régénérat, lorsqu'il est prélevé jeune, n'est formé que par une partie des cellules destinées à reconstituer le membre. D'autre part, leur prolifération s'effectue dans des conditions beaucoup moins favorables que dans un régénérat en place, et le nombre des cellules, au moment de la différenciation, sera d'autant plus faible que cette prolifération aura été

troublée plus tôt.

b) La quantité plus ou moins importante du bourgeon détruit par

Je prélèvement ou par l'infection.

c) Le rétablissement plus où moins rapide des connexions vaseu” jaires et nerveuses dont l'interruption entraîne un arrêt de la crois-

sance et la régression du greffon.

120 CHRISTIAN METTETAL

La quantité de matériel initial (a) ne dépend que de l’âge et sera pratiquement constante pour tous les bourgeons prélevés à un même stade.

Les facteurs b et c, par contre, dépendent des conditions de l’opération, variables dans chaque cas. Lorsque le nombre d’opérés est suffisant, des conditions analogues doivent se trouver réalisées, suivant des proportions semblables pour chaque stade. L'accroissement des potentialités avec l’âge s'exprimera alors par la « moyenne du nombre des doigts » ‘). Celle-ci est de 0,25 au stade cône I. de 0,68 au stade cône IT, de 2,7 aux stades cône III et IV, de 3,2 aux stades cône V et VI, de 3,8 aux stades palette et”2 doigts”Pendant cette période, le mésoderme, dont le rôle est essentiel pour la morphogénèse, voit son volume augmenter plus rapidement que celui du bourgeon entier.

Les subdivisions du stade cône ont été définies par la hauteur du bourgeon, prise par rapport au diamètre du moignon, cette hauteur étant:

Au stade: cône I: 2/16; cône II: 4/16; cône IV: 8/16; cône VI: 12/16.

L'épiderme du bourgeon, chez les larves jeunes, a une épaisseur d'environ © mm. 0$, ce qui correspond au 1/16 du diamètre de la base. La hauteur de la portion mésodermique est donc la suivante.

Au stades cone LUr16: cone [L:13/16 cône 1V 7/76 conne VI LT/TO:

La surface de la base du cône peut être considérée comme constante, son accroissement étant négligeable par rapport à celui de la hauteur. Par suite, les volumes des cônes sont proportionnels à la hauteur. Ils sont entre eux dans le rapport 1 À 7 ME

moyenne du nombre des doigts étant, aux mêmes stades (si lon prend celle du cône I pour unité), de 1 — 3,08 — 10,8 — 12,4.

Il existe ans une relation très nette entre le volume du novau mésordermique et le degré de réalisation de l'autopode.

En conformité avec l'hypothèse d'une influence de la masse sur la morphologie du régénérat, on trouve une série complète de transitions reliant des autopodes normaux à de simples digitations. Lorsque les 5 doigts sont présents, chacun peut être constitué par

1) Je désignerai ainsi le chiffre obtenu en divisant le nombre total des doigts ayant un squelette par le nombre total des greffes effectuées à un

certain stade, en comptant pour o doigt les transplants indifférenciés ou résorbés.

son nombre caractéristique de phalanges: parfois, le doigt « 5 » est réduit à un seul cartilage: dans un cas, son squelette manque totalement, bien que la peau ait formé une digitation qui ne renferme alors que des fibroblastes; ces déficiences conduisent aux pattes à 4 doigts et de là, à celles qui ne sont formées que par 3, 2 ou une seule digitation.

Les faits que je viens de mentionner ne peuvent cependant constituer qu’une présomption en faveur d’une influence de la masse. Pour vérifier cette hypothèse, j'ai mesuré la longueur du squelette des axes digitaux sur une série de greffons à divers stades. Les résultats sont résumés dans le Tableau XIIT où j'ai désigné par « L» ja longueur totale des cartilages digitaux. Pour chaque stade, j'ai indiqué la moyenne du nombre des doigts des transplants pour lesquels « L » a la même valeur.

TABLEAU XIII

EEE

Moyenne du nombre des doigts aux stades

Véleur de L

Cône I Cône II [Cône III et IV | Cône V et VI OR RS ce I I — I OM ee I 2 De 2 tan ec 2 2 2 2 AT 510 Elo Die — — 3,5 3,5 Plus de 4 mm. .. — — 4,3 4,5

Une même quantité de cartilage se répartit dans l'ensemble entre le même nombre de doigts, et, re CODEN. le nombre d'ares digitaux est conditionné par la quantité de cartilage. Cette relation est indépendante de l'âge du régé snérat prélevé: pour une méine valeur de « L », les potentialités sont les mêmes au stade cône Î ou au stade cône VI.

On constate, en outre, qu'il existe un rapport entre la taille d'un doigt et la possibilité de différencier le doigt suivant: tant que la jongueur du 2° axe digital reste inférieure à o mm. 6, le doigt «3» ne se différencie jamais (7 cas); au contr aire, si elle dépasse o mm. 6, je 3° doigt est présent dans 28 cas sur 36. Il en résulte que tant

1222 CHRISTIAN METTETAL

que le matériel postaxial n'atteint pas un certain minimum, il est entièrement utilisé par le doigt «2»; lorsqu'il dépasse ce seuil. les doigts suivants pourront se différencier. Cette quantité est indépendante de la masse totale: le doigt «2» n’est pas plus long lorsqu'il y a 5 doigts que lorsqu'il n’y en a que 3, bien que la masse du blastème soit nécessairement plus forte dans le premier cas. Le développement est ainsi caractérisé par l'absence de régulation: le matériel, en quantité insuffisante, ne forme pas un autopode complet, de taille réduite, mais un autopode déficient dont les cartilages représentés auront des dimensions qui ne différeront de ceux d’un régénérat en place que par les conditions beaucoup moins favorables de la croissance secondaire.

Il en résulte que le doigt qui se différencie en premier utilise une certaine quantité de matériel indépendante de la masse totale, le reliquat étant utilisé par le ou les doigts suivants jusqu'à son épuise-

aient: les divers autopodes se ramenant les uns aux autres par la réduction, puis l'absence complète des derniers doigts.

Cette règle comporte cependant des exceptions en ce qui concerne le doigt © 1», qui, bien que se différenciant en premier, peut être réduit ou absent, tandis que les doigts suivants se sont développés: le matériel n’a donc pas été utilisé suivant l’ordre d'apparition des ébauches; le bourgeon n'était pas isotrope. Il faut distinguer dans le régénérat, à partir d'un certain âge, deux zones, dont l’évolution est indépendante et qui sont destinées à former, l’une le premier doigt, l’autre les doigts suivants. Chacune de ces zones est équipotentielle: on n'observe jamais la réduction ou l'absence des doigts intermédiaires.

Lorsque le matériel disponible pour l'édification d’un doigt est insuffisant pour permettre le développement complet, le squelette pourra être limité à sa portion proximale où à sa portion distale ou être formé par deux éléments, séparés par du conjonctif; enfin, ce dernier peut exister seul.

En examinant la régénération en place, j'ai indiqué que la différenciation du squelette est précédée par un groupement des cellules qui parait être une condition nécessaire pour la chondrification. Les régions intermédiaires, de moindre densité, dont les éléments ont sans doute les mêmes potentialités, évoluent en conjonctif.

Dans le transplant, lorsque le matériel disponible pour former un doigt est insuffisant, le groupement des cellules devient impossible, ou du moins 1l ne peut s'effectuer qu'en certains points. Le doigt sera alors constitué par du conjonctif ou renfermera un squelette

réduit dont les éléments pourront être séparés, si les cellules sont plus nombreuses, en deux zones distinctes. Ainsi s’expliquerait que les cartilages puissent ne pas être en continuité les uns avec les autres. La différenciation du squelette d’un doigt impliquerait alors la réunion de deux conditions:

a) Une tendance au groupement des cellules toujours réalisée ici, la détermination étant assurée.

b) Une quantité de matériel suffisante pour que le groupement puisse se réaliser effectivement.

Cette masse nécessaire à l'édification d’un doigt est absolument indépendante de l’âge du régénérat; une même quantité de matériel se répartit, on l’a vu, de la même manière quel que soit le stade du bourgeon prélevé. Il en résulte qu'il n'y a, à ce point de vue, aucune modification qualitative du régénérat avec l’âge. La réalisation d'une morphologie plus ou moins complète de l'autopode traduit des dissemblances, non d'état, mais de masse.

227} STE ONSs OM différencié un zeugopode. Celui-ci, paricis représenté par des formations déficientes, quand le régénérat a été prélevé à la fin du stade cône, peut atteindre son développement complet à partir du stade palette. Cette différence dans les potentialités exprimées par les transplants, n'implique pas nécessairement une dissemblance de capacités des régénérats eux-mêmes. La position des cellules, à partir desquelles se différencieront le zeugopode, varie suivant l’âge: elles sont repoussées en direction distale au début du stade palette par la formation du stylopode et auront, dès lors, moins de chances d’être blessées par Île prélèvement dont l'action s'exerce maintenant sur l’ébauche stylopodique, qui est presque toujours détruite, même lorsqu'elle existait à l'état de cartilage différencié.

D'une manière très générale, la jambe ne se développe que si le pied est à peu près complet. Parfois cependant, le zeugopode peut se différencier, bien que l’autopode soit déficient: ces cas restent exCeptionnels. La loi est, dans l'ensemble, qu'il existe une proportionnar lité entre le nombre des doigts et la possibilité de former du 2eugopode. Cette proportionnalité ressort du Tableau XIV.

Lorsque le zeugopode se développe son aspect est tres variable.

à) Le tibia et le péroné sont de tailles égales. Ils peuvent avoir un aspect normal, être soudés par leur portion proximale, etre réduits

124 CHRISTIAN METTETAL

TABLEAU XIV 000

Nombre Nombre de régénérats avec :

Nombre de doigts totl Tarse Zeugopode Stylopode

3 Ta 13 I 0

avec une forme triangulaire ou ovoide, ou enfin former des nodules, qui ne se distinguent des tarsiens que par leur position.

b) Les deux éléments sont inégalement développés.

c) I ne s'est différencié qu'un seul cartilage qui peut être normal, réduit ou atypique.

Le matériel zeugopodique ne se répartit donc pas de manière égale entre le tibia et le péroné dont la différenciation est cependant simultanée. L'un des éléments peut même avoir un développement complet, alors que l'autre manque totalement. II semble qu'il faille distinguer, dans le zeugopode comme dans l’autopode, deux zones, l'une antérieure, l’autre postérieure, chacune ayant une évolution indépendante.

Le rapport entre la longueur du zeugopode et celle des doigts est le plus souvent supérieur à la normale (contrairement à ce que David (1932) a observé chez l'Axolotl où, dans les greffes sans base, le zeugopode, lorsqu'il se développe, reste proportionnellement beaucoup plus petit que l’autopode).

Les segments proximaux sont, en général, situés dans le corps de l'hôte; comme leur longueur est le plus souvent supérieure à celle de la totalité de l'ébauche prélevée, cette position ne peut pas résulter simplement de l'introduction de la greffe. Elle provient peut-être d'une résistance offerte par le bourgeon, dont l'épiderme aurait une croissance trop lente et qui repousserait ainsi le zeugopode dans le COTpPS.

C) — Différenciation des muscles

En l'absence de nerfs, des formations musculaires n'ont jamais été observées. Elles manquent toujours aux stades cône I et Il, même si l’innervation est assurée.

Il est possible que la musculature résulte uniquement, comme pour la queue (Naville, 1922), des bourgeons sarcoplasmiques dont on observe la formation pendant le stade cône. Ils n'existent pas encore dans le blastème chez les régénérats jeunes, lesquels sont alors incapables de différencier des muscles. Ceux-ci se forment toujours chez les régénérats plus âgés dès qu'il y a 3 doigts ou plus; ils peuvent manquer s'il n’y a qu'un ou deux doigts. Dans ce dernier cas. le faible développement du squelette indique que les conditions extérieures ont été défavorables. La différenciation des muscles nécessiterait, d’une part, la présence, dans le transplant, de bourgeons sarcoplasmiques, et, d'autre part, des conditions, en parti: culier d’innervation, permettant l'évolution de ces derniers.

D) — Différenciation de la peau

L'épiderme conserve la structure qu il avait au moment du prélèvement : il est très pauvre en formations glandulaires, et par suite, il se distingue facilement de celui du dos; il n'y a aucune transition entre les deux.

La peau s'invagine entre les doigts; ceux-ci cependant ne sont libres, en général, qu'à leur extrémité, les deux couches d’invagination avant tendance à se souder. Deux doigts sont parfois réunis dans une même gaine épidermique; il peut, au contraire, se former une digitation qui nest occupée que par des fibroblastes, ce qui indique une certaine indépendance entre le dév eloppement de lépiderme et celui du squelette.

La basale manque toujours à l'extrémité distale. Elle réapparaït

au même niveau sous l'épiderme des doigts successifs.

E) — Action du régénérat sur les tissus du support

L'épiderme de lhôte présente de nombreuses mitoses affectant surtout les cellules glandulaires « dans la région voisine du point d'implantation. Il recouvre une portion, en général réduite, du

creffon.

126 CHRISTIAN METTETAL

Parfois, et d'autant plus fréquemment semble-t-il que le bourgeon est prélevé plus jeune, le conjonctif de l'hôte réagit et forme une excroissance qui peut disparaître par la suite ou persister jusqu’à la fixation. On constate alors qu’elle est formée de conjonctif làche, entouré par l'épiderme dorsal, et que les différenciations de patte sont reportées distalement. Il ne semble pas que ces tissus participent jamais à la construction du régénérat lui-même.

F) — Détermination de la polarité des axes antéro-postérieur et dorso-rent-al

(TABLEAU XV) Quarante régénérats ont été implantés sur le dos, après rotation de 180°, en orientation homopleurale dorso-ventrale. Les résultats

positifs ont été résumés dans le Tableau XV.

TABLEAU XV

Polarisation de l’axe

Se de antéro-postérieur dorso-ventral ne [Le conforme conforme conforme conforme à l’origine au lieu à l’origine au lieu 2RDOttSEr 2 (e) 2 (e) PAIE 5664 4 O 4 (o) Cône VI et

CODE" 3 | z 3 L Cône IV et ,

ConeeLile N : ï ConcuIntse s 2 O O 2 CODEN O I O [o]

a) L'orientation de l'axe antéro-postérieur de la patte résulte de la position du doigt © 1 » qui, dans un régénérat en place, est antéroventral: chez le transplant, il sera postéro-dorsal si le développement a Heu conformément à l’origine, antéro-ventral dans le cas contraire.

Un résultat n'est donc utilisable que si l'ordre des doigts peut étre reconnu: 1] est nécessaire que le greffon présente un dévelopre-

ment suffisamment normal et que les stades de transitions, souvent

très courts, aient été observés. Les renseignements fournis par le squelette n'ont jamais été utilisés que pour confirmer les indications données par l’évolution.

La position du premier doigt n'a pu être précisée avec certitude que dans 24 cas; chez 4, il est antéro-dorsal, ce qui peut résulter d'une erreur d'orientation lors de la greffe ou d’un déplacement du régénérat après l'implantation: quoi qu'il en soit, ces transplants ne peuvent fournir aucun renseignement sur la détermination de l'axe. Il ne reste finalement que 20 cas positifs.

Aux stades palette et 2 doigts, la polarisation est toujours conforme à l’origine (6 régénérats).

Au stade cône, la polarisation de l’axe antéro-postérieur est conservée chez 11 greffons; inversée chez 3 (pour l’un par suite d'une rotation).

b) La paume, dans un régénérat en place, est postéro-ventrale; chez les transplants, elle sera donc antéro-dorsale quand le développement s'effectue conformément à l'origine.

La face palmaire ne se distingue guère de la face dorsale que par sa plus grande épaisseur; il en résulte que l'appréciation de l'axe dorso-ventral est plus subjective que celle de l'axe antéro-postérieur. Je me suis efforcé de n’utiliser que les cas les plus nets.

La position de la face palmaire a pu ainsi être reconnue chez 21 transplants. Quatre d’entre eux, où elle est postéro-dorsale, doivent être exclus. Il reste donc 17 cas positifs.

Chez les 6 régénérats greffés au stade palette et 2 doigts, la polarisation de l'axe dorso-ventral est conservée. Au stade cône, elle est inversée chez 4 greffons, tandis que 8 se développent conformément à l'origine.

c) Les 2 axes sont connus en même temps pour 15 transplants, dont 6 aux stades palette et 2 doigts (où ils sont conformes à l'origine) et 9 au stade cône. Chez ces derniers, la polarisation des 2 axes est conservée dans 6 cas: inversée dans 2; enfin pour un régénérat. au stade cône II, l’axe antéro-postérieur est conforme à l’origine, tandis que l'axe dorso-ventral est conforme au lieu: la latéralité de ce greffon a été par suite inversée.

Ces résultats sont trop peu nombreux pour qu'on puisse les con- Sidérer autrement que comme des indications pour une étude ultérieure. Ils montrent cependant avec certitude que l'orientation des > axes, définitivement fixée au stade palette, peut encore être int'er-

sée au stade cône.

128 CHRISTIAN METTETAL

Dans 1 cas, l'axe antéro-postérieur est conforme à l’origine, tandis que l’axe dorso-ventral est conforme au lieu. Il semble, par suite, que la polarisation des deux axes soit successive.

li existe ainsi une période dont la durée ne peut pas être précisée où le régénérat est déterminé comme membre mais peut fournir aussi bien une patte droite qu'une gauche suivant son point d'implantation.

L'influence de l'hôte se manifeste par la présence de duplicatures. Un transplant a développé un autopode double, constitué par deux groupes, symétriques en miroir, formés chacun par 2 doigts. Partout ailleurs, il n'y a qu'une simple bifurcation d’un ou de plusieurs doigts. Elle peut alors s'effectuer, soit suivant l’axe antéro-postérieur, Soit, plus rarement, suivant l’axe dorso-ventral. Ces duplicatures n'apparaissent que chez les greffons dont l’asymétrie est déterminée et qui ont subi une rotation de 180°, ou (S. 256) lorsque le bourgeon est implanté au milieu du dos. Elles semblent donc résulter du désaccord d'orientation entre le transplant et le support.