RÉSUMÉ ET CONCLUSIONS

I. — Le but de ce travail a été de préciser les facteurs conditionnant la morphologie des régénérats de patte chez les Batraciens urodeles.

IT. — Des Tritons adultes et des larves de Salamandre ont été utilisés. L'amputation a été effectuée à travers le stylopode. Les animaux ont été maintenus à la température constante de 22’.

A) — La régénération normale

III. — Le simple examen des membres, après amputation sans aucune autre intervention expérimentale, a permis de reconnaitre l’existence d’une période de cicatrisation précédant la régénération proprement dite. Sa durée est indépendante de la vitesse de croissance du bourgeon: en particulier, dans le cas d’une deuxième amputation effectuée à la limite des tissus régénérés, la période de cicatrisation est considérablement raccourcie, tandis que la vitesse de développement du régénérat lui-même est inchangée. Il s’agit de deux processus successifs mais distincts.

L'influence de la saison sur la vitesse de régénération se ramène à celle de la température: lorsque celle-ci est constante, la régénération s'effectue à la même allure au mois de janvier ou au mois de juin.

Pour classer d’une manière précise les étapes de la régénération des subdivisions basées sur la forme des régénérats ont été établies à l’intérieur du stade cône.

IV. — L'étude histologique des régénérats n’a été effectuée que chez les larves de Salamandre.

a) — La période de cicatrisation est occupée, une fois la fermeture de la blessure achevée, par des processus de résorption des parties molles, et en particulier, des muscles: il n’y a aucune attaque du squelette ni aucun processus régénératif à ce moment. À l'échelle histologique, les processus que l’on observe pendant cette phase ne paraissent pas présenter des différences essentielles avec ceux qui se produisent après l'amputation d’un membre chez un animal inca-

pable de le régénérer.

b) — Le début de la régénération proprement dite est marquée par l'apparition de «cellules de la régénération». Celles-ci pré-

sentent des caractères cytologiques particuliers: elles sont caractérisées par un très gros noyau clair, à chromatine poussiéreuse et qui renferme un ou deux nucléoles très nets; le protoplasme, peu colorable, est ramifié. Elles dérivent de la transformation d'éléments du moignon sans que l’on puisse encore préciser, de manière certaine, de quelles espèces cellulaires elles proviennent. Elles se groupent en un blastème dont la croissance résulte principalement, au moins au début, de l'apport de cellules nouvelles qui viennent de la base et repoussent distalement les cellules arrivées en premier.

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La résorption du cartilage débute peu après l'arrivée au blastème des premières cellules de la régénération. Cette résorption résulte en partie de l’activité de macrophages mais surtout de celle des cellules cartilagineuses elles-mêmes qui persistent après la dissolution de la substance fondamentale et se groupent à l'extrémité de l'ancien fémur formant ainsi, dans le blastème, un amas proximal bien distinct. Le périoste ne subit aucune atteinte, et la destruction du cartilage détermine la formation d'une moelle dont l'axe est occupé par les chondroblastes libérés. On trouve également dans cette moelle des cellules géantes qui ne participent pas à la construction du régénérat et dont on peut suivre la dégénérescence au moment où le nouveau cartilage se différencie.

c) — La différenciation du nouveau cartilage commence au moment où le régénérat s'applatit en palette. Le fémur se complète en premier lieu à partir d’un groupe distinct de cellules, originaires pour la plupart de l’ancien squelette (chondroblastes libérés. cellules du périoste). Le squelette du zeugopode se différencie ensuite, puis celui de l’autopode à partir du blastème proprement dit. La différenciation de ce squelette distal a été suivie en comparaison avec la forme extérieure du régénérat.\ Son premier indice est, dans le zeugopode, le groupement des cellules du blastème, disposées jusque là de manière uniforme, suivant deux axes, ébauches du tibia et du péroné. Les ébauches des doigts apparaissent ensuite successivement (le doigt « 1 » en premier) en même temps que les axes tibial, central, et péronéal du tarse s'individualisent. Cette différenciation ne s'effectue donc pas suivant l'ordre de mise en place du matériel: contrairement à ce que l’on observe habituellement, elle débute parmi les cellules arrivées en dernier.

B — Recherches expérimentales sur la détermination des régénérats V.— Les expériences suivantes ont été effectuées : 1 — Transplantations sans base de régénérats aux divers stades de

leur évolution sur territoire neutre (Triton et Salamandre) et sur la queue (Salamandre);

2 — Transplantation de la moitié distale de régénérats aux stades palette et 2 doigts (Salamandre);

3 —— lransplantation de régénérats avec base (Salamandre).

VE Chez les larves de Salamandre, certains au moins des plus jeunes cônes utilisés (stade cône I: page 112 et Fig. 5) donnent, après avoir été séparés de leur base et transplantés sur un territoire neutre (tête ou dos), des formations de patte et sont donc déjà déterminés. L'examen histologique de bourgeons au stade cône I, en tout comparables aux premiers cônes déterminés, ayant le mème âge, la même forme et les mêmes dimensions, montre qu'ils ne renferment que quelques cellules de la régénération qui constituent, à

elles seules, le premier blastème. On peut donc afhrmer qu'il ne se

forme pas, dès le début, un blastème indifférent qui sera ensuite déterminé, mais au contraire, que la détermination coïncide avec le début de la régénération.

Des résultats semblables ont été obtenus sur les Tritons adultes. Cette détermination extrêmement précoce ne constitue donc pas un caractère particulier aux formes larvaires (où la période d’indétermination pourrait être masquée par la rapidité des processus)

à une espèce prise en particulier.

Cette détermination s'observe également quand le régénérat prélevé sans base est implanté sur un territoire hétérodyname, en l'espèce la queue, car on assiste à sa différenciation conforme à son origine. Les prétendues inversions de la détermination qui ont été signalées résultent de l'invasion du régénérat par les cellules de l’hôte qui évoluent en une queue suivant leur origine, tandis que la partie du transplant non envahie donne une patte. Il en résulte une chimère où, suivant l'importance respective des cellules de l'hôte et de celles du greffon, l’une des formations peut prédominer ou même exister seule. Les tissus de la queue prolifèrent d'autant plus que l'on a greffé un régénérat plus jeune, ce qui indique l'existence d'une action mitogénétique très forte exercée par le régénérat jeune sur les tissus du support. Cette action cesse au stade palette.

VIT. — Dans les transplantations sans base sur territoire neutre, on constate que, plus les régénérats sont jeunes, plus souvent on observe la résorption du greffon. Celle-ci ne résulte pas de l'absence des tissus anciens du moignon à la base du bourgeon-greffé: elle a lieu aux mêmes stades (cône I et cône IT) et suivant des proportions analogues dans les greffes avec base. Cette résorption parait avoir pour cause les conditions défavorables du lieu d'implantation auxquelles les bourgeons jeunes sont particulièrement sensibles à cause de leur masse réduite: les greffons constitués seulement par la partie distale de régénérats âgés peuvent également être résorbés.

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Quelques transplants n’ont abouti à aucune différenciation. Leur taille est toujours très faible: ils ne sont formés que par un petit nombre de cellules, et leur masse paraît trop faible pour que du cartilage puisse se différencier, toute question de détermination mise à part. Ces formations semblent constituer une transition entre les greffons qui se résorbent et ceux qui évoluent en des pattes plus ou moins déficientes.

VIII. — Le degré de réalisation du membre est, dans les greffes sans base, d'autant meilleur que le régénérat était plus âgé au moment du prélèvement.

a) — En ce qui concerne l'autopode, le degré de sa réalisation dépend uniquement de la quantité du matériel apporté à ce segment: des mensurations précises ont montré qu'une même quantité de cartijage se répartit toujours de manière semblable, que le régénérat ait été prélevé avec ou sans base et quel que soit son âge au moment de l'opération. [1 y a, dans les cas de déficience, développement, non pas d’un autopode complet en miniature, mais d’un autopode incomplet, où chaque os représenté a sensiblement ses dimensions normales. Le matériel est utilisé en principe par Îles doigts successifs dans l’ordre d'apparition de leur ébauche: en conséquence, les déficiences frappent d’abord les derniers doigts, qui peuvent manquer, alors que les autres ont leur plein développement. Cependant, dès le stade cône, l’évolution des régions antérieure (destinée à former le doigt « 1») et postérieure (à partir de laquelle se développeront les doigts suivants) présentent une certaine indépendance qui tient probablement à leur détermination préalable: en effet, le doigt « 1 » peut manquer, alors que les autres sont présents.

b) — Le développement du zeugopode présente une indépendance manifeste, puisqu'il peut être présent lorsqu'il n’y a que deux doigts et absents lorsqu'il v en a trois ou quatre. Les résultats obtenus ne semblent explicables nt par l'hypothèse d’une action inductrice émanant de la base et agissant directement pour déterminer le zeugopode, n1 par celle d’une utilisation préférentielle du blastème par les parties distales. 7/7 semble que la détermination des segments successifs du membre résulte de la mise en place progressive du matériel régénératif: les cellules de la régénération qui auraient, à l'origine, la possibilité de former tout ce qui est distal au point d'amputation, perdraient, avec l’âge, une partie de leur capacités, de telle sorte que les cellules arrivées en premier et qui ont été

repoussées distalement par la venue d'éléments nouveaux ne pourraient plus, au moment de leur mise en place, former que de l’autopode: elles seraient ainsi déterminées non plus seulement comme membre mais encore comme autopode. Celles dont la venue est plus récente auraient une détermination moins précise et conserveraient la possibilité de différencier un zeugopode. Si l'apport de cellules est arrêté prématurément, il en résultera des déficiences du zeUgOpode où même son absence complète.

IX. — Les transplantations orientées de régénérats sans base en position hétérotope, effectuées pour rechercher à quel moment se détermine les axes de la patte, n’ont donné que très peu de résultats utilisables par suite du faible développement des régénérats dans de telles conditions. Cette détermination qui est en tous cas assurée au stade palette, semble ne pas exister à l’origine et s'effectuer au cours du stade cône, mais la période critique n’a pas pü être précisée.

X.— Le fait que les axes transversal et dorso-ventral du membre peuvent être inversés montre que leur détermination s'effectue sous l'influence des tissus environnants; par contre, rien n'indique l’existence d’une action inductrice à distance, émanée de la base, sur la détermination comme membre du régénérat dont la formation résulte du groupement en un blastème de cellules de la régénération qui proviennent toutes du moignon.

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