II. — Étude in vitro de l'action du toxique en solution sur

Nous considérerons :

1° \ï action in vitro de certaines substances chimiques ;

2° Inaction in vitro des toxines microbiennes.

1° Substances chimiques. — Nous avons étudié l'action in vitro d'un certain nombre de substances chimiques : bichromate de potasse, bichromate d'ammoniaque, acide chromique, sublimé, cantharidate de soude. Nous employions des solutions de concentrations différentes. Nous avions espéré tout d'abord arriver à trouver une solution de concentration telle qu'elle neléserait pas le tube contourné et pourrait même le fixer. Dans ce but, nous nous sommes servi de dilutions dont le point cryoscopique était A = — 0°,78, les tubes contournés se trouvaient toujours lésés.

Pensant que peut-être le point cryoscopique convenable pour la non- altération du rein était différent de celui que nous avions obtenu avec l'eau salée (volume des molécules, etc.), nous prenions d'un liquide donné des solutions à des points cryoscopiques différents :

ÉTUDE IN VITRO DE L'ACTION DU TOXIQUE EN SOLUTION 8l

Dans tous les cas, il existait des altérations notables des tubes contournés ; les tubes droits, par contre, n'étaient pas lésés. Les morceaux de rein ayant séjourné dans la solution à point cryocospique peu élevé, présentaient des tubes contournés avec des cellules tellement gonflées que la plupart avaient éclaté ; le protoplasma était formé de grosses granulations.

Lorsque la solution avoisinait — 0°, 78, les altérations étaient moins intenses, mais encore très marquées. Le protoplasma se présentait souvent sous forme de gros bâtonnets dans toute l'étendue de la cellule ; la bordure en brosse est partout visible.

Lorsque la dilution avait un point cryoscopique plus élevé, on notait comme un ratatinement général de la cellule avec production de vacuoles.

Conclusions. — Ces expériences nous prouvent donc :

i° Que Von peut facilement constater in vitro V altération du tube contourné par une solution toxique ;

2° Qu'une série de substances chimiques, employées couramment pour la fixation du rein, sont des agents nocifs et lésionnels pour l'organe ; ce qui explique les mauvais résultats que nous avons obtenus au début de notre étude, en prenant quelques-uns de ceux-ci comme milieux fixateurs. Ce pouvoir lésionnel provient, d'une part, de Vosmonocivité : les fixateurs employés couramment en histologie ont un point de congélation variant entre — 1° et — 2° ; d'autre part, pour certains d'entre eux que nous aoons étudiés plus haut, d'une action directe inhérente à l'agent chimique lui-même.

2° Toxines microbiennes. — Nous avons expérimenté avec la toxine diphtérique. Elle tuait en 3 jours le cobaye à la dose de 1 centimètre cube pour 300.

Nous opérions de la façon suivante :

Nous mettions dans une quantité donnée d'eau salée à — 0°,78 un nombre donné de gouttes de cette toxine pure, puis nous prenions le point cyoscopique de la dilution, et nous arrivions par

RATHERY

tâtonnements à avoir A = - 0°,78. Nous faisions en sorte, dans ces expériences,de ne pas congeler la solution même qui devait nous servir à expérimenter sur le rein ; nous divisions pour cela la dilution mère, chaque fois, en deux parts, l'une qui serait congelée, l'autre qui ne serait pas portée dans la cryoscopie ; il est bien évident que ces deux parts de la dilution mère devaient avoir le même point cryoscopique.

Le liquide ainsi obtenu est mis à l'étuve à 37° en même temps qu'un tube témoin contenant de la solution de NaCl à A =— 0°,78. Lorsque les solutions ont acquis la température de l'étuve, on plonge dedans les petits cubes de rein de cobaye normal et on laisse les morceaux dans les dilutions pendant une demi-heure. Puis, on fixe, inclut et colore suivant notre méthode. Les coupes de rein ainsi traitées ne présentent aucune lésion hislologique nette, et il est impossible de constater une différence réelle entre les morceaux plongés dans le tube témoin et ceux traités par la solution de toxine. Étonné de ce résultat, nous avons recommencé l'expérience en opérant avec des doses croissantes.

Dose faible. — 2 gouttes de solution de toxine au centième dans 100 centimètres cubes d'eau salée.

Dose forte. — 7 gouttes de toxine pure pour 125 centimètres cubes d'eau salée.

20 gouttes de toxine pure pour 100 centimètres cubes d'eau

salée.

Dans les trois expériences, les résultats furent les mêmes: absence totale de lésion.

Conclusions. — La toxine diphtérique en solution in vitro ne lèse pas le rein. Il est donc permis de conclure que la toxine n'agit pas directement sur le rein dans l'économie, elle provoque peut-être dans 1 organisme la sécrétion de certains corps qui, eux, sont capables de léser le rein. Nous verrons plus loin les diverses conclusions que l'on peut tirer de ces expériences, en étudiant les néphroloxines.