IV. — CONCLUSIONS

(TABLEAU XXXV

Les régénérats ont été prélevés avec une tranche de vieux tissus dont la hauteur varie entre o mm. 2 et o mm. 75; elle est le plus souvent de © mm. 5.

Les résultats des transplantations sur territoire neutre sont résumés dans le Tableau suivant (Tab. XXXV) où j'ai classé les greffons d'après le stade du bourgeon au moment de l'opération.

Sur 34 transplants, 18 se différencient; les 16 autres ne présentent

aucune évolution.

194 CHRISTIAN METTETAL

TABLEAU XXXV

Nombre de régénérats Nombre avec doigts ; | Zeugo- | Stylo- Stades Résorbés d'opérés pode pode

Cône III et

co) Cône IV. 5 Ne 0 5 CONCREEE 9 I I I D © 5 2 I Conesleeee 17 Zu 2 (o) II 5 I 19° — Potentialités des régénérats

(TABLEAU XXXWVI)

Lorsque l'évolution se poursuit, les formations sont beaucoup plus complètes avec base que sans base. Cette différence s'exprime:

A) par le degré de réalisation de l’autopode, et B) par la proportion de zeugopode différencié.

A) — L'autopode, qui est déficient dans 10 cas (il peut alor être formé par 4, 3 ou 2 doigts), est complet dans les 8 autres. San base, pendant la même période (stade cône I à cône IV, les 3 doigts ne sont présents que 3 fois sur 37 autopodes.

Cet accroissement des potentialités paraît résulter uniquement de l'augmentation du matériel par suite de l'apport d'éléments de la

base. En effet, une quantité égale de cartilage se répartit de manière semblable entre les axes digitaux dans les deux catégories d'expériences: lorsque la longueur totale « L» de ces axes est comprise entre 1 et 2 mm., la moyenne du nombre des doigts est 2 (contre 1,9 dans les greffes sans base): si « L» est compris entre 2 et

4 mm., la moyenne est de 3 {contre 3); si « L» est supérieur à 4 mm., elle est de 4,4 (contre 4,2). Ainsi, la réalisation plus complète de l’autopode, dans les greffes avec base, ne résulte pas d’une répartition différente du matériel, mais de la plus grande quantité de ce dernier. Les bourgeons atteignent une masse plus forte grâce à l'apport de matériel de la base. Cette différence, qui résulte des

mesures des axes cartilagineux, s'exprime également par la longueur du bourgeon entier, qui, avec base, mesure plus de 2 mm. dans 16 cas sur 18, alors que cette taille n'est atteinte, dans les greffes sans base, que dans 5 cas sur 37, pour les stades cône I à cône IV.

B. — 12 transplants sur 18 ont différencié un zeugopode. Chez 4, le tibia et le péroné sont présents: ailleurs, il ne se forme qu’un seul cartilage qui s'enfonce dans le corps de l'hôte. Le zeugopode se développe donc beaucoup plus souvent avec base que sans base, où il n'est présent que dans 23 cas sur 98 et où, en outre, sa présence est exceptionnelle avant le stade palette, tandis qu'avec base, sa différenciation est possible dès le stade cône I. Dans ces expériences, il n'existe aucune relation nette entre le degré de développement de l’autopode et la possibilité de former un zeugopode, ainsi que le montre le Tableau suivant (Tab. XXXVI). Au contraire, sans base, la regle est que le zeugopode ne se différencie que si l’autopode est complet.

TABLEAU XXXVI

Nombre de doigts | Nombre de cas Zeugopode Stylopode 5 te) 8 2 cL 4 I (9 3 3 O O 2 3 3 0

La différence de comportement des régénérats dans les greffes avec ou sans base ne peut résulter que: a) d’une action inductrice des vieux tissus. ou bien, b) de l'arrivée d'éléments nouveaux. J'exa-

minerai successivement ces deux hypothèses.

a) -— L'influence d'une action inductrice de la base sur la différenciation du zeugopode paraît résulter des expériences effectuées par Milojevic (1924) et par Abeloos et Lecamp (1931): un régénérat jeune, greffé sur une autre patte à un niveau plus proximal (ou plus distal), s'adapte à son nouveau point d'implantation et fournit un membre de longueur normale. Cependant, 1l parait assez invraisemblable qu'un bourgeon qui, en position hétéro-

196 CHRISTIAN METTETAT

tope, se montre, au plus, capable de différencier quelques doigts, puisse, en position orthotope, édifier un membre complet. Les conditions de prolifération meilleures ne suffisent pas à expliquer la différence dans la quantité de matériel régénératif: il semble très probable que les cellules du support ont pu participer à l'édification du blastème et qu'il y a eu, en somme, une régénération locale où le matériel greffé, qui a pu être utilisé, ne joue qu'un rôle accessoire. Les bourgeons jeunes exercent, en effet, sur les tissus sous-jacents une action prolifératrice intense qui se manifeste dans les greffes sur la queue (voir page 174) ainsi que dans les expériences de Lodijensky (1930) où le régénérat greffé en position orthotope est presque toujours supplanté par les tissus du lieu, reconnatssables grâce à la différence de pigmentation (l’auteur effectue des greffes croisées entre des Axolotl blanc et noir).

La détermination du zeugopode par une action inductrice ne semble donc pas prouvée par ces expériences. Elle permettrait d'expliquer les résultats obtenus dans les greffes sans base: l'absence de différenciation du zeugopode pouvant résulter, ou bien de ce que son matériel n'est pas encore déterminé, ou bien de ce qu'il a été détruit par le prélèvement: par sa position proximale, il est en effet, particulièrement sensible à l'opération. Mais elle soulève, par ailleurs, d'assez grosses difficultés: en effet, elle revient à admettre que le régénérat n'aurait à l’origine que des potentialités d’autopode (les seules qui se manifestent dans les greffes sans base de bourgeons jeunes), puis, qu'à partir d’un certain moment, une zone proximale recevrait, en outre, la potentialité de former un zeugopode. Cette action devrait s'exercer à un moment précis et atteindre une zone constante pour que, dans les conditions normales, les segments successifs aient leur développement complet. Elle implique, par suite, la modification dans l’action de la base au cours de la régénération. Rien n'indique qu'une semblable modification existe effectivement et elle paraît a priori assez peu vraisemblable. D'autre part, lorsque, pour une raison quelconque, la masse du blastème s'est trouvée réduite, l’induction doit cependant s'exercer sur une même étendue, et l’on aboutirait ainsi à une différenciation préférentielle des parties proximales; dès que le zeugopode est présent, c'est-à-dire, dès que l'induction à pu s'exercer, ce segment devrait avoir son développement complet; on constate, au contraire, de très fréquentes déficiences tant dans les greffes avec base que sans base. L'hvpothèse d’une induction du zeugopode, si elle ne peut pas être rejetée absolument, ne paraît pas pleinement satisfaisante. |

52 147 b) — L'influence de l'apport d'éléments nouveaux, venant de la base, sur le développement du zeugopode peut être envisagée de manières diverses.

1° — Pour Bischler (1926), la différenciation des segments successifs se ramène à un facteur quantitatif; la chute des potentialités régénératives du membre, de la base vers l'extrémité, résulterait de l'existence d’un gradient dans l’activité métabolique qui aurait pour conséquence la masse réduite des régénérats formés par les parties les plus distales. Cette hypothèse est basée sur le fait qu'après amputation à travers la cuisse désossée, 1] n’est régénéré, en principe, que le squelette des segments distaux; le fémur cependant peut être représenté par un nodule plus ou moins développé qui proviendrait d’un reliquat de matériel ayant subsisté après la formation du zeugopode et de l’autopode.

Cette interprétation semble très vraisemblable, mais il s'agit ici d'un phénomène secondaire différent de la régénération proprement dite: le nodule fémoral se différencie en direction basipète et reste cartilagineux alors que le nouveau squelette est entièrement ossifié (eu contraire, dans la régénération normale, le fémur se développe et s’ossifie en premier).

L'utilisation préférentielle du blastème pour les segments distaux est évidemment inconciliable avec les nombreux cas de développement d’un zeugopode suivi d’un autopode déficient. En effet, dans les greffes sans base où la possibilité de former un zeugopode n'apparaît qu'assez tard, on peut supposer que la répartition du matériel est déjà effectuée au moment du prélèvement et qu’elle se trouve ensuite modifiée par des facteurs extrinsèques dont certains pourraient s'attaquer plus particulièrement à la partie distale (retard dans l'établissement de la circulation veineuse provoquant la formation d’un œdème), tandis que d’autres détruiraient la partie proximale (blessure due au prélèvement. infection). Il n'en est pas de même dans les greffes avec base, où la possibilité de former un zeugopode apparaît, dès le stade cône [, et où, par suite, la répartition du matériel doit s'effectuer après la reprise du greffon.

On pourrait alors modifier l'hypothèse de Bischler en admettant que la répartition ne s'effectue pas seginent par segment dans la zone pré-axiale, le matériel est destiné d’abord à

mais que, digital, le reliquat pouvant étre utilisé pour

former le premier axe le tibia: un processus analogue s'obser pement inégal des zones pré- et post-axiales s’ob-

verait dans la zone post-

axiale. Le dévelop

198 CHRISTIAN METTETAL

serve parfois dans les greffes sans base: elle se traduit, en particulier, par la réduction ou l'absence du doigt «1 ». Lorsque lautopode est réduit, le zeugopode est presque toujours limité à un seul cartilage qui pourrait alors correspondre à l'une des zones dont le matériel serait plus considérable. Cependant, il semble difficile d'expliquer ainsi tous les cas de développement d'un zeugopode suivi d'un autopode déficient. En effet, dans les résultats obtenus par Buttner (1930) par une méthode absolument différente‘), le riembre (qui se développe en place) différencie toujours un zeugopode, parfois complet, même lorsque l’autopode n'est formé que par 4, 3, 2 doigts ou 1 seul. La présence simultanée du tibia et du péroné indique que, même dans une zone, la différenciation préférentielle des parties proximales n'est pas constante.

Ni l’hvpothèse d’une action inductrice de la base, n1 celle d'une différenciation privilégiée des segments distaux, ne permettent d’expliquer tous les cas observés dans la répartition des éléments du blastème entre le zeugopode et l’autopode.

2° On peut exclure une 3° hypothèse qui serait celle d’une utilisation du matériel suivant l’ordre de formation des ébauches: en effet, le zeugopode qui, dans la régénération normale, se différencie en premier devrait être toujours présent et, ceci, aussi bien dans les greffes sans base qu'avec base, ce qui est en opposition avec les faits chservés. Il en résulte que la répartition du matériel entre les segments successifs précède leur différenciation: au moment où celle-ci va débuter, il existe déjà un matériel autopodique et un matériel zeugopodique à potentialités définies.

3 -— La détermination de ces ébauches pourrait résulter de l'origine des cellules du régénérat et de la date de leur mise en place.

Après transplantation d'un tarse entier à la place du fémur, Bischler (1926) observe qu'il ne se développe jamais qu’un autopode si la section passe à travers le greffon, qui édifie alors tout le régénérat (dont le matériel est fourni par une zone très étroite immédiatement voisine du point d’amputation). Si, au contraire, les éléments locaux ont pu participer à la formation du blastème, soit que la section passe un peu au-dessus du greffon, soit, au contraire, qu'elle ait enlevé une trop grande partie de ce dernier, il se différencie, en outre, un zeugopode.

1 cartic c c H+ér: 1

) Buttner exarticule la patte postérieure au niveau de la hanche et observe les régénérations successives. Les membres présentent souvent des déficiences considérables.

Ces résultats me semblent indiquer l'existence de différences de nature entre les divers segments du membre, qui auraient la valeur de territoires secondaires, dont les cellules resteraient capables de fournir ce qui est distal mais non ce qui est proximal. L'influence de l’origine serait ainsi restrictive et aurait comme conséquence que jamais un régénérat de zeugopode ne pourrait différencier du stylopode.

La répartition du matériel d'un blastème entre les segments successifs, dans la limite des potentialités ainsi fixées, pourrait alors résulter de la date de la mise en place des éléments. La régénération est, en effet, caractérisée par l'arrivée continue de cellules dans le blastème: cette émigration se poursuit pendant toute la durée du stade cône, les éléments nouveaux repoussent les autres en direction distale. Il en résulte qu'au moment de la différenciation, qui est sensiblement simultanée pour le zeugopode et pour les deux premiers doigts, certaines cellules se trouvent déjà en place depuis longtemps, alors que d'autres viennent d’arriver. Ces dernières différencieront le zeugopode, tandis que les autres formeront l’autopode. On est ainsi conduit à l'hypothèse suivante.

Toutes les cellules de la régénération auraient, à l’origine, des potentialités totales de membre dans la limite du niveau de section: après amputation à travers la cuisse, elles pourraient former ou bien une jambe ou bien un pied. Ces potentialités se trouveraient ensuite restreintes avec l’âge, de telle sorte que les éléments arrivés en premier dans le blastème et qui, au moment de la différenciation. seront les plus âgés, en tant que cellules de la régénération, ne pourront plus former que de l’autopode; au contraire, ceux dont l’émigration est plus récente conserveraient, en outre, la possibilité de former un zeugopode: c'est cette dernière capacité qui s'exprimera effectivement par suite de la différenciation plus précoce du segment proximal. <

Lorsque l'arrivée des éléments et leur prolifération s'effectuent normalement, le zeugopode et l’autopode ont tous deux leur développement complet (cas de la régénération normale). |

Le bourgeon jeune n'est constitué que par des éléments qui seront les plus âgés au moment de la différenciation, c'est-à-dire par ceux qui auront leur potentialité restreinte LS DORA former que de l’autopode; celui-ci se développe seul si l'émigration de cellules nouvelles est interrompue par la séparation du bour-

œeon d'avec sa base. Lorsque le prélèvement est effectué plus targeo

civement, les éléments arrivés en dernier auront pu conserver des

200 CHRISTIAN METTETAL

potentialités de zeugopode qui se différenciera si toutefois ces cellules n'ont pas été détruites par l'opération. La quantité du matériel disponible pour ce segment sera d'autant plus forte que le régénérat était plus âgé lors de l'opération: à partir d’un certain moment, toutes les cellules qui émigrent dans le régénérat conservent leurs potentialités de zeugopode; il en résulte un degré de réalisation meilleur. Tout se passe comme, si en prélevant un régénérat jeune, on greffait seulement la portion la plus distale de l’ébauche, avec un régénérat plus âgé, une zone plus étendue etc. ... Ainsi s'expliquerait l'augmentation graduelle des potentialités zeugopodiques dans les greffes sans base.

Dans les transplantations avec base, l'arrivée d'éléments nouveaux est interrompue pendant un certain temps, puis reprend, mais avec une vitesse très réduite (par suite des déficiences des nerfs et des vaisseaux). Si le bourgeon était très jeune au moment du prélèvement, il s'agira d’une véritable régénération nouvelle, le matériel déjà en place étant négligeable. L’émigration cellulaire et la prolifération seront ralenties, mais de manière égale pendant toute la durée de l’évolution: les deux segments se différencieront et présenteront des déficiences à peu près de même ordre. C’est, en effet, ce que l’on observe pour les stades cône I et cône IT. Si le régénérat était plus âgé, son matériel, à destinée autopodique, viendra s’ajouter à celui issu de la base: les deux segments se différencieront, mais l’autopode sera proportionnellement mieux développé que le zeugopode, ce qui est le cas pour les stades cône III «et cône IV, où la moyenne du nombre des doigts passe de 3, 3 à 4, 4, tandis que ni la proportion de zeugopode, ni son degré de réalisation ne sont améliorés.

Dans certains cas cependant, l’arrivée de cellules nouvelles peut étre de nouveau interrompue, vers la fin de la régénération, par suite de la destruction de la base; celle-ci, qui peut être plus ou moins tardive, est toujours totale au moment de la fixation. Si cette destruction est précoce, on retombe dans le cas des greffes sans base et le zeugopode pourra être déficient où manquer.

Dans les expériences de Buttner, il semble que les morphologies incomplètes résultent de la réduction de la « surface de sortie » dont Faction se fera surtout sentir au début de la régénération: il en résulte un développement proportionnellement meilleur du zeugopode que de l’autopode.

Il semble donc que cette hypothèse puisse rendre compte des différentes répartitions du matériel entre les segments successifs.

c) — Deux transplants (l’un au stade cône I, l’autre au stade cône IIT) ont différencié un fémur qui, sans base, n’est jamais réprésenté avant le stade palette. Il est toujours suivi, dans ces deux catégories d'expériences, par un zeugopode et un autopode complets (sauf chez S. 94 où il n’y a que 3 doigts).

Dans la régénération normale, tandis que le zeugopode et l’autopode tirent leur origine du blastème proprement dit, le stylopode parait résulter plutôt d’un processus de complètement de l’ancien squelette (page 51). Dans les greffes sans base au stade palette, son ébauche existe déjà au moment du prélèvement: sa présence ne dépend que de facteurs extrinsèques. Dans les greffes avec base, il peut s'agir d'une régulation secondaire analogue à celle observée Par Bischier.

2° — Résorption

La possibilité d’une évolution paraît dépendre exclusivement du régénérat lui-même: plus celui-ci est jeune, plus on observe fréquemment la régression du bourgeon qui est bientôt suivie par la cicatrisation de l’ancienne surface de blessure rendant ainsi impossible toute régénération nouvelle à partir de la tranche de base qui, elle-même persiste pendant un temps plus ou moins long sans modifications apparentes.

L'absence d'évolution qui se ramène ainsi à la résorption du régénérat déjà édifié s’observe:

a) Au cône I, dans 11 cas sur 17 (64%) contre 19 sur 27 (70%) pour les greffes sans base.

b) Au stade cône IE, dans 5 cas sur 9 (55%) contre 10 sur 22 (45%).

c) À partir du stade cône III, tous les greffons se différencient, qu'ils aient été transplantés avec ou sans base

Le nombre d’opérés est suffisant pour exclure tout résultat de hasard, et les pourcentages de résorption sont certainement valables, au moins comme ordre de grandeur; or, ils sont sensiblement Îes mêmes pour un stade donné dans les greffes avec base et dans les greffes sans base. Il en résulte que la présence des vieux tissus n'a eu aucune action importante à ce point de vue.

202 CHRISTIAN. METTETAL

La résorption ne peut donc provenir que de facteurs communs aux deux expériences, c'est-à-dire de la rupture temporaire des connexions vasculaires et nerveuses.

1) L'absence d'irrigation sanguine et, par suite, de nutrition des éléments, entraîne fatalement, pour peu qu’elle se prolonge, la nécrose de la région intéressée. En outre, au moment où la vascularisation se rétablit, elle peut provoquer la formation d'ædèmes qui ont pour conséquence la dégénérescence d'une zone plus ou moins étendue du transplant.

2) L'influence du système nerveux reste controversée. Wintrebert, dès 1903, a montré que la régénération n'est pas entravée par la résection de la moelle dorso-lombaire et sacrée et que, par suite, ni l'innervation sensitive ni l’innervation motrice ne sont indispensables. Par contre, Schotté (1926) constate que la section des nerfs du plexus brachial (ou crural) suivie de l’amputation du membre a, le plus souvent, pour conséquence l'absence de toute régénération. Celle-ci, cependant, a eu lieu, dans quelques cas en l'absence de toute innervation visible à l'examen anatomique (ce qui confirme les résultats de Wintrebert);: Schotté admet la présence, dans ces membres, de fibres sympathiques non visibles, et qui auraient un rôle essentiel. Il lui semble, en effet, peu vraisemblable que tous les autres cas où il y a concordance entre l'absence de nerfs et l'absence de régénération soient le résultat du hasard; la section des vaisseaux au cours de l'opération ne suffirait pas à les expliquer comme l'ont montré les expériences de contrôle: si les branches du plexus sont préparées, mais non sectionnées, la régénération a lieu normalement. Cependant, la présence de fibres sympathiques n'avant pas été constatée de manière directe dans ces cas exceptionnels de régénération sans nerfs visibles, 11 n’est pas possible d'affirmer qu'elles étaient effectivement présentes. [Je continuerai cependant à désigner la lésion responsable des résultats de Schotté sous le nom de « rupture de l'innervation », cette explication paraissant la plus vraisemblable dans l’état actuel de la question. Du reste, méme si l'absence de régénération n'était pas due à la rupture des nerfs, Sa cause serait certainement réalisée aussi quand le régénérat est transplanté.

Lorsqu'il existe déjà un bourgeon, la section des nerfs provoque, s1l est encore jeune, sa régression qui, dans 6 cas sur 10, est suivie de la cicatrisation de la blessure et de l'absence de toute régénération ultérieure. Cette proportion est presque identique à celle ob-

servée dans mes propres expériences où elle varie entre 45 et 70% contre 60% chez Schotté.

L'absence temporaire de nerfs et de vaisseaux, qui résulte nécessatrement de l'opération, suffit à expliquer la régression de jeunes bourgeons. Elle n'a pas les mêmes effets sur les régénérats plus agés: la proportion de résorbés est plus faible au stade cône II qu'au stade cône I: à partir du stade cône III, les bourgeons se développent tous, qu'ils aient été prélevés avec ou sans base. Les conditions du lieu d'implantation seront différentes pour chaque bourgeon, mais, pour l'ensemble des résultats, les mêmes conditions se trouveront vraisemblablement réparties de manière analogue à chaque stade. La diminution du nombre des résorbés avec l’âge indique donc que, plus le bourgeon est jeune, pl il est nécessaire que Îles conditions locales soient favorables pour que l'évolution reste possible. La résorption doit s'effectuer d'autant plus rapidement que le régénérat est plus jeune: si l’innervation (ou la vascularisation) se rétablit au bout d’un certain temps, le cône I aura complètement régressé, alors que le cône IT pourra encore évoluer. Cette différence de comportement résulte d’abord des dissemblances quantitatives existant entre les bourgeons. Ceux-ci, quei que soit leur âge, présentent, le plus souvent, après la greffe, une diminution de volume, parfois très forte, qui laissera à un bourgeon agé un matériel suffisant pour poursuivre son évolution, mais entrainera la disparition totale d’un cône jeune plus petit: les 1/2 distales de régénérats, au stade palette, dont la masse s’est trouvée réduite, peuvent parfois être résorbées. La différence de taille des régénérats entraine donc une sensibilité différentielle à une suppression de l'innervation de même durée. Il est possible, en outre, que d’autres facteurs interviennent. On constate, en effet, qu'il existe, en ce qui concerne la possibilité d’un développement, une coupure brusque entre les stades cône II et cône III: il semble que s'il n'y avait entre ces bourgeons que des différences quantitatives, la diminution du nombre des résorbés s’effectuerait de manière plus graduelle. Il résulte du reste des expériences de Schotté que la présence de nerfs n'est pas nécessaire a un même degré aux différentes époques de l'évolution: à partir du stade palette, la différenciation se poursuit même pendant la durée où l'innervation est interrompue, et, à partir du stade de l'indication des doigts, le régénérat peut, en outre, s'accroître pendant cette période. Le rôle de l'innervation semble diminuer à mesure que le régénérat est plus âgé. En accord avec ces faits, j'ai pu observer, dans quelques cas, la formation de cartilages,

en l'absence de nerfs, à partir de régénérats en palette.

204 CHRISTIAN -METTETAL

La diminution du nombre de résorbés avec l’âge paraît résulter principalement de l'augmentation de la taille des régénérats et en partie aussi de modifications qualitatives. Mais ces dernières sont absolument indépendantes de la base, puisque la présence de celle-ci ne modifie en rien la proportion de résorbés: il s’agit donc de processus se passant dans le bourgeon lui-même.

30 — Rôle de la base

Un segment de membre transplanté sur le dos est capable de reconstituer sa portion distale, même si aucun bourgeon n'existe antérieurement. Cette régénération qui résulte d’une prolifération des éléments du transplant ne peut débuter qu'après rétablissement des connexions vasculaires et nerveuses, ce qui explique que la tranche de base, transplantée en même temps qu'un bourgeon, n'empêche pas la résorption de ce dernier, l’arrivée du matériel nouveau ne débutant qu'à un moment où les connexions vasculaires et nerveuses sont rétablies, c’est-à-dire lorsque la persistance du régénérat est assurée, même si il a été prélevé sans base. Par contre, dès ce moment, les cellules venant de la base vont émigrer dans le bourgeon, ce qui aura pour conséquence :

a) Que le régénérat renfermera, au moment de sa différenciation, des éléments jeunes ayant conservé la potentialité de zeugopode qui pourra ainsi se développer beaucoup plus souvent que sans base;

b) Que la quantité de matériel sera accrue et que le degré de réalisation de chaque segment sera meilleur.