II. La Chlorémie
Devant l'insuffisance des épreuves de fonctionnement rénal, nous avons recherché si, dans ce qui est retenu au delà du filtre rénal, il ne pouvait pas se trouver un test biochimique capable de différencier les états cardio-rénaux. Au cours de nos investigations il nous est vite apparu que l’équilibre chloré était l’un des meilleurs indicateurs du fonctionnement rénal et c’est dans ce sens que nous avons poursuivi nos recherches. Le rapport
cl. gl.
chloré —— présente un intérêt très réel pour dépister les el. pl.
acidoses circulatoires et rénales. Enfin il est susceptible de nous aiguiller vers des recherches plus approfondies que nous exposerons ultérieurement.
Nous n'avons pas l'intention de reprendre iei la physiophatologie du chlore, ce qui serait sortir des limites de notre sujet, mais de rappeler sommairement quelques notions générales indispensables pour s'orienter dans cette biochimie bien spéciale. Après avoir précisé la technique employée par le Professeur Paget, nous étudierons successivement la chlorémie
normale, la chlorémie des néphritiques et enfin la chlorémie des cardiaques.
A. TECHNIQUE DE DOSAGE DU CHLORE SANGUIN (Méthode du Professeur Paget).
1° Prélèvement du sang.
22 2 me échantillon qu sang qui servira au dosage du chlore sera prélevé sur oxalate de potassium. La concentration idéale de
ce dernier par rapport au sang recueilli sera de 2 0/00.
vol. plasma La lecture du rapport sera faite après vol. globules une centrifugation puissante. Il est nécessaire que cette opéra-
tion soit effectuée dans la 1/2 heure qui suit le prélèvement.
Une première lecture sera faite au bout de 25 minutes et les chiffres obtenus seront contrôlés par une dernière centrifugation d’une durée de 3 minutes.
2° Le dosage du chlore dans le sang.
Il est nécessaire de distinguer : le chlore sérique, le chlore plasmatique, le chlore globulaire, le chlore du sang total.
Cette distinction a sa raison d’être, car les méthodes employées ne s’appliqueront pas indifféremment à l’un quelconque de ces éléments.
Les méthodes en usage pour le dosage du chlore dans le sang sont assez nombreuses. Elles ont été bien résumées dans la thèse de Sénellart (Nancy 1934) et ceci nous dispense d’y insister. Nous ne ferons que rappeler le procédé Paget utilisé pour tous nos dosages. Ce procédé a fait l’objet d’une communication récente à la Société de Biologie. Il s’applique indistinctement à tous les éléments du sang : sérum, plasma, sang total, globules.
Voici le processus suivi pour le dosage du chlore plasmatique, du chlore globulaire et du chlore total :
1° Le prélèvement se fait sur deux tubes, contenant de l’oxa- P ;
late de potassium. L’emploi de deux tubes supprime la cause d'erreur, dite de sédimentation, signalée par Ambard. Le volume total du sang d’un des deux tubes est intégralement utilisé pour le dosage du CI total.
2° Dosage du chlore dans le sang.
a) Dosage du chlore dans le plasma oxalaté. On utilisera Nec de plasma (4 cc au cours de nos essais) qui seront dilués dans 25 Nec. Après avoir agité on ajoutera successivement en ayant soin de bien mélanger après chaque addition :
N ferrocyanure de potassium : 150 gr.
—— ec de solution À — 4 [ Eau distillée neuve : Q.S.P. 1000 cc.
N Acétate de zinc : 112 gr.
—— ec de solution B — | > | Eau distil. neutre: Q.S.P. 1000 cc.
On complètera à 50 Nec avec de l’eau distillé. Après filtration, on aura obtenu une solution limpide comme de l’eau de roche. Dans notre cas particulier on prélèvera 150 ce du
filtrat. On ajoutera 5 ce de NO'H — 5 cc de NO'Ag et
2 ec. d’une solution saturée d’alun de fer ammoniacal: on dosera l’excès de sel argentique pour une solution titrée de sulfo-cyanure. Un calcul très simple permettra alors d’établir
la concentration en chlore. L'emploi de microburettes au ———-
ou au augmente le degré de précision.
b) Dosage du chlore dans le sang total oxalaté : On diluera Nec de sang total, mais sans que la dilution doive être rigoureusement précise comme dans le cas précédent.
rl
On ajoutera ec de solution A
N ce de solution B
On complètera à 50 Nec et on filtrera.
Nous opérions sur un volume variable (totalité du tube N° 2) Le volume était cependant toujours supérieur à 2 et inférieur à 6.
La suite du dosage était effectuée comme précédemment.
c) Détermination du chlore globulaire.
Elle était faite par la méthode indirecte et par la méthode directe.
1) Méthode indirecte. — Le chlore total et le chlore plasmatique étant connus nous déduisons par calcul la valeur du chlore globulaire.
Vol. total X el total — Vol. plasma X Cl. plasma
Cl gl. — Vol. glob.
2) Méthode directe. — Les globules obtenus lors de l’éva- Vol. plasma luation du rapport sont lavés à l’eau glucosée
Vol. globules isotonique. Deux lavages sont ainsi effectués.
Un volume V de purée globulaire est ensuite prélevé et dilué dans 25 V cc° d’eau. Après hémolyse, on procède à la défécation et précédemment au dosage dans le cas du sang total.
Ce procédé a comme avantages :
—— sa rapidité : un manipulateur moyennement exercé fera ce dosage en un quart d’heure.
To —
__ sa sûreté et sa fidélité. Ce procédé a toujours été employé concurremment avec la méthode de Laudat et les résultats obtenus dans un cas ou dans l’autre, ont toujours concordé.
—— sa simplicité : aucun contrôle ne doit être effectué durant la déprotéinisation, ce qui permet d’effectuer les essais en série.
B) LA CHLORÉMIE NORMALE.
Il pourrait sembler plus logique d'étudier les variations de la chlorurémie sanguine chez les cardio-rénaux, mais on sait depuis Widal que le taux du CI Na varie peu parce que la rétention hydro-chlorurée est surtout tissulaire.
D'ailleurs, l’étude de l’équilibre chloré s’est montrée beaucoup plus féconde et il est toujours facile de passer de l’expression C1 à l'expression Kel ou Nacl, un simple coefficient de transformation basé sur les poids moléculaires des deux sels facilite la transformation.
Le chlore existe dans le sang sous deux grandes formes:
1° le chlore combiné au sodium ou au potassium des globules rouges. Ce mode de combinaison est sans importance, car au point de vue réaction, il se comportera de même façon, qu'il soit uni à Na ou à K.
2° le chlore ionisé provenant de la dissociation de la molécule Nacl ou Kcl. Il est impossible de déterminer la proportion de l’une ou l’autre de ces formes, car l’ionisation des chlorures dépend de la teneur du sang en Co° et de l’apport d’autres valences acides dans l’organisme. Il s’agit done d’un état très labile impossible à fixer.
Négligeant son mode de combinaison, on étudiera le chlore
par rapport à sa concentration dans le sang total, le plasma et les globules.