MATIÈRES COLORANTES DU GLOBULE ROUGE. — HÉMOGLOBINE ET OXYHÉMOGLOBINE

L'hémoglobine et l'oxyhémoglobine sont les matières colorantes du globule rouge du sang des vertébrés. Ce sont des substances protéiqui i et ferrugineuses. Elles sont très voisines l'une de l'autre : l'oxyliémoglo* bine dérivant de l'hémoglobine par oxydation directe, en présence de l'air; l'hémoglobine pouvant être régénérée aux dépens de l'oxyhémogloj bine par l'action du vide.

Ces pigments n'existent pas seulement dans les globules rouges du sang des vertébrés; on les trouve encore dans le tissu musculaire de ces mêmes animaux, ainsi que dans le sang d'un certain nombre d'invertéj brés, non plus fixés sur des éléments figurés, mais dissous dans la liqueur sanguine.

Les pigments du sang peuvent être obtenus sous forme cristalline. C'est à cette particularité que nous devons de bien connaître la composition et les propriétés physiques et chimiques de ces corps ainsi qui leurs principaux produits de décomposition.

L'oxyhémoglobine étant stable à la température ordinaire, ce pigment a été plus particulièrement étudié.

OXYHÉMOGLOBINE ('). — HÉMOGLOBINE

Oxy hémoglobine. Tous les sangs ne sont pas également convenables pour la préparation de cristaux d'oxyhémoglobine, car tous

(M On l'avait d'abord appeler hémalosine, mais on a du renoncera ce nom qui était relui d'une madère colorante végétal*. On appelle encore l'iiémoglobinc hémaloglobuluw, Mm* tocristalline ou, comme Stockes, cruorinc,

OXYHÊMOGLOBINE. :io7

ne renferment pas la même variété d'ûxyhémoglobinô, et ces diverses variétés se distinguenl en particulier par la facilité plus ou moins «rande qu'elles ont à cristalliser. Les sangs qui permettent le mieux la préparation de cristaux d'oxyhémoglobine sont ceux de rat, de souris, de cobaye, de carpe, de perche, de barbeau. 11 suffit en général d'ajouter à ces sangs un peu d'éther de façon à les laquer, ou une petite quantité , d'eau et un peu d'éther, puis de refroidir ce mélange à 0°, pour le voir -se transformer en un magma cristallin.

Les sangs de chien, de ebat ou de cheval doivent subir le même traitement, mais être additionnés en outre, du quart de leur volume d'alcool. IPour d'autres, ceux de l'homme ou du singe, il faut ajouter plus d'alcool ( encore et refroidir beaucoup. Enfin, ceux de bœuf et de porc ne donnent que très difficilement de l'hémoglobine cristallisée.

Arthus a indiqué le procédé suivant dans lequel il n'est pas nécessaire de refroidir le sang : à 1 volume de globules rouges de sang de cheval • séparés du plasma on ajoute 2 volumes d'eau distillée, et l'on introduit ce mélange dans un dialyseur. On le plonge dans un vase contenant 8 à MO volumes d'alcool à 30 ou 40 pour 100 et l'on abandonne le tout pendant 24 heures. L'alcool traversant lentement le dialyseur, précipite ll'oxyhémoglobine sous forme cristalline.

Pour préparer l'oxyhémoglobine pure, Hoppe-Seyler emploie le procédé suivant : à du sang défibriné on ajoute 10 à 20 volumes d'eau salée ià 1 pour 100 et l'on centrifuge. Les globules séparés de la liqueur, sont « de nouveau mêlés d'eau salée et séparés par centrifugation, etc. Ainsi I lavés, ils sont additionnés de 2 volumes d'eau distillée et ce mélange est aagité avec de l'éther. L'excès d'éther surnageant est décanté; la liqueur eest abandonnée a l'air dans une large capsule pour chasser l'éther, elle (est ensuite refroidie à 0° et additionnée d'un quart de son volume d'alcool :ià 0n. On abandonne ce mélange pendant quelques jours à une température de — 5° à — 10°. Les cristaux d'oxyhémoglobine qui se sont déposés sont redissous dans très peu d'eau à 35"; cette solution est refroidie eet mélangée d'alcool également refroidi. Les cristaux formés sont enim Uavés à l'alcool à 25 pour 100 et desséchés dans le vide «à la température dde 0 degré (').

Lchmann a donné la méthode suivante : on saigne un chien et on tlaisse le sang se coaguler en lieu bien froid. Après 24 heures, on divise He caillot on le faisant passer à travers un linge. On ajoute à la partie liquide quelques centimètres cubes d'une dissolution aqueuse de bile cristallisée; elle dissout les globules et fait s'extravaser l'hémoglobine. Après un joui- encore, on filtre et l'on additionne la liqueur du 5'' de

[' Voir Compt. rend., CIX, 156, nue modification importante à ce procédé

:i5s m SANG.

son volume d'alcool froid. Bientôt apparaissenl les cristaux d'nxyhémoa globine qu'on purilie comme ci-dessus.

Composition de foxy hémoglobine. L'oxyhémoglobine, telfl qu'elle cristallise du sang oxygéné par les précédentes méthodes, ;i été étudiée par divers autcurâ; .Nous en donnons ici quelques analyses erj faisant remarquer que celle de Kessel, faite par la méthode de Ihimasj donne une garantie sérieuse; pour le dosage de l'azote, tandis que toutes les antres ont été exécutées par la méthode à la chaux sodée qui fournit généralement îles chiffres trop faibles:

Analyses de l'ôxyhémoglobine cristallisée et sèche.

Éléments dosés

Cheval

1 1 II ■ 1 1011 il * 1 1 wl il

Porc

Chien

Boeuf

/ H SpnLpr\

\ MA • à M il lA 1 J

(01 lo)

(A. Jacquet)

1 HBfner)

Azote

■xi ,36

Fer

Eléments dosés

Écureuil

Oie

Poulet

Calcul pour

(H.-Seyler)

(Il.-Si'i/ler)

(A. Jacquet)

C"*H*Sïiz"70"7SsFfi

Hvdrogène

iG , 09

Fer .'4^ *.*i'KJl

Malgré cette similitude de composition, nous verrons tout à l'heure que chaque espèce animale fournit une oxyhémoglobine spéciale.

On remarquera que ces analyses portent sur des oxyhémoglobines de sangs comparables entre eux. Mais si l'on passe aux sangs d'oiseau, de poisson et surtout de reptile, le rapport des poids de l'oxyhémoglobine au fer qu'elle contient change aussi :

0XYHÉM0GL0B1NE.

Oxyomoglobini

ir 1000

pour Hioi)

de snng.

lie saiiji.

ii a

Grenouille. . .

l'oxyhémoglobine du sang dè grenouille, en particulier, parait beaucoup plus riche en fer que toutes les autres.

Le calcul de l'analyse de Kossel conduit à

C5WH8raAzU70U7S*Fe,

en admettant qu'il y ait un seul atonie de fer par molécule d'oxyhémoglol)ine('). Le poids moléculaire de cette substance serait donc, d'après ces nombres, de 11881, c'est - à - dire presque exactement le double de celui que nous avons attribué à l'albumine d'œuf.

Propriétés de Voxyhèmoglobine. — L'oxyhémoglobine cristallise sous des formes très diverses, suivant le sang d'où elle provient, mais elles appartiennent presque toutes au système orthorbombique. La figure 55 indique quelques-unes des apparences de ces cristaux. Le tableau suivant fournira des renseignements précis à ce sujet :

(i) «orner attribue à l'bxyhémoglobinc de chien la. formule C°^I^Az»°ffeS30«1 et le poids moléculaire 14129. On remarquera què dans les analyses d'oxyhémoglobmc les dernières faites el les plus sûres, le poids centésimal du fer ne dépasse pas 0,39 pour 100 d'oxyhemoglohinc.

Fig. 55. — Cristaux d'hémoglobine :

,i et 6, do l'homme; c, du chat; d, du encline d'Inde; e, du cheval; /', de l'écureuil.

;ioo

POHMES CltlSTAMJNKs BT sm.vnu.HK .iks PRINCIPALES VARIÉTÉS I.'oxvI,K«o(iI.o,„NK

ESPECE \ M Mai. i;

Homme

Singe (ejn««éph«le).

Ecureuil. . .

Chat .

Lion. .

Chien .

Cobaye .

Souris. .

Rat. . .

Cheval, .

Lapin . .

Mouton .

Bœuf . .

Porc. . .

Pigeon. .

Oie . . ;

Grenouille

Carpe. .

Tanche .

Lombric,

SOLUBILITE Iians l'eau FROIDE