III. —— COMPOSITION CHIMIQUE DES FIBRES ÉLASTIQUES

On sait, depuis le travail de Kœæhler, que les fibres du réseau élastique se teignent par différents colorants tels que l’hématoxyline, la safranine, le carmin alué. Nous avons constaté qu’elles peuvent

se colorer par la plupart des colorants histologiques, d’une manière

F1G. 4. — Pollicipes cornucopiæ. Coupe transversale du pédoncule. C, cellules épidermiques ; f, système fibrillaire; p, anastomoses formant le plexus moyen.

non élective; dans les doubles colorations, on peut arriver, selon la manière de procéder, à les teindre électivement par l’un des colorants du mélange : par la méthode de Mallory les fibres prennent généralement une teinte bleue violacée, mais en faisant varier les conditions de la coloration on peut arriver à les tendre électivement en rouge vif par la fuchsine. Par la coloration au rouge Magenta-carmin d'indigo elles peuvent également, suivant les conditions, soit se colorer en bleu verdâtre comme le réseau conjonctif, soit se colorer en rouge vif par le Magenta. De même les colorations hématéine-éosine-orange, peuvent dans certaines condi-

DU PÉDONCULE DE POLLICIPES CORNUCOPIÆ LEACH. 11

tions communiquer aux fibres élastiques une teinte orangée. Il est donc assez difficile par ces diverses méthodes d'obtenir une coloration élective.

La colorabilité de ces fibres sur le tissu frais, non fixé, est beaucoup plus intéressante; on a pu constater que le bleu de Nil se fixe sur ces éléments beaucoup plus intensément que sur le reste de la préparation, il en est de même pour le bleu d’aniline à l’eau. Nous avons essayé plus spécialement l’action du rouge Congo sur les tissus frais, dilacérés ou coupés par congélation! Ce colorant se fixe d'une manière parfaitement élective sur les fibres élastiques qui prennent peu à peu une teinte rouge assez intense. Nous avons appliqué cette électivité du rouge Congo pour les fibres élastiques à la mise en évidence de celles-ci sur des coupes de tissu fixé. Les meilleurs résultats ont été obtenus en utilisant le rouge Congo en solution dans l'alcool à 70°. La coloration ainsi obtenue sur des coupes, dont les noyaux et les masses musculaires sont préalablement colorées par l’hématéine, permet d'obtenir une différenciation très remarquable des fibres élastiques qui se teignent en rouge intense. La déshydratation par l’alcool n’altère en rien cette coloration et les préparations peuvent être montées au baume du Canada.

On sait que le rouge Congo en solution aqueuse ne pénètre jamais dans la cellule vivante et ne se fixe d’une manière élective que sur diverses formations cuticulaires de nature chitineuse (telles sont par exemple la coque de certains Infusoires, le pédoncule des Epistylis, etc. (Voir E. Fauré-Fremiet, 1904-1905). La coloration des fibres élastiques de Pollicipes par le rouge Congo en solution aqueuse est donc un fait assez spécial qui nous a suggéré l’idée que ces fibres pourraient être de nature chitineuse, ce que nous avons cherché à vérifier en examinant l’action de différents réactifs.

Il apparaît d’abord que ces fibres sont très résistantes à l'égard des bases faibles telles que l’eau de chaux et l’eau de baryte; elles

: N à résistent également à la soude 50 mais en présence de soude en

solution plus concentrée, normale par exemple, elles subissent un léger gonflement et la biréfringence diminue; cependant les fibres

1. On a utilisé une solution de rouge Congo saturé dans l’eau distillée dont quelques gouttes étaient diluées dans une petite quantité d’eau de mer.

ne se dissolvent pas. La digestion trypsique, en présence de carbonates alcalins et la digestion pepsique en milieu légèrement acidifié par HCI, n’attaquent pas les fibres qui gardent leur biréfringence; néanmoins, dans certains cas, la digestion pepsique acide peut déterminer un gonflement de ces fibres avec diminution sensible de la biréfringence. Ces propriétés ont été utilisées pour isoler les fibres élastiques à l’état plus ou moins pur; malgré cela il reste toujours quelques résidus musculaires qu'il est très difficile de détruire complètement.

Ajoutons que les solvants des graisses ne changent en aucune manière ni l'aspect physique ni la colorabilité des fibres élastiques.

Si ces éléments sont très résistants à l’égard de tous les réactifs qui viennent d'être cités, il n’en est pas de même à l’égard des acides. L’acide chlorhydrique concentré à froid dissout totalement les fibres au bout de quelque temps. En présence de HCI à 2 p. 100 à 120° pendant quarante minutes ces éléments sont totalement détruits. Ce fait est en faveur de leur nature chitineuse; mais il restait à démontrer la formation d’un sucre réducteur au cours de la destruction de ces éléments par hydrolyse acide.

A cet effet, des pieds de Pollicipes ont été tout d’abord traités par l’eau de chaux ce qui permet de détacher très facilement la cuticale! externe et d'isoler la partie charnue; celle-ci (187 grammes dans l’un de nos essais) a été soumise, après broyage, à la digestion trypsique, le liquide de digestion étant renouvelé plusieurs fois pendant quelques jours. Les résidus, lavés et recueillis par centrifugation, ont été soumis ensuite à l’'hydrolyse sulfurique (SO, H, à 2 p. 100) à 120°, pendant quarante minutes; le liquide trouble, après défécation par la liqueur de Patein et traitements habituels, a servi pour le dosage du glucose supposé par la méthode de Bertrand. Le chiffre obtenu calculé en glucose a donné 17 milligrammes pour 100 grammes du poids humide de pédoncules décortiqués. La même opération a été répétée sur des éléments élastiques isolés après digestion. Mais la quantité traitée n’a permis d'obtenir qu’une quantité d’oxydule insuffisante pour un dosage.

1. La cuticule de la cavité palléale très difficile à éliminer ne représente par rapport

à la totalité de la masse du pédoncule qu’une quantité négligeable qu’il est pratiquement impossible de séparer mécaniquement.

DU PÉDONCULE DE POLLICIPES CORNUCOPLÆ LEACH 13

mn.

Fe *

Fi. 5. — Pédoncule de Pollicipes cornucopæ. Coure transversale montrant deux aspects du plexus central dans la région inférieure du pédoncule. Bouin. Rouge Congo.

D'après tous ces faits, il est infiniment vraisemblable que l’on à affaire en ce qui concerne les fibres élastiques à une formation de nature chitineuse.