DOSAGE DIRECT
Dans un tube préalablement étalonné pour l’appareil de Kenneth-Evelyn et jaugé à 10 cm3 on met :
2 cm3 du filtrat; 3 cm? d’eau distillée; + 0 cm3 5 d’une solution de nitrite de soude à 0 g. 1 %,
on mélange par agitation et on attend 3 minutes.
Ajouter 4 cm de la solution-tampon.
Mélanger de même; attendre encore 2 minutes.
Ajouter 3 em de la solution alcoolique de diméthyl-a-naphtylamine. . |
Compléter à 10 cm avec de l’eau distillée et mélanger.
Parallèlement, il faut préparer un tube témoin servant de repère à l’appareil.
Bois. 3%
SOI MEEE On y met
{ en d'acide trichloracétique; 4 emè d’eau distillée; plus les autres réactifs.
L'appareil de Kenneth-Evelyn est réglé avec le témoin, puis celui-ci est remplacé par le tube à essayer.
La déviation G de l’appareil donne, dans la table correspondante, le chiffre L, et ainsi on peut, à l’aide de la courbe, avoir immédiatement la concentration du sang en sulfamide.
29 DOsAGE TOTAL. e
On se sert des tubes précédents, dans lesquels on met :
î cm du filtrat sanguin tr ichloracétique; 4 cm? de HCI normal;
on place 45 minutes au bain-marie bouillant, en évitant une trop forte évaporation. :
Le mélange refroidi, on y ajoute 2 em d’eau distillée. Après ces divers temps, le protocole de la réaction se répète identiquement à celui précédemment utilisé pour le dosage direct.
Le même tube témoin est aussi employé.
B. — Dosage dans les urines.
Seul, le mode de prélèvement varie, les temps du dosage n'étant aucunement modifiés en ce qui concerne la sulfamide directe et totale.
On prélève dans un ballon jaugé à 50 cm3 (en connaissant la quantité d'urine émise par le sujet dans les 24 heures le jour de l’expérience), 1 cm d'urine, auquel on ajoute 10 cm8 d'acide trichloracétique à 20 %.
Eau en quantité suffisante pour 50 cm. Mélanger.
On filtre si l’urine est trouble.
On met dans un tube destiné à l'appareil de Kenneth- Evelÿyn : 2 cm? d'urine diluée au 4/50 pour le dosage direct, 1 cn pour le dosage total. Les autres temps de la réaction
étant identiques à ceux effectués pour le sang dans les deux cas.
Pour contrôler la réaction, on utilise les tubes témoins, en vériliant fréquemment au cours du dosage la constance du point fixe. :
L'appareil utilisé a présenté à ce point de vue, après correclion, une constance remarquable. Ainsi, des dosages répétés à 10, 60, 120 minutes, et même 24 heures d’intervalle, donnèrent des résultats identiques.
Il résulte de tout cela que, n’ayant plus de teintes parasites et la stabilité de la réaction étant assurée par cette méthode, les résultats obtenus furent rapides et précis.
La sensibilité est considérable, puisqu'elle nous a permis de doser jusqu’à 2 microgrammes en sulfamide,
De plus, la loi de Beer-Lambert joue dans ces conditions et permet d'utiliser une gamme stable ou une courbe d’étalonnage ce dernier procédé ayant eu notre préférence.
