PEPTONE DE WITTE

(Toutes les mensurations ont été faites à 190.)

DONUUIONSERE ER 5% POULE SERRES 141,5 TN 210 MONS OU LES ARE TN 135,5 US TEE 1,25 6NR0UttEs Reno 131 En nt A de DCS D OLETLES ARRET 125,5 NO IE TS RTE 0,81 % gouttes ist LS 122,5

ue FE Vite 0,157 gouttes. ere 118,5

Cet abaissement se poursuit, même pour des solutions très diluées.

Notre solution de peptone employé a, comme nombre de gouttes : 151 gouttes (t° 20°). €

Interprétation des faits précédents. — Les faits précédemment résumés touchent à une question des plus complexes de la physiologie : celle de la coagulation du sang. Nous allons essayer d'en donner l'interprétation qui nous semble la plus logique.

1° Immédiatement après l'injection brusque de peptone dans le sang, la totalité, ou tout au moins, une très grande partie de cette peptone se trouve à l’état libre dans le sang. C’est ce qui révèle l'étude de la tension superficielle. Celle-er est, en eflet, identique pour le sérum du sang prélevé une minute après l'injection et pour celle d'une solution de peptone faite in vitro dans du sérum de chien et dans les mêmes proportions.

Pendant cette première phase de peptone libre, le sang reste coagulable ; c’est là un point essentiel dont nous allons comprendre l'importance dans un mstant.

20 Quelques minutes après, le sang est devenu incoagulable, ou plus exactement, il n’est plus que très lentement coagulable.

Il fournit immédiatement un plasma qui possède une tension superficielle beaucoup plus élevée que celle du sérum de la première phase. (Phase de peptone libre.)

Cette tension superficielle est la même que celle du plasma oxalaté du même chien n’ayant pas encore reçu la peptone.

Tout semble donc se passer comme st, au bout de quelques minutes, la peptone introduite dans le sang se fixait sur un des éléments de ce sang et se trouvait dissimulée par cette fixation.

Nous essayerons, dans un instant, de préciser davantage ce lien de fixation. .

Ainsi, à la première phase de sang encore coagulable et de peptone libre, succède une seconde phase de sang incoagulable et de peptone dissimulée.

3 Ce sang dit incoagulable (terminologie classique) coa-

100 N. L. COSMOVICI

gule, en réalité, à la longue, lorsqu'il est abandonné à basse température. (Dastre.)

Si on enlève le caillot formé, il s’en reproduit un nouveau au bout de quelque temps. On peut ainsi obtenir une suite de coagulations successives. Après chaque coagulation, nous pouvons éliminer le caillot formé au moyen de la centrifugation. Nous avons donc une série de sérums, ou, plus exactement, un même sérum, qui va se modifiant à chaque nouvelle coagulation et nous avons obtenu jusqu’à cinq de ces coagulations successives.

Or, l'expérience nous montre que la tension superficielle change à chaque nouveau caillot formé. |

Elle est d’abord élevée et voisine ou identique à celle du plasma oxalaté, que nous considérons comme ayant la même tension superficielle que le plasma pur, puis elle va en diminuant à chaque nouvelle étape et, à la fin, elle est redevenue identique à celle du sérum de la phase coagulable (phase de peptone libre).

En somme, tout se passe comme si la peptone, d’abord libre dans le sang, immédiatement après l'injection, se fixait ensuite sur un des constituants de ce sang, pour le rendre incoagulable, et, enfin, redevenait libre de nouveau, par étapes SuCCessIives.

A chaque mise en liberté d’une partie de la peptone coriespondrait une nouvelle coagulation partielle du sang.

On voit done qu’à la seconde phase (phase de peptone dissimulée), succède une troisième phase de peptone libérée, qui, en réalité, se scinde en plusieurs phases successives, en une série d'étapes libératrices. ,

4° Il nous faut, maintenant, essayer de préciser le mode de fixation de la peptone pendant la seconde phase.

Il nous semble qu’on peut admettre que la peptone s’unit au fibrinogène.

En effet :

a) Il y a coïncidence entre la phase de peptone dissimulée et celle d’incoagulabilité du sang.

b) À chaque étape libératrice, le fibrinogène mis en liberté produit, sous l'influence du fibrin-ferment, une nouvelle quantité de fibrine.

Dastre a montré autrefois que le sang de peptone, bien que «incoagulable», renfermait tous les éléments, tous les facteurs nécessaires à la coagulation, en particulier le fibrinogène et le fibrin-ferment. «Si ce sang ne coagule pas, dit Dastre, c’est qu'il y a là « une action de milieu particulière », un équilibre chimique spécial. Qu'on trouble cet équilibre par une simple neutralisation, et la coagulation apparaît.» Eh bien! nos recherches semblent nous permettre de préciser l’action du milieu, la nature de l'équilibre chimique. La peptone, en s’unissant au fibrinogène, aurait pour résultat de stabiliser ce colloïde.

Dès que la séparation a lieu, l'instabilité du colloïde reparaît et la formation de la fibrine se produit.

c) Remarquons, d’ailleurs, que l'interprétation que nous proposons n’est point en contradiction avec les autres faits connus, touchant le mécanisme de l’action d’incoagulabilité de la peptone, en particulier, l'intervention du foie, si bien mise en évidence par Delezenne. Il est possible, en effet, que l'union de la peptone et du fibrinogène se produise au niveau du foie, qui est, comme on le sait, l'organe générateur du fibrinogène. (Doyon.)

Nous ne prétendons pas non plus que cette stabilisation du fibrinogène par la peptone soit le seul facteur de l'incoagulabilité du sang de peptone.

Ainsi, nous ne mettons pas en doute la sécrétion par le foie d’une nucléoprotéide entravant la coagulation. (Doyon.) Ces mécanismes différents peuvent fort bien coexister.

d) Notre interprétation cadre encore avec d’autres faits bien établis. On sait bien, par exemple, que le plasma de peptone, bien que renfermant du fibrinogène, ne coagule pas lorsqu'on élève sa température à 56°, température de coagulation de cette globuline. (Stassano.)

Nous avons vérifié nous-mêmes l'exactitude de cette aflirmation de Stassano (*).

Ainsi, le fibrinogène, par son union avec la peptone, serait stabilisé, non seulement en face de l’action du fibrin-ferment,

(*) A ce point de vue, nos résultats sont en contradiction avec ceux d’Arthus.

102 N. &. COSMOVIECI

mais encore en face de l’action de la chaleur; c’est là un nouvel argument et, nous semble-t-il, de valeur importante pour l'interprétation que nous proposons.

e) Nous nous sommes demandé si une partie de la peptone ne pouvait pas se fixer sur les éléments morphologiques du sang.

Pour le décider après l'injection, on recueille le sang qui est devenu incoagulable ; on sépare les globules par la centrifugation ; on provoque leur hémolvse en combinant l’action de l’eau distillée et celle de la congélation.

Le liquide obtenu a une tension superficielle égale à celle d’une même quantité de globules traités de la même manière, mais provenant d’un sang recueilli avant l'injection de peptones.

Il ne semble donc pas qu’une fraction appréciable de la peptone puisse s’unir aux éléments morphologiques du sang.

f) On pouvait se demander aussi si une partie de la peptone n’était pas retenue par le foie.

Pour le décider, après une injection de peptone, nous prélevons un morceau de foie qui est haché et mis à macérer dans l’eau distillée. Il fournit un liquide de tension superficielle égale à celle d’un liquide préparé de la même manière, mais prélevé au même animal avant l'injection de peptone.

Donc, le foie ne semble pas fixer une proportion sensible de la peptone injectée dans le système circulatoire.

g) I fallait enfin s’assurer que l’abaissement de la tension superficielle du sang de peptone conservé 12 vitro n’était pas due à un phénomène cadavérique. C’est ce que nous avons fait en conservant du sérum de sang normal (ro1 peptoné) dans les mêmes conditions, et pendant le même temps que du sang peptoné. Le sérum normal ne subit aucune variation, aucun abaissement de sa tension superficielle.

o° Lorsque, après l'injection de peptone, on fait des prises de sang séparées entre elles par des intervalles de 20 minutes, par exemple, on constate que les sérums corres-

pondants ont des tensions superficielles de plus en plus élevées.

Voici quelques chiffres touchant ce point :

TEMPS SÉPARANT TENSION L'INJECTIGN DE PEPTONE SUPERFICIELLE DE LA PRISE DE SANG. DU SANG EN DYNES.

1 minute 30 secondes 64,64 dynes 8 minutes. 65,04 22 minutes. 66,21 42 minutes. 67,38 1 heure 27 minutes. 69,41 4 heures 15 minutes. 70,04 Sérum normal (pour comparaison). 70,04

On voit donc que tout se passe comme si, 4 pivo, la séparation de la peptone et du fibrinogène se produisait progressivement et spontanément.

Des faits établis avant nous viennent appuyer cette manière de voir.

C'est d’abord celui que le sang redevient peu à peu coagulable, à mesure qu’on s'éloigne de l'injection de peptone.

C’est ensuite que la peptone redevenue libre dans le sang est éliminée au niveau du rein et apparaît dans l’urine où elle peut être facilement décelée.

Cette dernière phase pourrait donc recevoir le nom de phase d'élimination de la peptone.

Remarquons enfin que, chez le lapin, comme nous le verrons, la peptone reste libre dans le sang, elle ne s’unit pas au fibrinogène, le sang reste coagulable et son élimination se produit, environ cinq fois plus vite que chez le chien.

$ III. — Expériences sur des chiens mal nourris.

Les résultats obtenus sur cette série d'animaux manquent d'uniformité, ce qui tient à ce que nous avons utilisé des chiens errants, qui, tous, d’une manière générale, étaient très insuffisamment nourris, mais qui, sous ce rapport, devaient présenter de grandes différences d’un animal à l’autre. |

La principale différence avec les animaux bien nourris réside en ce que, chez nos chiens anémiés, l'injection de peptone donne un plasma dont la tension superficielle est nettement inférieure à celle du plasma oxalaté correspondant, c'est-à-dire du plasma oxalaté du sang prélevé avant l’injection de peptone.

104 N. L. COSMOVICI

Voici, résumés dans ce tableau, les résultats de nos expériences :

POIDS NOMBRE NOMBRE TEMPS DE LE NOMBRE DE DE GOUTTES DU DE REA DU De re à DE COLE L'ANIMAL PLASMA OXALATÉ DE PEPTONE L'INJECTION SÉRUM NORMAL 1.0 8 kilog… 98 103 10 minutes 108 2 6,400 gr. 99,5 105 -| 18 minutes 105 42 minutes 3. 8,400 gr. 98 106 8 minutes 4. 513,900 gr. 99 107 9 min. 305. 109 5. & 8,250 gr. 99 109 1 minute 107 107 2 minutes | 103,5 53 minutes

Nous constatons que cette tension superficielle du plasma de peptone varie dans d’assez grandes limites, d’un animal à l’autre.

La coagulation du sang est suprimée presque instantanément, car, le sang recueilli une minute après l'injection de peptone, reste 24 heures et même 48 heures sans coaguler..

Résultat opposé à celui que nous avons obtenu en opérant sur des chiens bien nourris.

EXPLICATION. — Nous pensons que ces faits doivent recevoir l'interprétation suivante :

Ces chiens affaiblis avaient, nous l’avons nettement constaté, une quantité de plasma très réduite, bien inférieure à celle des animaux normaux.

On sait, d'autre part (Nolf) que, chez les animaux ayant jeûné, la quantité des matières albuminoïdes du plasma peut diminuer d’une manière sensible.

Dans ces conditions, il est possible que la peptone, en arrivant dans le système circulatoire, ne rencontre pas une quan-

tité suffisante de fibrinogène pour contracter une union semblable à celle qui se produit chez les chiens normaux.

Une partie de la peptone sature le fibrinogène, l’autre reste libre dans le sang; d’où les résultats observés dans ces dernières expériences qui diffèrent de ceux obtenus avec les chiens bien nourris.

$ IV. —Injections lentes de peptone sur des chiens bien nourris.

Nos expériences montrant que le sérum du sang peptonisé a toujours une tension superficielle plus basse que le sérum normal, tandis que la tension superficielle du plasma reste immuable, nous ont suggéré l’idée de chercher ce qu’il advient de la tension superficielle, dans les cas d’une injection de peptone ne supprimant plus la coagulation du sang.

Nous savons que la coagulation du sang n’est pas supprimée quand on injecte ou une dose très faible de peptone, dose variable avec l'animal, ou quand l'injection est faite très lentement.

La même chose arrive aussi quand on immunise le chien contre la peptone, en faisant d’abord une injection dans les conditions citées, puis une seconde injection de peptone, cette fois-ci, brusque, à la condition qu’entre ces deux injections, l’espace ne dépasse pas 24 heures.

Voici le résultat des principales expériences (*) :

{re Expérience. — Dose : 0,3 dger. de peptone par kulog.

Chien 5. Poids : 9. 500 gr.

Prise de sang normal.

(Coagulation au bout de 15 minutes.)

14 h. 25 - {1 h. 45 m. : injection lente qui dure 20 minutes.

Prises de sang après l'injection :

{re. — 5 minutes après :

Le sang commence à coaguler très vite; des filaments de fibrine se forment en premier lieu sur les parois, pour s’irradier vers le centre du liquide. |

(*) Tous les vases étaient stérilisés.

| 106 N. L. COSMOVICI

10 minutes après, un caillot complet s’est formé, mais il est mou, il faut beaucoup de précautions pour arriver à l’empêcher de tomber en renversant le flacon.

(Donc, coagulation au bout de 10 minutes.)

2e, — 22 minutes après l'injection. |

15 minutes après : beaucoup de filaments de fibrine sur les parois du verre.

7 minutes après : on peut renverser le flacon, et le caillot qui est comme une masse gélatineuse, a assez de consistance pour ne pas tomber du flacon.

3e. — 42 minutes après l'injection.

(Coagulation au bout de 5 minutes.)

A ce moment de l’expérience, nous faisons une nouvelle injection, brusque, cette fois-ci.

Dose : 0,22 dgr. de peptone par kulog.

Prises de sang après la seconde injection.

4e. — 15 minutes après la nouvelle injection. Il commence à coaguler avec un retard bien visible. 32 minutes après : gélatineux.

(Coagulation dans 50 minutes environ.)

3e. — 39 minutes après la seconde injection.

Le sang commence à coaguler assez vite ; au bout de 5 minutes, 1l.est déjà gélatineux, mais on ne peut pas renverser le verre.

(Coagulation, à peu près, en 3 heures.)

Nous n'avons pas pris la densité de tous les sérums, de sorte que nos résultats sont incomplets à ce point de vue.

Voici les valeurs en compte-gouttes des différents échantüllons du sang, à la température de 225 :

Sérum normal (BOULES). PR LOT NE SORTE 108

17e INJECTION

1e Sérum, 5 minutes après (gouttes) .......... 114 2e Sérum.22 minutes après (gouttes) ........:. 111,9 3e Sérum 42 minutes après (gouttes) ......,... 111 2° INJECTION :

ñe Sérum 15 minutes après (gouttes) .......... 115

5e Sérum 39 minutes après (gouttes) .......... 113,5

En lisant ces valeurs données au compte-gouttes, nous trouvons que :

1° Après une injection très lente d’une solution de peptone en proportion de 0,3 dgr. par kilog, on remarque que la coagulation est accélérée, comme le prouvent nos chiffres ; le sang normal demande 15 minutes pour coaguler, tandis que le sang peptonisé : 10 minutes, 7 minutes et 5 minutes.

Accélération qui dépend de la durée entre l'injection et la prise de sang.

2° Le sérum obtenu après l'injection a une tension superfiielle beaucoup plus basse (111,5 gouttes), que le sérum normal (108 gouttes).

Tension superficielle qui augmente au fur et à mesure que nous nous éloignons du moment de l’injection de la peptone, tout comme il arrive quand on expérimente sur des chiens bien nourris.

39 Une nouvelle injection de peptone, faite brusquement, provoque un petit retard dans la coagulation et le callot formé comme dans le cas de la première injection, a un autre aspect, il est mou, consistance que nous avons remarquée aussi dans le cas d’un mélange &n vitro d’une solution de peptone (forte) et de sang.

Pourtant, cette nouvelle injection a, comme effet, un abaissement plus marqué de la tension superficielle du sérum (115 gouttes) que la première (111,5). Cet abaissement de la tension superficielle indique que les peptones se trouvent dans le sérum. ,

En face de ces résultats, peut-on ne pas admettre qu’il y a constamment, dans le sang de l’animal, des restes de la peptone injectée ?

Comment expliquer autrement cette baisse prononcée de la tension superficielle du sérum ?

Cette tension superficielle, de basse qu’elle était au commencement de l'expérience, augmentant avec le temps, n’indique-t-elle pas que la substance provocatrice de l’abaissement s’élimine du milieu sanguin au fur et à mesure ?

Enfin, le nouvel abaissement qui suit la seconde injection de peptone sur le même animal ne nous indique-t-elle pas que, dans le sang, seitrouve une autre quantité de peptone, subs-

108 N. L. COSMOVICI

tance qui entraîne l’abaissement de la tension superficielle ?

Ces expériences confirment donc les conclusions avancées après les résultats de la première série d'expériences, quand nous avons procédé, par des injections brusques, et elles seront encore confirmées par les résultats que nous avons obtenusen expérimentant sur les lapins.

EN RÉSUMÉ. Quand on pratique des injections lentes de peptone chez le chien, ou des injections brusques chez un animal immunisé par une injection antérieure, on constate que :

1° Le sang reste coagulable, fait déjà connu.

20° La tension superficielle du sérum baisse, indiquant qu’une partie, tout au moins, de la peptone, n’a pas contracté d'union avec le fibrinogène.

Le fibrinogène n’ayant pas été stabilisé par la peptone, la coagulation a lieu.

Ces nouvelles expériences apportent une confirmation aux interprétations données précédemment.

$ V. — Injections intraveineuses de peptone chez le lapin.

L’injection de la même dose de 0,3 dgr. de peptone par kilog est faite, comme d’habitude, dans la veine marginale du pavillon de l’oreille et la prise de sang par la carotide.

Les lapins destinés à l’expérimentation étaient, auparavant, mis à jeun pendant 24 heures.

J’ai toujours eu les mêmes résultats.

Puisque le sang du lapin qui a reçu une injection brusque de peptone, continue de coaguler, nous avons voulu l’en empêcher, en l’additionnant d’oxalate de soude, pour obtenir du plasma et chercher sa tension superficielle. Or, tous nos efforts ont été vains, l’oxalate n'ayant plus aucune action sur le sang peptonisé.

Nous tenons à faire remarquer ce fait intéressant.

Passons en revue les expériences faites :

{re Expérience. — Dose : 0,3 dgr. de peptone par kilog.

Lapin <. Poids : 3.150 er.

Prise de sang normal. Tous les verres employés ont été stérilisés. d

(Coagulation au bout de 1 h. 14 m.) {1 h. 55 m. : injection.

Prises de sang après l'injection :

{re — 25 secondes après l'injection.

(Coagulation au bout de 14 minutes.) 2e. — 21 minutes après l'injection.

(Coagulation au bout de 14 minutes.) 3e. — 40 minutes après l'injection.

4e. — Une heure après l'injection.

Nous ne pouvons pas préciser la durée de la coagulation.

Nos valeurs en compte-gouttes et en dynes ont été faites pour la température de 20.

Sérum normal :

DÉDUTRA (PO ULLES) Er er eye 107 to Lago Haur(BOu LES) Er rose er eme 101 DRM MR ALAGR 2 ae rie ie 1,0273 F — 0,9697 ou 70,332 dynes.

1 sérum :

DÉTUMAIEOLEUES) RE MEET nee ne 119 {5 200 Han (soutles) ss Rs tee 101 10 RSA PE TRE RO A PE ER SE 1,0253 F — 0,8702 ou 63,115 dynes.

2e sérum:

SÉTMA(DOULEES MAN Dan ects 110 Fe Hate (soutien Peer ec 101 IDE SR CPE PRET RO ROSES 1,0238 & F — 0,94 ou 68,178 dynes.

3e sérum :

D OLUINA (SOMMES) er eee ee cie roi 108 one PDAUADOULES EI cle ee cb 101 Rte DO CO DUR ÉTareUs 1,0229

F — 0,9566 ou 69,382 dynes,

Le 4° sérum du sang peptonisé nous donne 107 gouttes (to 200).

La quantité de sang n’a pas été suffisante pour qu'on puisse prendre la densité.

110 N E. COSMOVICI

En résumant les résultats obtenus, nous avons :

Sérum normal gouttes 407 70,332 dynes.

17 sérum . .... 4 minute après l'injection gouttes 119 63,115 dynes. 2ÉSeTUMA 2 24 — — gouttes 410 68,178 dynes.

DÉASÉTUN ee 40 — — gouttes 408 69,382 dynes.

RÉNSÉTUMEratere 60 — — gouttes 107

Nous croyons inutile d’insister davantage sur les résultats, qui sont absolument identiques à ceux obtenus après une injection de peptone, en dose de 0,3 dgr. de peptone par kilog, sur les chiens.

Nous avons essayé aussi une autre expérience, augmentant la dose injectée à 0,5 dgr. par kilo, sur un lapin bien nourri.

"2e Expérience. — Dose : 0,5 der. de peptone par kilos.

Lapin o&. Poids : 1.505 gr.

À jeun pendant 24 heures.

Prise de sang normal. Les verres ont été stérilisés.

(Coagulation au bout de 50 minutes.)

2 h. 49 m. : injection.

Prises de sang après l'injection :

{re — 30 secondes après l'injection.

(Coagulation au bout de 13 minutes.) 2e, — 25 minutes après l'injection.

(Coagulation au bout de 26 minutes.) 3e, — 15 minutes après la mort du lapin.

(Coagulation au bout de 6 minutes.)

‘Le lapin suecombe à 3 h. 15 m., immédiatement après la deuxième prise de sang.

Voici le nombre des gouttes, pour la température de 20° :

Sérum normal gouttes 108 LETSSF UM... 30 secondes après l'injection. gouttes 12$ 2ENSÉTUM, Le 25 MINUTES. — — gouttes 122,5 AÉASCTUIE Te H1 — — — gouttes 120

Donc, nous nous trouvons en face des mêmes effets :

1° L’injection de peptone provoque l’abaissement de la tension superficielle qui tend à revenir progressivement vers la normale avec le temps (119 gouttes-107 gouttes).