HO ES

nit une quantité considérable de virus pur qu’il est facile

de recueillir en ampoules. Dans ces conditions, la séro-

sité peut se conserver pendant trois mois et plus, sans atténuation de sa virulence.

__ Ce procédé a rendu de signalés services dans la lutte

contre la péripneumonie.

Mais pour faire des ensemencements de péripneumonie, point n’est besoin d’une telle quantité de sérosité et quelques gouttes prélevées purement suffiront.

Pour faire ces prises, il faut opérer sur un poumon hépatisé d’un animal abattu au cours de la période aiguë de la maladie.

La plèvre viscérale recouvrant le poumon semble, en différents endroits, décollée du tissu pulmonaire sousjacent. Ces espaces ne sont autres que les lacs lymphatiques gorgés de sérosité : après avoir brûlé la paroi pleurale, on introduit à ce niveau l’extrémité effilée d’une pipette et l’on peut ainsi recueillir 4 à 2 centimètres cubes d’un liquide ambré et transparent parfaitement pur.

Si ces espaces lymphatiques sont difficiles à mettre en évidence dans une plèvre trop épaissie, il est facile de puiser dans le tissu cellulaire sous-pleural, ou bien encore, après section du lobe hépatisé, dans les travées de tissu conjonctif interlobulaire. Mais, dans ce cas, la pipette doit être enfoncée peu profondément, car on risque de pénétrer dans un lobule voisin et de recueillir ainsi une sérosité teintée de sang, le plus souvent impure.

Dans toutes les premières recherches sur la culture du microbe de la péripneumonie, c’est de cette façon qu'étaient faites les prises de sérosité.

Mais aujourd’hui toute cette technique pour les prélèvements est inutile, et la sérosité, recueillie dans les fontaines d’après la vieille méthode vétérinaire, est utili-

RO

sable pour le bactériologiste. Nous verrons en effet que le microbe de la péripneumonie traverse les bougies filtrantes et que, par ce procédé, il est facile de l’isoler des autres microbes.

Des milieux de culture. — Milieu liquide. — Le microbe de la péripneumonie ne se multiplie que dans un bouillon peptonisé spécial additionné de sérum.

Nous n’utilisons jamais pour le cultiver les peptones du commerce qui ne donnent que rarement des résultats positifs dans les cultures de péripneumonie.

Nous nous servons exclusivement de l’eau peptonisée employée par le docteur L' Martin pour la production de la toxine diphtérique et nous empruntons à son mémoire la technique pour la préparation de cetle peptone provenant de l’auto-digestion d'estomac de porc.

Bouillon d'estomac de porc ou bouillon de panse. — « Pour « l'obtenir, nous prenons ces estomacs de porc et nous « broyons ou hachons ensemble les tuniques muqueuse « et musculaire.

« Placons ce hachis dans l’eau acidulée à 50° dans les « proportions suivantes :

Hachisidiestomac de porc CA eee. 200 grammes Acide chlorhydrique pur............. 10 — BAR PATES SAT ARTE ENT CPE OR 1000 =

« L'eau doit être maintenue à 50°, car à cette tempéra- « ture la pepsine de la muqueuse stomacale digère plus « activement les tissus et les transforme en peplone.

« Après 12 heures, l'opération est généralement ter- « minée. On peut, sans inconvénient, attendre 24 heures. « Dans ce milieu très acide, il ne se développe pas de « microbes. Lorsque la digestion est achevée, on chauffe

Er

« le bouillon d'estomac de porc à 100°. On détruit ainsi la « pepsine en excès (1). »

Pour la conservation de cette eau peptonisée acide, il suffit de la chauffer tous les deux jours à 100°, et après trois ou quatre chauffages le liquide se clarifie et peut être utilisé.

Pour employer cette peptone, on alcalinise d’abord le bouillon de panse. On chauffe cette eau peptonisée à 80°, puis on y ajoute de la solution de soude à 10 % jusqu’à réaction alcaline, puis on filtre sur papier. |

Macération de viande. — On fait macérer à froid dans un litre d’eau pendant douze heures 500 grammes de viande de veau hachée. Puis on exprime dans un linge, et on ajoute à ce liquide 5 grammes de sel marin par litre.

M. L. Martin emploie pour la diphtérie de la viande fermentée à 35°. Pour la culture de la péripneumonie, le bouillon fait avec de la viande fraîche donne de meilleurs résultats.

Préparation du bouillon peptonisé. « À cette macéra- « tion de viande je mélange un litre de la solution de « peptone déjà alcalinisée, filtrée et préparée comme il a « été dit plus haut avec les estomacs de porc.

« Quand on a mélangé, par parties égales, la macéra- « tion de viande et le bouillon de panse de porc, on « chauffe à 70°, jusqu’à coagulation des matières albumi- « noïdes, on filtre sur papier et on alcalinise (2). »

Le bouillon doit être franchement alcalin, c’est-à-dire qu’il doit être alcalin au tournesol et acide à la phénophtaléine.

Bouillon sérum. — À ce bouillon nous ajoutons du

(1) L. Marrin, Production de la toxine diphtérique. Annales de l'Institut Pasteur, 1898.

(2) L. Martin, loc. cit.