DOSAGE DU SUCRE

on centrifuge et on vérifie que Paddition de 0 cc. 10 de réactif ne précipite plus rien. Au Cas contraire, procéder par affusions successives de 0 ce. 2 en notant /rès exaclementles volumes ainsi ajoutés. Centrifuger finalement aussi complètement que possible, décanter le liquide clair, et en prélever un volume connu : 10 cc. 5 à 11 cc. par exemple. :

Pour éliminer le mercure de cette prise d'essai, l'étendre simplement de son volume d’eau et la soumettre à l'action de l'hydrogène sulfuré.

La précipitation du sulfure étant complète (1), on décante sur un filtre et l'on lave à l'eau bouillante. |

Le dosage ne saurait être fait directement sur le liquide filtré, qui est dilué et peut renfermer du soufre. ah

Pour concentrer, le mieux est d'opérer en milieu neulre et dans le vide.

Les eaux de lavage du filtre portant le sulfure, sont à cet effet recueillies dans un petit ballon, et soumises encore tièdes à l'action du vide qui enlève la majeure partie de l'hydrogène sulfuré. À ce moment, le ballon est désattelé de la trompe, et son contenu exactement neutralisé par de la soude en présence d'un petit fragment de papier de tournesol. Dépasse-t-on le point, on revient en arrière par quelques gouttes d'acide acétique à 3°}. Le milieu n'étant plus que légèrement acide, du fait de l'acide acétique ajouté, on introduit dans le ballon un ou deux petits fragments de ponce et l'on concentre par d'ébullition dans le vide, à 15 ec. environ (2). On filtre, lave à l'eau bouillante ballon et filtre et effectue le dosage du glucose sur la lotalilé du liquide ainsi débarrassé du mercure et de soufre.

Cette façon de procéder élimine sûrement la lotalité du mercure, évite les pertes de sucre par chauffage en milieu acide ou à l'air, dispense enfin de toutes les corrections tenant au prélèvement à plusieurs reprises des parties aliquotes ou additions de volumes déterminés ; elle est assez rapide.

Le dosage se termine Comme suit :

On chauffe vers 70° le liquide ci-dessus ; on y ajoute assez rapidement 10 ce. de liqueur de Fehling (mélange à parties égales des solutions cuprique et sodico-potassique) ; on chauffe sur le bunsen et termine enfin en faisant usage de la liqueur auxiliaire à ? gr. 50 de glucose par litre, comme il a été dit précédemment.

Remarque. — Certains auteurs, ayant eu à effectuer des dosage de sucre, ont cru devoir additionner le liquide de ponction, aussitôt après sa sortie du canal rachidien, de réactif de Patein ou de son volume d'une solution saturée de fluorure dé sodium(Brerry, SICARD et RoussEAu-LaANGEwELT). La glycolyse

(1) On peut pour plus de sûreté abandonner le tube saturé d'H?S$, toute la nuit à lui-même. ; ON LS

(2) I suffit pour cela de procéder comme je l'ai indiqué pour le dosage des acides dolatie dans les vins : le ballon est maintenu incliné. I est attelé à une trompe à eau ordinaire et plonge dans un bain-marie bouillant.

L'ébullition est rendue régulière par un fragment de ponce. On la règle d'ailleurs par une pince à vis placée sur le caoutchouc qui réunit le ballon à la trompe. L'opération est très rapide et a l'avantage de s'effectuer à une température relativement basse.

étant en fait, pour ie liquide céphalo-rachidien, dans la majorité des cas; beaucoup plus problématique que réelle, celte pratique ne-s’inrpose pas.

Il convient seulement de centrifuger les liquides le plus tô£ possible après leur sortie de l'organisme. L'analyse peut ensuite sans aucun inconvénient en être différée de plusieurs heures.

Évaluation du sucre par réduction directe du fehling.

L'intensité de la réduction obtenue en chauffant directement un mélange de liquide céphalo-rachidien et de liqueur de Fehling ne saurait fournir une indication. rigoureuse exacte sur la quantité de sucre renfermé dans le liquide’ essayé. Srcarp et RoussEAuU-LANGEWELT faisaient déjà cette remarque (1).

Néanmoins, en se plaçant toujours dans des conditions identiques, on peut ürer de cet essai direct, qui a l'avantage d’être très simple, des renseignements utiles et qui m'ont paru, en thèse générale, très suffisants en pratique (2). 4"

À. — Recherche de l’hypoglycosie (Méningites aiguës).

Chauffer pour cela 2 cc. de liquide céphalo-rachidien additionnés de VI gouttes de liqueur de Fehling dédoublée (mélange à parties égales des solutions cuprique et sodico-potassique employées pourle dosage). -

Un liquide normal ou celui d’une affection chronique des centres donne,

. dans ces conditions, une réduction /rès marquée. Le liquide se décolore en partie ou en totalité et présente, en tous cas, un précipité abondant d'oxyde de cuivre.

Dans le cas de méningiles aiguës, tuberculeuses, cérébro-spinales, grippales elc., l’on n'observe au contraire aucune modification du liquide -chauffé ou bien seulement une réaction du biuret ou une réduclion très légère qui ne saurait prêter à confusion avec celle fournie parles liquides normaux. Cette réaction, qui caractérise l'hypoglycosie, est simple et n'a jamais fait défaut dans les nombreux cas de méningites que j'ai pu examiner (3).

(1) SicarD et ROUSSEAU-LANGEWELT. Soc: Méd. des H6p.,

(2) Sans doute il est des exceptions. J'ai moi-même rapporté un exemple d'un tel liquide in le Journal de physiologie el de pathologie générale, 1909.

Il s'agissait d'un liquide donnant par chauffage direct une réduction des plus nettes alors qu'il ne renfermait cependant, comme j'ai pu m'en assurer après défécation au plomb et au meccure, que des traces de sucre. Mais en: dehors de ce cas qui me paraît réellement exceptionnel, thaque fois que j'ai eu l’occasion d'évaluer comparativement le sucre ‘d'un liquide, par l'intensité de la réduction directe et par dosage, le parallélifme de ces deux indications, sans être parfait, s'est cependant montré très suffisant.

(3) À litre de renseignement, les solutions de glucose dans l’eau, additionnées de liqueur de Fehling dans les proportions précédentes, présentent après chauffage les caractères suivantes (opération faite sur ? cc.) : ;

Une dose de 0 gr. 5 de glucose par litre donne un précipité d'oxyde

nettement apparent tant par réflexion que par transparence.

Une dose de 0 gr. 10 ne laisse plus deviner par transparence qu'un flou

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HYPER ET HYPOGLYCOSIE | 31

Recherches de l’hypergiycosie.

Cette recherche est facilement faite lorsque l'on possède un liquide normal qui sert de lémoin.

Employer les proportions de liqueur de Fehling et de liquide suivantes : 0 ce. 6 de liquide ? ce. d’eau et 1 ce. de liqueur .de Fehling dédoublée (mélange à parties égales des deux liqueurs employées pour le dosage) Porter le tout à l’ébullition sur un bunsen.

Un liquide norma} ne donne, dans ces conditions, qu'une réduction très légère, à peine sensible; un liquide hyper (à 0 gr. 70, 0 gr. 80) fournit une réduction des plus nettes.

Ces recherches de l'hypo et de l'hyperglycose que nous venons d'indiquer ont leur intérêt, mais elles ne sauraient, je le répète, remplacer un dosage.

CHOLESTÉRINE. À

La cholestérine, lipoïde à fonction alcoolique, peut se rencontrer éthérifiée dans le liquide: Céphalos -rachidien, comme dans la plupart des humeurs de l'organisme.

Sa recherche se fait sur l'extrait éthéré. La cholestérine y est caractérisée, soit par la forme des cristaux de son hydrate, soit par la réaction de LiEBER- MANN qui permet au besoin un dosage colorimétrique.

PrGxiNt (1909) procède de la façon suivante :

25 cc. de liquide céphalo-rachidien sont traités à plusieurs reprises par l'éther dans une boule à robinet. L'éther décanté est évaporé et le résidu reprispar l'alcool absolu. On saponifie 3 à 4 heures au réfrigérent ascendant par de la soude alcoolique ou par l'éthylate de sodium en milieu benzinique. La saponification se fait en effet bien dans la benzine, que lon additionne de petits fragments de Na et de suffisamment d'alcool absolu pour les dissoudre. Après saponification, on lave la benzine avec de l’eau jusqu'à ce que celle-ci demeure neutre, puis on évapore ensuite cette benzine. Le produit d'évaporation repris par l'alcool méthylique est concentré à petit volume aux fins de cristallisation.

Si la cristalisation ne se fait pas, on peut déféquer à l’acétate de plomb ou faire sur le résidu alcoolique la réaction de Liebermann. On dissout pour cela le résidu alcoolique dans 1 ce. cube de CH,CB, on y ajoute V gouttes

très léger ; mais le précipité rouge est encore très net sur un fond noir (examen à la lumière ré fléchie).

Une, dose de 0 gr. 05 nese laisse mettre en évidence que dans des conditions d'éc lairage très particulières, lorsque le tube est placé sur le trajet d'un rayon lumineux.

Lorsqu'il s'agit du liquide céphalo-rachidien, on ne saurait établir une Correspondance aussi exacte, d'autres facteurs intervenant. Voici ce que m'a indiqué l'expérience. Des liquides de méningite n'ayaut donné aucune réduction du fehling, ont ac cusé, au dosage, des quantités de sucre variant de Ogr. 12 à 0 gr. 24. Ceux qui ont été notés comme fournissant une « faible en » présentaient des chiffres légèrement supérieurs, allant de

0 gr, 20 à 0 gr. 35.

32 NOTIONS TECHNIQUES RAR DATE ENS OR ER nc ENT MOSSES CE SP PONS 2

d’anhydride acétique et une toute petite goutte d'acide sulfurique concentré. Si.le liquide renferme de la cholestérine, la solution se colore successivement en rose, en rouge, puis en bleu.

GRINGAUT (1) a repris la question et indiqué une technique qui lui a donné de bons résultats avec les différentes tumeurs de l'organisme.

ACIDE LACTIQUE ET SUCCINIQUE.

L'acide lactique a ‘été recherché sur l'extrait éthéré par von Furu et LOGKEMANN, LENNDORF et BAUMGARTEN au moyen du réactif d'UFFELMAN.

Le réactif n'étant pas d'une spécificité absolue, ces auteurs ont cherché à préparer le sel de zinc, sans bien l'identifier.

Au sujet des évaluations quantitatives qui ont été tentées, je rappellerai que, de l'avis de tous les auteurs, l'extraction de l'acide lactique d'un milieu aqueux par l'éther est toujours incomplète, quelque perfectionnés que soient les appareils employés (2). l

L'acide succinique se rencontre dans les humeurs.

‘Une séparation des acides lactique et succirique est quantitativement possible par leurs sels de barythe. Le succinate est insoluble dans l'alcool à 90°, alors que le lactate y est au contraire soluble (3).