BACTÉRIOLOGIE

Le diagnostic du coryza diphlérique n'étant une certitude qu'après les résultats positifs de la bactériologie, nous avons cru devoir retracer rapidement les différentes étapes de la reconnaissance et de lidentification du germe.

Nous rappelons que le bacille de Lôffler se présente à lexamen direct sous forme de bâtonnets légèrement recourbés, renflés en poire, en massue ou en biscuit. On le voit isolément ou par groupes de 3 à 4 éléments, ou plus disposés en L ou en V, ou se croisant, comparés à des paquets d’épingles à extrémités arrondies. La longueur moyenne est de 3u à Du, Jusqu'à 7u dans les formes longues.

On préconise actuellement pour la culture du germe les sels de tellure (milieu d’Anderson, milieu de Clauberg) mais leur pratique n’est pas encore répandue hors du laboratoire. Habituellement, lensemencement, fait si possible au lit du malade, l’est sur deux ou trois tubes de sérum coagulé, par stries longitudinales parallèles couvrant bien toute la surface du premier tube, puis du second, et du troisième, sans recharses, de manière à obtenir des colonies bien isolées sur les derniers tubes.

Après seize à dix-huit heures de séjour à l’étuve à 370, les colonies apparaissent sous la forme de petites taches rondes, comparées à des taches de bougie, blanc grisätres, grosses comme une Lête d’épingle, dont le centre est plus sombre que la périphérie. La colonie est sèche à la surface, régulièrement arrondie; ses bords sont nets et légèrement translucides.

La souche élant bien isolée on étudie les caractères du ger-

eo

me. Le bacille diphtérique prend le Gram, mais se décolore facilement par l'alcool, signe différentiel très important avec les faux diphtériques qui restent colorés uniformément.

Par la coloration au bleu de méthylène-potassique de Lôüffer où au bleu de Roux, on met en évidence les corpuseules métachromatiques où corpuscules polaires de Babès : on voit un grain à chaque extrémité, assez fréquemment trois ou quatre dans les formes longues. Sans être de valeur absolue cette réaction est utile.

En culture, en tube de Veillon de gélose profonde glucosée, le bacille diphtérique pousse dans toute l'étendue de la gélose, en profondeur comme en surface; les colonies superficielles ne s’élalent pas à l’air hbre : 1l est anaérobie facultatif.

Le bacille diphtérique vrai fait virer au rouge les milieux vlucosés tournesolés. Pour cette recherche, les laboratoires utilisent également le milieu préconisé par Costa, Troisier, Dauvergne. Après 36 à 48 h. de séjour à l’étuve à 370, les colonies sont rondes, de consistance ferme, enfouies dans le milieu et colorées en rouge.

L'inoculation au cobaye est une recherche faite par les laboratoires bien spécialisés. Une culture en bouillon alcalin du bacille diphtérique, injectée après 24 h. de séjour à létuve à 379, sous la peau d’un cobaye à la dose de I ce. amène le plus souvent la mort de l’animal en 24, à 36 h., quelquefois en 4 à D Jours avec des lésions spécifiques de l’intoxication diphtérique : ædème au point d’inoculation avec congestion des ganolions de la région, congestion des capsules surrénales, épanchement de liquide citrin dans la cavité pleurale en quantité variable, foyers inconstants de congestion pulmonaire, congestion du foie et de l’intestin.

Parfois les cobayes inoculés ne meurent pas : on observe seulement au point d'inoculation un œdème en placard plus ou moins étendu, une escarre noire, sèche, plus où moins développée, constituée en 6 à 7 Jours.

Le bacille de Lôffler présente donc des degrés de virulence

variables, mais n’est jamais avirulent.

Connaissant ces caractères du bacille de Klebs-Lôffler, nous pouvons le différencier des faux-diphtériques. Le Bacille d'Hoffman ou corynibarterum commune donne des colonies plus blanches d'aspect que les colonies diphtériques, vernissées, brillantes, crémeuses, à contours moins réguliers, quelquefois allongées dans le sens de la strie d’ensemencement; elles sont plus plates et plus transparentes que les colonies du vrai bacille de Lôffler.

Elles sont formées d’un bacille, coloré par le Gram court, ramassé, à extrémités pointues, de forme losangique ou en fer de lance, d’où les noms de bacilles en ravette ou en grain d’orge.

Il ne se décolore pas par l’alcool, on ne peut y mettre en évidence les granulations de Babès. Il est aérobie stricte, ne fait pas fermenter la glucose, mais la saccharose; il n’est pas pathogène pour le cobaye.

Le Bacillus culis communis est un saprophyte normal des fosses nasales. C’est un bacille très polymorphe parfois très long et très épais, le plus souvent de forme courte et présentant des formes à extrémités en massue rappelant les formes d'involution du bacille de Lôffler dont il a sensiblement les caractères. La très grande rareté des formes courtes du bacille diphtérique est un argument contre les confusions possibles. Le bacillus cutis présente des granulations chromatiques, il pousse dans toute la hauteur des tubes de gélose profonde glucosée, comme le bacille diphtérique. Les deux caractères qui permettent de le différencier de ce dernier sont la culture sur pomme de terre qui est blanchâtre et abondante et l’action sur la saccharose qui est nettement fermenté.

Ramon, Debré, Corrado-Ajo ont montré que les faits vont à l'encontre de la Chéorie suivant laquelle un bacille diphtérimorphe non pathogène pourrait se transformer en bacille diphtérique pathogène. Les résultats de ces recherches, par linoculation au cobaye, ont démontré que les germes à peu près identiques au bacille diphtérique, d’après leurs caractères microscopiques el culluraux, s'avèrent complètement dépourvus de Tout pouvoir pathogène chez les animaux.

C'est à Martin que l’on doit la classification en bacilles longs (5%), moyens (95%) courts, rares. Plus récemment trois types de bacilles ont été isolés gravis, milis el intermedius. La longueur du germe n’est pas en rapport avec le pouvoir toxigène et le pouvoir pathogène, mais par contre, le type grevis aurait des caractères épidémiologiques. il donnerait beaucoup plus de complications toxiques que le type milis et causerait une mortalité beaucoup plus importante.

Un observateur très exercé, avec un microscope de fort grossissement appréciera la morphologie du bacille, l'étude des cultures et des fermentations lui permettra de répondre au praticien pour la conduite de la thérapeutique, mais seule, l’épreuve sur le cobaye, selon la méthode de Ramon, Debré, Thiroloy donne des résultats absolus pour la distinction des bacilles diphtériques vrais et des pseudo-diphtériques. Elle est particulièrement utile chez les porteurs de germes sains et convalescents, les nourrissons atteints de coryza chronique.

En vue de la prophylaxie il est utile de noter que le bacille de Lôffler présente une grande résistance uilale. En culture, en bouillon il résiste peu à la chaleur et est très sensible aux antiseptiques ; mais en culture desséchée, il supporte par exemple la température de 95° pendant plusieurs minutes. Il résiste au moins trois minutes à l'acide phénique à 1%, au sulfate de cuivre à 0,5%, à l'acide salicylique à 5%.

Dans les fausses membranes, surtout soumises à la dessiccation, sur les objets usuels, à l'obscurité il résiste plusieurs mois.

D'ailleurs Park et Wright ont constaté sa longue vitalité sur les vêtements d’infirmiers, Abel sur les jouets d'enfants. Ces poussières des locaux infectés peuvent le conserver à l’état vivant pendant plusieurs mois.

La lumière solaire a heureusement raison de cette vitalité en quelques heures.