Les épreuves biologiques
1. Aspect microscopique. — Comme Job le fait remarquer, les divergences d’opinion peuvent tenir souvent aux différences d’appréciation résultant de l’examen microscopique.
S'il n’y a que peu de colonies donnant un bacille court, trapu, prenant le Gram, que ce bacille ne se présente pas tout à fait sous l’aspect classique qu’on attribue au diphtérique court,
les uns le rejettent purement et simplement du cadre et de la famille des diphtériques ;
les autres le baptisent pseudo-diphtérique.
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En réalité :
avec Scheller, nous pourrons dire que, plus on examine de lames colorées, moins on voit de bacilles 4 diphtériques, parce que, l’éducation se faisant peu à peu, on arrive très vite, avec l’habitude, à étiqueter les préparations qui défilent sous l’objectif.
Les recherches de Scheller portent sur plus de 5.000 examens, etil peut prononcer avec autorité.
Nous-mêmes avons, dans notre beaucoup plus modeste sphère, pu constater la vérité de cette assertion. Aux hésitations, à l'incertitude des premiers examens, font suite, avec le temps, une rapidité de diagnostic et une assurance qui manquaient dans les débuts. |
2. Aspect macroscopique. — Pour les caractères culturaux sur les différents milieux, les mêmes remarques peuvent être faites :
Les différences observées ne sauraient sauter à l'œil, s’il est inexercé.
D'ailleurs, pratiquement, on ne saurait recourir à tant d'épreuves chaque fois qu’il s’agit de recueillir un germe.
Il est certain qu'avec un peu d'habitude l’examen critique des colonies poussées sur sérum de bœuf coagulé permet de se faire déjà une idée du microbe isolé, et nous dirions presque, avec un peu d’exagération, que la spatule permet de « faire le toucher » de la colonie, comme le doigt introduit dans les culs-de-sac vaginaux peut apprécier les lésions des annexes ou de Putérus. Il est vrai que le doigt se trompe assez souvent; le fil de platine aussi.
Quant à vouloir séparer nettement les 2 races par l’examen de la culture en bouillon qui, dans la diphtérie, serait à peine louche et se recouvrirait toujours d’un voile, alors qu'il se troublerait constamment avec sédimentation d’un dépôt épais dans la pseudo-diphtérie, il ne faut pas s’y
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hasarder, surtout quand, comme en pratique, on cherche à juger ce phénomène sur des cultures de 2/{ heures qu’on avait préparées pour les inoculer au cobaye.
Très souvent ce caractère est alors en défaut.
3. Epreuves biologiques. — Les épreuves biologiques entreprises jusqu’à ce jour ont surtout donné des mécomptes.
On sait en particulier que /’Æpreuve de Spronck.à laquelle Lesieur attachait cependant une importance relative, est souvent mise en défaut.
(6 heures après injection préalable de 1 eme. de sérum anti-diphtérique sous la peau d’un cobaye, on lui inocule 2 cmc.de culture de 24 heures en bouillon de bacille diphtérique. Il n’y a pas d’œdème local s’il s’agit de bacille de Lôffler ; l'œdème se produit avec du pseudo-diphtérique.)
La culture du Bacille diphtérique sur sérum antidiphtérique est non seulement possible, mais très facile, et ce milieu est même très bon pour le microbe.
Les recherches d’agqlutination par le sérum antitoxique ne donnent aucun résultat interprétable,
et si Lubowski a pu, avec un sérum antimicrobien,agglutiner le bacille diphtérique, il n’a prouvé : ni qu’on pouvait sûrement agglutiner tous les échantillons de bacilles de Lôffler, ni qu’on ne pouvait agglutiner tout échantillon de bacille d'Hoffmann.
Roussel et Job ont repris les essais de Lubowski avec du sérum de lapin préparé par des injections de sérum antidiphtérique et de bacilles, sans résultat appréciable.
Dans ces derniers temps, on a préparé, à l’étranger et à l’Institut Pasteur, des sérums antimicrobiens qui agglutineraient à des taux élevés le bacille diphtérique, mais on n’a pas fait la preuve qu’ils n’agglutinaient pas les pseudo.
Tout récemment, Cathoire, Cadiot et Henry ont tenté des
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expérimentations dans ce seus et ne concluent pas définitivement.
Sur la réaction des précipitines, les essais inaugurés par Wassermann en 1902 ne semblent pas devoir acquérir une portée pratique, la réaction, quand elle est positive, étant trop peu sensible à apprécier.
Le phénomène de Pfeiffer a été appliqué au diagnostic du bacille diphtérique par Almqvist sans résultat.
Cathoire, Cadiot et Henry l’ont repris et lui attribuent une grande valeur. ;
Des essais doivent encore être repris en série pour juger la méthode. En tout cas, elle n'est pas très simple et ne. peut guère constituer qu'un procédé d'étude théorique, de laboratoire bien outillé.
Quant à la déviation da complément, elle a été appliquée encore trop peu de fois pour qu’on en puisse juger actuellement la valeur.
(Nous espérons pouvoir apporter sur ce point une contribution encore bien incomplète à la question.)
L'étude des Diphtérolysines n’est pas avancée.
Même l'épreuve de la virulence n’est pas absolue, et l’on sait que L. Martin a pu reconnaître des propriétés toxigènes parfois assez intenses aux bacilles dits pseudo-diphtériques, alors qu'il existe des races de Lôüffler absolument inoffensives. (On conserve en particulier à l’Institut Pasteur une race, dite « Brienne B », absolument atoxique.)
Ainsi, des recherches de Lipstein, Schick et Ersettig, Martin, Schwoner, Wassermann, Santori et tant d’autres, rien de pratique n’est ressorti.
Il est à présumer que l’étude poussée à fond des facteurs de toxicité des bacilles diphtériques, poursuivie par les auteurs récents (Nicolle et Pozerski, Armand Delille, Nicolle et Loiseau) et surtout, en fonction des toxines, so-
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lubles ou adhérentes (J.-P. Ménard), pourra dans quelque temps rajeunir et éclaicir la question, un peu épuisée et restée sans solution exacte, des pseudo-diphtériques.
En tout cas, la majorité des auteurs sont actuellement d'accord pour ne reconnaître, dans les différenciations morphologiques des bacilles de Hoffmann et de Lôffler,une grande valeur relative qu’à :.
L'ÉPREUVE DE LA COLORATION DE NEISsER, et à celle de :
L’ACIDIFICATION DES BOUILLONS SUCRÉS. Nous indiquerons sommairement les procédés employés.
J. COLORATION DES CORPUSCULES POLAIRES. — Les corpuscules polaires de Babès-Ernst étaient déjà mis en évidence en 189 par la coloration au vert de méthyle de Croush.
Max Neisser, en 1897, décrit son procédé et les résultats obtenus paraissent d’emblée présenter une grande valeur diagnostique.
Voici la formule conseillée :
A. Bléu de méthylène..2., #17 TROUPES 0,10 AJCODÉ MISE CE PR EL RER Lan 2 RATS UNE CE sn 99 Acide acétique glacial....... de 5
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Colorer 2 secondes avec la solution A.
Laver.
Colorer 4 secondes avec la solution B.
Laver.
Si l’on ne colore que des frottis de colonies obtenues par un séjour de 15 à 20 heures à 35° ou 37° au plus, on a des corpuscules bleus, polaires ou médiobactériens, tranchant
sur la coloration brune du protoplasme.
Lesieur conseille de laisser le frottis 5 à 6 secondes dans
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