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20 La tension superficielle des globules rouges va en diminuant progressivement dans l’ordre : lapin, chien, cheval, marmotte et anguille.

Quelle importance biologique peuvent avoir ces constatations ?

Nos analyses nous disent que les globules rouges ont une tension superficielle basse, beaucoup plus basse que celle du milieu externe où &s $e trouvent baignés, état physique qui, nous croyons, peut avoir une importance dans les échanges physicochimiques qui ont lieu entre les globules rouges et le milieu sanguin.

APPENDICE. — Vu le petit nombre d'expériences pratiquées, nous sommes obligé de nous borner aux constatations faites, sans nous hasarder dans des affirmations qui ne seraient, dans ce cas-là, que de pures hypothèses.

Tout ce que nous pouvons affirmer, c’est que, chaque fois que nous avons fait une hémolyse des globules rouges du lapin, en proportion de 1 volume de globules rouges pour 4 volumes d’eau distillée, le nombre de gouttes a toujours été le même.

Bien plus : nous avons constaté que les globules rouges du chien, recueillis après une injection intra-veineuse brusque de peptones et hémolysés, nous donnent toujours le même nombre de gouttes qu'avant l'injection.

Ces faits nous amènent -à conclure que le globule rouge présente une fixité dans sa tension superficielle.

Nous avons vu que la tension superficielle du plasma sangun varlait avec la digestion, etc., et il sera très intéressant de rechercher si cette variation existait aussi pour les globules rouges ou si elle restait invariable.

Les résultats précédents soulèvent un certain nombre de questions que nous ne faisons qu’indiquer.

Puisque la tension superficielle des globules rouges va en diminuant dans l’ordre : lapin, chien, cheval, marmotte et angurlle, tension superficielle qui est en étroite liaison avec celle du sérum correspondant, est-ce qu’elle ne peut pas servir comme explication de la résistance du globule rouge envers son milieu ambiant ?

Nous savons que les globules rouges se conservent très bien dans le plasma ou dans le sérum du même sang et qu’ils peuvent être hémolysés par d’autres sérums.

Voie done toute une série de recherches d’une grande importance.

En sachant, d’une part, que l’action des ichtyotoxines (sérum d’anguille) est très marquée sur le globule rouge du lapin et du chien, et très peu sur ceux de la marmotte et hérisson, et, d'autre part, nos analyses, quoique très réduites, en nous montrant que la tension super ficielle du globule rouge du lapin et du chien est beaucoup plus ÉLEVÉE que celle du globule rouge de marmotte, en faisant des recherches détaillées et complètes, trouverons-nous une relation causale ?

En immunisant les animaux contre l’action hémolytique d’un sérum quelconque, la tension superficielle de globules rouges de ces animaux baissera-t-elle ?

Enfin, est-ce que, par ces études, nous ne trouverons pas, au moins, une des causes de l’immunité naturelle des globules rouges de marmotte ou de hérisson et de l’anguille même, contre l’action des ichtyotoxines ?

Voici quelques-unes des questions qui se sont offertes à notre esprit, questions que nous énonçons seulement, sans chercher à sortir de notre manière d'envisager les choses, en restant fidèles aux conclusions exactes et claires qui se dégagent des recherches positives, en laissant à l'avenir de les confirmer ou de les modifier selon la vérité.

Nous ajoutons pour terminer que, en ce qui concerne le phénomène de Fhémolyse, 1l faut remarquer que les substances comme : la bile, les savons, l’éther, les sérums toxiques des poissons, etc., qui sont des agents hémolytiques, sont, en même temps, des corps à tension superficielle basse et, probablement, qu’un des facteurs principaux de l’hémolyse doit être aussi la tension superficielle; mais nos recherches ne nous permettent pas encore de généraliser les choses ou de donner une importance prépondérante à la tension superficielle : dans le phénomène de l'hémolyse.

Cette idée de la participation de la tension superficielle dans le phénomène d’hémolyse, a été aussi émise par M. Iscovesco (*) qui dit : « L’étude de action des substances qui,

(*) M. Iscovesco. Les modifications de la tension superficielle du

sang par ladjonction de différentes substances. (C. R. de la Soc. de Biologie, T. LXX, p. 466, 1911.)

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« comme la saponine, les savons et l’éther, abaissent fortement € la tension superficielle du sérum, permet d'expliquer, d’une « façon très simple, le mécanisme de certaines hémolyses. »

Puisqu’il s’agit, dans ce chapitre, des recherches faites sur les globules rouges, nous tenons à dire que, parmi nos expériences, nous en avons fait deux, en injectant des globules rouges d’anguille hémolysés, chez le cobaye et le lapin, injection qui a déterminé la mort chez le cobaye et seulement des troubles, des manifestations d'intoxication chez le lapin.

Nous ne faisons qu’indiquer nos expériences, qui ont l'intérêt de nous montrer que, même les globules rouges d'anguille sont toxiques, mais cette affirmation a besoin d’être confirmée par des expériences précises.

Dans la vaste littérature sur les ichtyotoxines, nous avons trouvé mentionné, une seule fois, par M. E. Buffa (*), dans son article sur la toxicité du sang de la Lamproie (Petromyzon planeri), que les globules rouges de la Lamproie sont toxiques, mais leur toxicité est beaucoup moindre que celle du sérum, et qu’en même temps, leur injection n'empêche pas la coagulation du sang de l’animal injecté.

Nous avons constaté le fait. Il reste maintenant à chercher la cause de leur toxicité et la manière d'agir, une fois introduits dans le torrent circulatoire de l'animal injecté.

$ IV. — Modification de la coagulation du sang du lapin et de sa tension superficielle sous l’influence du venin de cobra.

Les ichtyotoxines ont, outre leur toxicité (action sur le système nerveux), un pouvoir hémolytique et une action anticoagulante plus ou moins prononcée. Nous pouvons démontrer ces modifications que subit le sang d’un animal injecté avec une ichtyotoxine, par la détermination de la tension superficielle d’une petite quantité de sérum (5 ec).

Nous l'avons montré par les expériences précédentes.

Nous savons que le sérum d’anguille, en injection intra-

(*) G. Burra. Recherches expérimentales sur la toxicité du sang (Pétromy zOn Planeri). (Arch. ital. de Biologie. T. XX XIII, page 176. 1900.)

veineuse, chez le lapin, provoque l’incoagulabilité du sang de l'animal, et, en même temps, une hémolyse accompagnée d’une baisse de la tension superficielle du sang; baisse en relation avec l'intensité de lhémolyse.

Pourtant, les expériences citées (voir chapitre v, $ II), nous indiquent que l'hémolyse seule n’était pas suffisante pour nous expliquer la baisse de la tension superficielle du sérum sanguin de l'animal injecté. En effet, les valeurs numériques obtenues dans la plupart des cas sont bien inférieures à celles déterminées par l’hémolyse seule.

Il faut donc admettre que l’hémolyse, tout en y intervenant, doit être un facteur ajouté au moins à une autre cause et que nous nous sommes proposé de chercher.

Tenant compte des recherches de M. Delezenne qui, entre autres, soutient que la glande hépatique verse, dans le torrent circulatoire, un zymo-frénateur avec action anticoagulante, dans le cas d’injections d'animaux avec ichtyotoxines et venins, nous nous sommes demandé si cette substance n'intervenait pas dans l’abaissement de la tension superficielle. En d’autres termes, (dans les cas étudiés) in vivo, la modification sanguine serait due à un agent anticoagulant et au produit de la destruction des hématies (hémolyse).

Si donc nous pouvions isoler une de ces actions, spécialement celle de lhémolyse, phénomène qu’on peut étudier dans tous ses détails, avec précision, et laisser l’autre, la substance anticoagulante — produit hépatique — actionner en liberté, il nous sera facile de démontrer si la baisse de tension superficielle est due à la présence d’un produit à tension superficielle basse, nouvellement introduit dans le torrent circulatoire à cause du venin injecté. La dose de venin qu’on injecte était si petite qu'il est impossible de concevoir que cesoit elle qui provoque la baisse de la tension superficielle du sérum sanguin.

Pour faire cette démonstration, nous nous sommes adressé au venin de cobra, connu par son action très toxique, sans provoquer aussi l’hémolyse (lapin).

Les expériences que nous avons faites sont au nombre de trois, ayant toujours le lapin comme sujet d'étude et les. résultats ont été absolument les mêmes. Nous relatons seulement deux d’entre elles.

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Nous pouvons, dès à présent, affirmer qu’en effet, la coagulation est entravée par un produit qui arrive dans le torrent circulatoire, produit ayant une tension superficielle assez basse.

Nous avons injecté toujours 2 mm. de venin de cobra, d’une solution faite dans la concentration suivante : 12 mm. de venin de cobra solubilisés en 6 ce de Na CI 8%.

Injection habituelle.

La tension superficielle de notre venin était, dans ce cas-là :

Solution du venin (gouttes)........... 106 40 200 Hraud(routtes) Crete chere er 101 Dh MR AN ACER MAN SE 1,006 F — 0,9585 ou 69,52 dynes.

1re Expérience. — Dose : 1 mmgr. 12 de venin par kilog.

Lapin 9. Poids : 1.769 gr.

Prise de sang normal. (Verres stérilisés.) (Coagulation au bout de 38 minutes.) Le sérum donne :

Sérum :

DÉBUT (DOUULES) Pere nee ci 108 ) 200 AUS OUTUES) Re EE RE Re 101 S EN ER NR AE SANT EE ET À PO UE 1,0246

F — 0,9582 ou 69,498 dynes.

4 h. 9 m.. : injection.

{m. 30 s. après l'injection, le lapin est pris de convulsions et la respiration devient très active.

2 minutes après : 1l se calme. La polypnée persiste.

15 minutes après : la respiration est devenue très lente, les convulsions reprennent.

23 minutes après : mort.

Prises de sang après l'injection :

{re "1 rm: 30:s.1après l'injection:

Le sang obtenu se décante; done, il est devenu incoagulable et le plasma qui surnage est opalescent.

3 heures après : le sang commence à coaguler.

3 h. 30 m. après : gélatineux.

Le lendemain, on le trouve dans le même état. Centrifugé, 1l donne un sérum dont le nombre de gouttes est de 107,5 (t° 200).

Mis au froid vers midi, ce n’est que vers le soir qu’il commence de nouveau à coaguler. La coagulation s'achève deux jours après la prise de sang, en donnant un caillot presque massif.

(Coagulation au bout de 42 heures.)

Le sang centrifugé nous donne :

Sérum :

DORA O LUUES) Be Remise ere 113 ) ne HRUr QUES) ER RE RE re AOL \ PR A À ie hr 2 1,0254

F — 0,9165 ou 66,473 dynes.

2°. — 21 minutes après.

(Coagulation au bout de 8 minutes.)

3e. — 16 minutes après, la mort de l'animal.

La 2° et la 5° prises n’ont pas été analysées à cause de la petite quantité de sang recueilli.

4°. — Et la dernière prise de sang faite dans le cœur après la mort de l'animal.

(Coagulation au bout de 10 minutes.)

Centrifugé, 1l nous fournit un sérum opalescent — d’ailleurs comme les autres échantillons — qui, abandonné au froid, jusqu'au lendemain matin, nous donna un grand callot. Centrifugé de nouveau, le sérum donne :

Sérum :

; DÉEUDN (POUCES): cmeice jereeeseses 113 } one FAO ttes) VO RE ee 101 MS NS on eme A 18 Me fa de aise 2e es 1,024

F — 0,9152 ou 66,379 dynes.

(Coagulation au bout de 24 heures.)

2e Expérience. — Dose : ! mmgr. par kulog.

Lapin os. Poids : 2.002 gr.

Prise de sang normal.

(Coagulation au bout de 22 minutes.)

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Le sérum donne :

Sérum :

SÉTUMiPOULtES) rer ere 107,5 io 206 HAUT(COUULES) PCR PE TEE CC RCCE 101 DR Re LE ES 1,0223

4 h. 3 m. : injéction, convulsions, polypnée. 17 minutes après : la dyspnée commence.

25 minutes après : Mort.

Prise de sang après l'injection :

{re — Une minute après l’injection.

29 minutes après : le sang commence à coaguler.

1h. 42 m. après : gélatineux.

Le lendemain à 2 heures : caillot ferme.

(Coagulation au bout de 22 heures.)

Centrifugé, il coagule encore un peu dans le tube à centrifuger. Le sérum donne :

Sérum :

Sérum (gouttes). ......... rereseeseess 110 } RE IRAURBOUMLCLES) PRE ERREUR 101 5 D RAR AE ES M NS A El A A ET 1,023 F — 0,9393 ou 68,127 dynes.

2e, — 23 minutes après.

Le sang qui coule a une couleur rouge-notr, tout à fait différent du sang recueil une minute après l'injection qui était d’un beau rouge.

2 heures après : le sang commence à coaguler.

Le lendemain à 2 heures, dans l'après-midi : bloc massif.

(Coagulation au bout de 21 h. 30 m.)

Centrifugé, le sérum donne, à son tour, un faible caillot,

dans le tube à centrifuger. Le sérum donne :

Sérum :

SÉDUIE (DOUIDLES) ER R RERRR E MR ESN 110 tape HAN (MOULES) FRS RER RER ER 101 S DRE AR A RSR RATE ET EEE 1,0227

F — 0,939 ou 68,105 dynes.

À lPautopsie, en faisant une grande hémorragie, on aspire avec une seringue le sang de la cavité générale, qui coagule au bout de 8 minutes.

Le sang est mélangé, sang veineux avec sang artériel; centrifugé le sérum donne :

Sérum :

NORUITRIROUETES RE ALERTER 109 ) HAUE RO UIRRES) PERS MR Le CT AR 101 S LT TE AU SE ED OR UNE TIRE 1,0234 F — 0,9482 ou 68,772 dynes.

{to 20°

Il aurait fallu le laisser encore jusqu’au lendemain matin, pour voir s'il ne coagulait plus; or, nous l'avons jeté par mégarde.

CONCLUSIONS. — Nous savons que le sérum normal à une tension superficielle plus basse que celle du plasma, mais bien déterminée chez une espèce donnée.

Dans ces expériences, nous constatons une tension superficielle du sérum, après injection du venin de cobra, nettement abaissée, accompagnée d’un retard dans la coagulation du sang de lapin.

Cette modification dans la tension superficielle ne peut pas être mise sur le compte du venin, qui est en quantité insignifiante, ni à une hémolyse qui n’a pas lieu. On est forcé d'admettre une substance étrangère se trouvant dans le sang, après l’arrivée du venin, substance qui, en face du retard de la coagulation, est anticoagulante et qui provoque l’abaissement de la tension superficielle.

Par notre procédé, on arrive à constater cette présence et il faudrait une série d’autres expériences, pour démontrer son origine, sa quantité et sa qualité; car, dans notre première expérience, l’abaissement de la tension superficielle du sérum fut plus prononcée que dans la deuxième expérience, et, en même temps, la durée de l’incoagulabilité du sang fut à peu près double.

Alors, il faut admettre, ou une quantité plus grande de la substance supposée, ou une même quantité, mais avec des qualités d'activité différentes.