DOSAGE DANS L'URINE

L’urine est diluée 10, 20, 50 ou 100 fois suivant la teneur en thiazomide (1).

Prendre 1 cc. de cette urine diluée.

Ajouter 2 cc. d’acide trichloracétique à 15 % puis : 7 ec. d’eau distillée; agiter; puis : 1 ec. de nitrite de sodium à 0,1 % ; agiter; attendre 3 minu-

tes; puis : 1 ec. de sulfamate d’ammonium à 0,5 %; , agiter; attendre 2 minutes; et enfin : 1 ec! de réac-

tif IV; agiter; mettre à l’obscurité.

Après 5 minutes, chercher quel est le tube étalon

de même teinte (la lecture peut se faire entre 5 et 15 minutes).

Pour savoir le nombre de mgr. de Thiazomide

pour 100 cc. d'urine, multiplier le nombre de mer.

1. N.-B. — Pour savoir la dilution à employer. Effectuer un premier dosage sur l'urine pure : si la couleur obtenue est très foncée, diluer avec de l’eau distillée jusqu'à obtenir une couleur comprise dans les limites de l'échelle colorée; employer alors une même dilution.

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contenus dans le tube étalon correspondant par le chiffre de la dilution, puis multiplier par 100.

Exemple. — Soit une urine diluée 20 fois; le tube étalon de même couleur est celui qui contient 0 m. 02 (2 ce. de solution-étalon) de thiazomide; la teneur en thiazomide de l’urine est donc : 0 mg. 02 X 20 X 100 — 40 mg. pour 100 cc. d’urine.

2° DOSAGE DU THIAZOMIDE TOTAL (libre

et conjugué).

On hydrolyse pour libérer le thiazomide de ses dérivés conjugués (dérivé acétylé).

À 2 cc. d’urine, ajouter 0 cc. 5 de Hel 4 N; ajouter 1 ce. 5 d’eau distillée; mélanger.

Chauffer dans un tube à essai, trois quarts d’heure au bain-mariebouillant ; après refroidissement, étendre avec de l’eau distillée, de façon à avoir la même

dilution que dans le premier cas. Filtrer. Prélever 1 ce. de cette dilution, et opérer comme pour le dosage de la Thiazomide libre. Le calcul est le même que dans le premier cas, et l’on dose ainsi la totalité du produit aminé.

La quantité de Thiazomide conjugué s’obtient

par différence entre les chiffres de Thiazomide libre et total.

RE" Pa DOSAGE DANS LE SANG E

1° Sang total. — Prendre 2 cc. de sang oxalaté ou citraté. Ajouter 30 cc. de saponine à 0 gr. 5 pour 1.000 cc. Agiter. Attendre 5 minutes. Ajouter 8 ce. d’acide trichloracétique à 15 %. Agiter fortement. Attendre 5 minutes. Filtrer sur papier.

2° Sérum. — Prendre 2 cc. de sérum. Ajouter - 30 cc. d’eau distillée. Ajouter 8 cc. d’acide trichloracétique à 15 %. Agiter fortement. Attendre 5 minutes. Filtrer sur papier. ;

Prendre 10 ce. de filtrat (qui contiennent 0 ec. 5 de sang ou de sérum).

Ajouter : 1 cc. de nitrite de sodium à 1 % ; agiter; attendre 3 minutes; puis : 1 ce. de sulfamate d’ammonium à 1 %; agiter; attendre 2 minutes; enfin : 1 cc. de réactif IV; agiter; mettre à l'obscurité.

Lecture après 5 minutes en comparant aux tubes de l’échelle colorée. l

Pour avoir le nombre de mgr. de Thiazomide pour 100 cc. de sang total ou de sérum, multiplier par 200 le nombre de mgr. contenus dans le tube étalon.

Exemple. — Le tube étalon correspondant contient 0 mgr. 01 de thiazomide.

0 mgr. 01 X 200 = 2 mer. EUX 100 ce. de sang

ou de sérum.

2° DOSAGE DU USE TOTAL (bre et conjugué).

20 cc. de filtrat sont additionnés de 1 ce. de Hel 4 N et chauffés une heure au bain-marie bouillant. Après refroidissement, ajuster le volume à 20 ce. Prélever 10 ec. qu’on traite comme pour le dosage du thiazomide libre.

Le calcul est le même que dans le premier cas.

La différence entre les deux chiffres donne le chiffre du thiazomide conjugué.

N.-B. — a) Si le sang contient très peu de thiazomide, le diluer seulement au 10°. Pour cela, prendre : ;

4 ce. de sang ou de sérum ; 28 ce. de saponine ou d’eau distillée; 8 cc. d’acide trichloracétique à 15 %, et continuer comme précédemment.

Pour ce calcul, multiplier par 100 au lieu de 200,

comme précédemment.

b) Si le sang est très riche en thiazomide, prendre 2 ou 5 ce. de filtrat, compléter à 10 ce. avec de l’acide trichloracétique à 3 % et faire le dosage. Tenir compte de la nouvelle dilution dans le caleul.

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