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le Spirochète était visible sur les frottis. Favre et N. Fiessinger pensent que l'abondance des Spirochètes est plus grande chez les ictériques arrivés à la période d’apyrexie.

2° Cuzrures. — Les auteurs japonais Ito et Matsuzaki ont cultivéle Spirochète sur divers milieux : gélose et gélatine au sang, sérum humain, sérum de vache, liquide d’ascite. La température optima est 22-25 degrés.

Ces cultures inoculées au Cobaye reproduisent la maladie et sont repiquables sur les mêmes milieux. Pour les repiquages il faut examiner les cultures tous les trois jours et choisir le moment de développement intense. |

3° INOCULATION AUX ANIMAUX, — C'est actuelle: ment la méthode de choix. La spirochétose peut être inoculée à différents animaux : Cobaye,Lapin et même Marmottes (X. Sawae), mais l'animal de choix pour le spirochète qui nous occupe est le Cobaye.

Etant donné que l’on ne connaît pas bien actuellement la durée exacte des périodes de septicémie et d'élimination urinaire dans la spirochétose,il est bon d’inoculer et le sang et l’urine d’un même malade. On prélève avec les précautions d’asepsie habituelle par ponction veineuse, 10 centimètres cubes de sang au malade ; aussitôt après la prise on inocule ce sang à un ou mieux à deux Cobayes à raison de o centimètres cubes par animal. De même on inocule à un ou deux Cobayes 5 centimètres cubes d'urine par animal. Si possible, on centrifuge l'urine et on

injecte environ o emc. 5 du culot de centrifugation (Circulaire n° 5.308/S du G. Q. G.).

Les inoculations seront faites le plus près possible

du début de la maladie. On peut employer la voie sous-cutanée, intra-péritonéale ou même buccale, la première est préférable en raison des infections concomitantes qui peuvent exister. Les Cobayes seront suivis pendant une vingtaine de jours ; dans les cas positifs, ils succombent au bout de quatre à douze jours avec des lésions caractéristiques.

. L. Martin et A. Pettit ont donné une description très précise: de l'évolution de la maladie chez le Cobaye ; nous ne saurions mieux faire que de la reproduire : L

« Dans les cas positifs, le Cobaye inoculé ne tarde pas à présenter une poussée fébrile, quelques jours après, l'animal devient mou, perd de la vivacité et son poil se hérisse ; ultérieurement, des hémorragies vulvaires et surtout nasales peuvent se produire, et la conjonctive s’injecte de dilatations varicoïdes. Quelque temps avant la mort, les sclérotiques, les muqueuses labiaies, anales, scrotales et vulvaires, ainsi que la peau se colorent en jaune ; l’urine renferme des pigments biliaires, de l’albumine et des cylindres. Après une période d’hypothermie plus ou moins longue, l'animal suecombe dans l’adynamie, en un laps de temps assez variable (quatre, six, huit jours, parfois davantage). La plupart des tissus et organes présentent une teinte ictérique manifeste ; on observe en outre, des œdèmes, des hémorragies

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ou suffusions sanguines,en particulier dans la graisse des régions crurales et axillaires, dans les poumons, dans les intestins, dans les surrénales, dans les reins, dans les muscles striés, etc. Nombre d'organes, enfin, sont le siège de lésions histologiques : dégénérescence graisseuse, nécrose et légère transformation lymphoïde au niveau du foie, néphrite épithéliale intense avec cylindres abondants ; infaretus hémorragiques et macrophagie dans les pou- MONS ; endocardite discrète, hémorragie des surrénales ; pycnose et hématophagie dans la rate ; petites hémorragies et hématophagie intense dans le ganglion lymphatique.

«€ Chez le Cobaye,le Spirochète est facilement mis en évidence dans l’urine, dans le sang et dans les divers organes, notamment dans le foie, les reins et les surrénales par les méthodes indiquées précé- ‘dermment. Le procédé le plus rapide consiste à examiner à l’ultramicroscope du suc hépatique, dilué ou non, dans un liquide isotonique. »

4° RÉACTIONS HUMORALES. — Deux méthodes ont été utilisées dans ces derniers temps: la réaction de neutralisation et la réaction de déviation du complément. ;

a) Réaction de neutralisation. — La raréfaction des Spirochètes chez l’homme avait fait penser aux auteurs japonais que la spirochétose peut produire dans l’organisme des phénomènes d'immunités attestés par la présence d'anticorps dans le sérum. De fait, ils ont montré que le phénomène de Pfeiffer

est positif, et que de plus le sang des malades convalescents de spirochétose neutralise in vitro le sang virulent. Le sérum d’un malade convalescent, inoculé à un Cobaye en puissance d’ictère et d’hémorragie, peul faire disparaitre les Spirochètes du sang en quelques heures (d’une demi-heure à trois heures et demie) ; sur les coupes de foie traitées par l’imprégnation argentique, on ne trouve plus alors qu’un petit nombre de Spirochètes dégénérés. Les anti-corps apparaîtraient dans le sérum vers le deuxième septénaire et y persisteraient pendant plusieurs années.

L. Martin et A. Pettit pensent que cette notion peut servir au diagnostic ; sur une dose rapidement mortelle de virus, ils font agir, in vitro, 1 à 2 centimètres cubes du sérum à expérimenter; dans les cas positifs, le Cobaye inoculé ne présente pas de troubles, alors que le témoin succombe avec Îles symptômes de la maladie. Cette réaction positive avec un sérum de spirochétosique est négative avec les sérums neufs d’'Homme et de Cheval.

b) Déviation du complément. — Costa et Troisier ont pensé qu'il serait intéressant, en raison de la parenté zoologique des deux maladies, d'étudier la réaction de fixation de la syphilis dans la spirochétose ictéro-hémorragique. Ils ont ainsi montré que la réaction de fixation de la syphilis peut être assez fréquemment positive dans la spirochétose, fait d'autant plus intéressant que la réaction était restée négative avec le sérum des malades atteints d’ietère infectieux commun. |

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L. Martin et A. Pettit ont montré que non seulement la réaction est positive avec un antigène syphilitique et un sérum de spirochétosique, mais que la réciproque est vraie : en prenant comme antigène un foie de Cobaye riche en Spirochètes on obtient un résultat positif aussi bien avec du sérum de spirochétosique qu’avec du sérum fortement syphilitique.

Ces réactions ne pouvant pas toujours être facilement pratiquées dans les laboratoires militaires, la circulaire n° 6226/S du G. Q. G. prescrit que «chez les malades suspects d’ictère spirillaire, il soit procédé au prélèvement de 20 centimètres cubes de sérum, qui seront envoyés au médecin aide-major Pettit (Institut Pasteur, 25, rue Dutot, Paris).

On voit que s’il reste encore à faire dans cette voie au point de vue scientifique, on peut considérer qu’au point de vue pratique on a déjà des méthodes suffisantes pour établir un diagnostic précis de spirochétose ictéro-hémorragique. Et nous conclurons, avec M. le professeur Chauffard (Rapport à l’Académie de Médecine) : « L. Martin et A Pettit ont rendu le très grand service de nous initier à ces recherches, de trouver et de démontrer les premiers cas reconnus en France, de nous mettre en mains une technique aussi simple dans ses procédés que rigoureuse et précise dans ses résultats. l’ar cela même, ils auront apporté à l’histoire de la spirochétose ictéro-hémor-

ragique une contribution très personnelle ».