PROCÉDÉS OPÉRATOIRES
complètement le modtis faciendi suivant, employé par divers auteurs : « Le rein, débarrassé de sa capsule, était lavé soigneusement dans une solution physiologique de sel marin; il était placé ensuite dans un bocal stérile et là coupé en menus morceaux, que l'on passait finalement à travers un tamis métallique très fin, préalablement chauffé à blanc. »
Nous rejetons de même complètement le procédé qui consiste à piler le rein dans un mortier avec du sable ou de la brique additionnés de solution physiologique de NaCl, à recueillir le liquide surnageant et à injecter ce liquide. 11 est évident que de la sorte on n'injecte qu'une portion très limitée du parenchyme broyé.
Bierry (53) laisse macérer vingt-quatre heures le rein, lavé et finement haché, dans une solution faible de carbonate de soude en présence de chloroforme et de toluène : on filtre, on précipite par l'acide acétique, on laisse déposer, on décante, on lave à l'eau. Après plusieurs précipitations et redissolutions successives, on obtient après filtration un liquide incolore, dans lequel on précipite une dernière fois les nucléo-albumines, on les recueille, on les dessèche à l'étuve ; cette poudre est mise en suspension dans une solution de NaCl à 3 p. 1.000 et injectée dans le péritoine du lapin.
Nous croyons que l'injection de ces nucléo-albumines précipitées est de beaucoup inférieure à l'injection du parenchyme rénal dans son entier.
Aussi nous en tenons-nous à la technique suivante, qui est à peu de chose près celle indiquée par Nefedieff et qui nous a toujours donné d'excellents résultats sans le moindre accident infectieux:
L'animal dont on devait prendre le rein était saigné à blanc (section des carotides), puis, immédiatement, on pratiquait l'ablation du rein avec l'asepsie la plus rigoureuse ; jamais nous ne nous servions de solutions antiseptiques. L'animal était dépouillé de sa peau, puis lavé au savon, à la brosse, à l'alcool et
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çfi TOXICITÉ DE L'ÉMULSION RÉNALE
à l'éther; on enlevait alors le rein, on le libérait de la graisse avoisinante, de son pédicule rénal; puis, le rein, déposé dans une boîte de Pétri stérile, était coupé en petits morceaux et mis dans l'appareil broyeur de Nefedieff.
Cet appareil constitue une sorte de presse composée de trois cylindres qui s'emboîtent les uns dans les autres, et dont deux sont creux et le troisième plein. Dans le premier cylindre creux, on met de la solution physiologique de sel marin ou de l'eau distillée (10 à 15 centimètres cubes); dans le deuxième cylindre, terminé à son extrémité par un tamis-entonnoir, est déposé le rein coupé en morceaux. Au moyen d'une vis à pression, on fait passer dans le cylindre extérieur à travers l'entonnoir-tamis tout le contenu du moyen cylindre. L'émulsion obtenue est suffisamment fine pour passer à travers une aiguille de moyen calibre. Tout le parenchyme rénal est ainsi broyé, il ne reste dans le fond du tamis-entonnoir que quelques rares débris fibreux.
Cet appareil était stérilisé auparavant dans son entier à l'autoclave à 115°, le cylindre étant rempli de la quantité d'eau nécessaire pour l'expérience. Le parenchyme ainsi broyé était injecté de suite.
L'injection sous-cutanée n'a été employée par nous que rarement, parce qu'elle donne lieu à une irritation locale notable, pouvant influer sur la nutrition générale des animaux et peut-être sur la fonction de leurs reins. Peu après l'injection on constate la formation d'une boule pâteuse, qui se résorbe du reste complètement mais lentement. Souvent, si l'on n'a pas eu la précaution de faire l'injection sur le dos au lieu de la faire sur le ventre, l'animal s'écorche, et une suppuration secondaire peut se produire. On doit alors rejeter l'animal.
V injection intrapéritonéale est beaucoup mieux supportée au point de vue des réactions locales consécutives. Nous avons constaté d'autre part que l'émulsion était facilement résorbée ; c'était donc la méthode de choix.
Nous étudierons :
1° La résorption intrapéritonéale du tissu rénal; 2° Les effets de cette résorption.
§ 1. — Résorption du tissu rénal.
Le tissu rénal injecté dans le péritoine des animaux provoque dans ce dernier un afflux leucocytaire destiné à phagocyter ce tissu, à produire et à répandre dans l'organisme la néphrotoxine. Cette injection suscite, du reste, une poussée de leucocytose sanguine, comme nous avons pu le constater; nous pratiquions l'examen du sang du lapin avant l'injection de rein de cobaye et nous pratiquions ce même examen 2!\ heures, puis 3 jours après. Cette leucocytose était surtout de la mononucléose (grands mononucléaires) et s'accompagnait d'une poussée assez nette d'hématies nucléées ; 3 jours après, cette leucocytose faisait défaut. Nous avons surtout porté notre étude sur la résorption in situdu tissu injecté. Nous l'avons étudiée de deux façons : soit en prélevant, une série d'heures ou de jours après l'injection, de la sérosité péritonéale, nous colorions les éléments par le rouge neutre ou le picro-carmin ; soit surtout en pratiquant des coupes histologiques des petites masses qu'on pouvait retrouver dans la cavité péritonéale ; nous fixions ces morceaux soit par le réactif fixateur de Dominici, soit parle Flemming et nous colorions les coupes, soit à l'éosine-orange, bleu polychrome ou bleu de tolluidine, soit au picro-carmin. Les coupes traitées de cette dernière façon nous ont donné des résultats excellents.
Le protoplasma de la cellule rénale prend une couleur rouge brique tout à fait spéciale ; aussi peut-on facilement déceler sa présence sous forme de granulations irrégulières dans l'intérieur des leucocytes (Voir iig. 2 et 3, Pl. V).
Exsudât périlonéal. — Une heure après l'injection, nous