ÉTUDE AU MOYEN DE L'ACIDE OSMIQUE
Ces deux nouveaux tubes alteignent la iibre musculaire dans le sein de la même éminence terminale, en deux points plus ou moins écartes Tun de Taulre. La gaine secondaire s*est divisée sur celte bifurcation du tube nerveux; puis elle recouvre l'éminence, mais sa disposition est un peu plus complexe que dans la première forme que nous avons examinée.
La complexité est encore plus grande loi'sque chacun des tubes secondaires se divise à son tour en deux nouveaux tubes, et qu'ainsi le nerf afférent pénètre dans la fibre musculaire par quatre points voisins, constituant pour ainsi dire quatre éminences confondues les unes avec les autres.
Ces variétés de disposition des tubes nerveux à leur entrée dans Téminence terminale ne constituent pas des différences importantes, mais elles servent de transition entre la terminaison motrice telle qu'elle existe chez les lézards et les mammifères d'une part, et de Tautre chez la grenouille.
Dans les terminaisons nerveuses dont nous venons d'esquisser la disposition générale, nous avons à considérer Texpansion de la gaine de Schwann et celle de la gaine de Henle. Or, chacune de ces gaines possède dos éléments cellulaires spéciaux. La gaine de Henle est revêtue d'une couche endothéliale. I^a gaine de Schwann est doublée d'une couche protoplasniique dans laquelle est logé un noyau par sèment. Si donc ces gaines en se modifiant forment une partie constitutive des terminaisons motrices, il nous sera possible de nous en rendre compte par l'observation de leurs noyaux, qui doivent les accompagner dans leur transformation.
Pour cette étude, je vous engage à choisir la couleuvre. Après avoir fixé les muscles intercostaux de cet animal par une injection interstitielle d'acide osmique, vous les détacherez, vous les mettrez dans un verre de montre avec
RIHVIER, 8TST. KEnv., T. II. SO
S08 TEHHN&ISOX DES I4EfiPS IMlNS LES MUSOSS STRIÉS. 1 OU 2 centiraèlres cubes de picrocarminaliî et vous les j laisserez pendant une heure enTÎron. Puis ils seront lavés el montés dans la glyccrine additionnée de I pour 100 d'acide formique. Dans ces muscles, que leur minceur permet d'examiner tout entiers, vous chercherez des faisceaux ^ situes immédiatement sons la lamelle, pn^sentent leur éuiinencc nerveuse du côte de l'œil (ic. l'ohservateur. A rcïtrémilé du tube nerveux ù myéline, vous reconnaîtrez l'épanouissement de la gaine de Henle et le rcsserreinenl de k gaine de Schwaun embrassant le renflement turuiinal de la gaine médullaire. Au delà de ce renflement, ou lûen autour de lui, suivant que l'émirience terminale sera vue dt? profil ou de lace, vous remarquerez des noyaux colorés en rouge. En les cousidéranl avec atlcnlioii, vous serez frapiiés des différences qu'ils prcsenti^nt. Les uns sont petits et ont des contoui's irréguliers; les autres, très-grands, génériik-meiil situés au-dfssous îles premiers, sont ovalaires; ils monU^t un double contour très-net el possèdent des nucléoles vtdumineux (PI, YII, fig. 5). Les premiers sont fortement colorés par le carmin, tandis que les seconds sont à peîne rosi^, ce qui peut tenir soit à une diflëience d'épaisseur, soil à une différence d'alïinité pour la matière colorante.
Sur des vues de prolil, vous observerez, immédialcmoiil au-dessous de la membrane qui revêt l'éminenco, dcî noyaux fortement colorés en l'ouge. Plus pi-ofortJémenl. vous distinguerez des noyaux plus volumineux et plus pâles; enhn, entre les premiers et les seconds vous remarquerez encore des noyaux irréguiiers, plus colorés et plus petits que ceux de la couche profonde.
Celte observation établit qu'il existe en réalité dans l'i'minence terminale trois espèces de noyaux. Les premiei^s, sitUL's à la face profonde de la membrane qui revêt l'éminencc, sont semblables à ceux (|ui doublent la gaine de
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Henle. Bien que je n'aie pas réussi à manifester autour d'eux au moyen du nitrate d'argent des limites cellulaires, leur forme aplatie me semble démontrer qu'ils appartiennent à un revêtement endothélial ; je suis convaincu que ces noyaux appartiennent bien à la membrane de l'éminence et qu'ils correspondent à des cellules analogues à celles de la gaine de Henle ; aussi je les nommerai noyaux de la gaine ou noyaux vaginaux.
Quant aux grands noyaux clairs, peu colorés par le carmin et à nucléoles volumineux, qui se trouvent à la partie protonde, je vous propose de les appeler noyaux fondamentaux^ car ce sont eux qui caractérisent, à proprement parler, l'éminence nerveuse. Enfin, je donnerai aux noyaux intermédiaires le nom de noyaux de r arborisation, car, ainsi que je vous le montrerai à l'aide d'autres méthodes, ils sont situés sur les branches de l'arborisation terminale.
Lorsque les préparations faites au moyen de l'acide osmique ont été colorées soit avec le picrocarminate, soit avec la purpurine, l'arborisation terminale peut être reconnue, mais seulement d'une façon assez vague, sous la forme de cordons ramifiés clairs, se détachant sur un fond plus sombre.
D'autres matières colorantes, comme l'hémaloxyline par exemple, ne peuvent pas être appliquées ici, parce qu'elles colorent aussi fortement la substance musculaire que les ramifications nerveuses. J'ai même essayé de décolorer après coup la substance musculaire, mais sans arriver à aucun résultat satisfaisant. Dans la prochaine leçon, du reste, lorsque je vous parlerai de l'arborisation terminale, je vous indiquerai des méthodes qui permettent de la suivre très-exactement.
Avant d'arriver à ces méthodes, il faut que j'attire votre attention sur un fait relatif à l'éminence nerveuse et qui
SOft TÊRHINAISO» DES NBRFS DAÂS LES HUSCLES S i ou 2 centimètres cubes de picrocarmiiiatt' et vous les j iaissei'Gz i)enHant une heure environ. Puis ils soronl lavé et montés dans la glycérine additionnée de 1 jiour 100 d'acide fnrmique. Dans ces muscles, que leur minceur permet d'examiner tout entiers, vous chercherez des fatsccdux qui, ' gjtucs immédiatement sous la lamelle, présentent leur émînence nerveuse du côté de l'œil de l'obscrviileur. A l'oïtrcmilé du tube nerveux à myéline, vous reconnaîtrez l'cpanouissemenl de la gaine de Ilenlc et le ressorreineul de ta gaîne de Schwann embrassant le renflement terminal de la gaine médullaire. Au delà de ce l'enflemenl, ou bien autour de lui, suivant (jue l'émincnce terminale sera vue de profil ou de face, vous remarquerez des noyaux colorés en rouge. En les considérant avec alleulioii, vnus serez frapiiés des différences qu'ils présentent. Les uns sont petits et ont des contoui's inx'guliers; les autres, tris-grands, généralemenl situés au-dossous des premiers, sont ovalaircs; iU monlmil un double contour très-net et possèdent des nucléoles voIik mineux (l'I. Vil, fig. 3), Les premiers sont fortement colorés par le carmin, tandis que les seconds sont à peine rosés, ce qui peut tenir soit à une différence d'épaisseur, soit à une différence d'affinité pour la matière colorante.
Sur des vues de profil, vous observerez, immédiatement au-dessous de la membrane qui revêt l'émincnce, des noyaux fortement colorés en rouge. Plus profondémenl. vous distinguerez des noyaux plus volumineux et plus pâles; enfin, entre les premiers et les seconds vous remar. querez encore des noyaux irréguliers, plus colorés et plus petits que ceux de la couche profonde.
Cette observation établit qu'il existe en réalité dans l'éminence terminale trois espèces de noyaux. Les premiers, situés à la face profonde de la membrane qui revêt l'éminence, sont semblables à ceux qui doublent la gaine de
COUPES TRANSVERSAI.KS DES FAISCEAUX MUSCULAIRES. r.00
de la cuisse du lézard par exemple, une ÎDJeclion interstitielle d'acide osmique, on les enlève et on les plonge dans ralcool, pour durcir les faisceaux qui n'ont pas été fixés suffisamment. Après une ou deux heures, la pièce est placée dans une solution sirupeuse de gomme arabique. Au bout de vingt-quatre heures, elle en est retirée et plongée dans l'alcool fort.
Comme il est indispensable que les coupes soicTit extrêmement minces, elles doivent être faites à main levée (voyez pour les procédés d'inclusion et pour la manière de faire les coupes, t. I, p. 77). Une fois dégagées, il ne faut pas les faire flotter dans l'eau, parce qu'elles s'y désagrégeraient. Elles sont recueillies directement sur la lame de verre, et la gomme qu'elles contiennent est enlevée par un courant d'eau phéniquée que l'on fait passer sous la lamelle couvreobjet. La coloration au picrocarminate et le lavage subséquent doivent également être pratiqués sous la lamelle; on évite de la sorte le déplacement des faisceaux les Uns par rapport alix autres. Enfin on conserve la préparation dans de la glycérine additionnée d'acide formique. Ce dernier réactif produit dans la substance musculaire un léger gonflement qui est favorable à l'examen.
Dans ces préparations, les faisceaux ne se montrent pas tous sectionnés dans une direction convenable. Les uns sont atteints obliquement, d'autres perpendiculairement à leur axe; ce sont ces derniers que l'on choisira pour y rechercher l'entrée d'un tube nerveux.
J'ai disposé sous un de ces microscopes une préparation sur laquelle vous observerez cette disposition.
Dans l'intérieur du faisceau, vous reconnaîtrez à leur coloration rouge les noyaux musculaires. Une portion du faisceau, distincte du reste par son aspect et sa coloration, correspond à l'éminence terminale; le sarcolemme la recouvre
TEBBfflMSOP) DES SEBF8 BANS LES HUSCIBS STRlfiS. t'8l iKîUemt'Hl l'ccoiiiiaissjilile après l'aclion ilc l'aci Je osmi- (](ic. Je me sers, comme vous le voyez, de ce nom ancien d'éminuncc nerveuse préféra blcment h celui de plaque motrice, c»r je ne vois aucune raison d'adopter lu nom du plaijuc pour un organe complexe, formé d'une arliorisatioii, d'une substance granuleuse, de trois espèces de noyam, el dans la constitution duquel entrent encore les expansions de la [jaïm! de Sehwann et de celle de Henle. Sur les préparations oi'i l'éminence est vue de profil, on n'aperçoit eiilre clic et la substance striée aucune ligne de démarcatiou nirrespfmdant au sarcolemme. Cette observation établit qu'il y a contact immédiat entre la terminaison nei'vcusc cl lu subsljince musculaire; elle vient confirmer l'opinion ' que nous avaient permis de nous former les préparalions faites à l'aide de. l'acide clilorhydriquc sur la situation du cette terminaison au-dessous de la membrane d*envclop|>c du faisceau primitif.
Les préparations faites avec le nitrate d'argent concourenl aussi à démontrer que rémincnce nerveuse est située au-dessous du sarcolemnie. En effet, ce réactif ne révèle nulle part une soudure, qui devrait exister eï le sarcolemme et la <|:aîne de Henle, dévelop|>és d'une façon indépendante l'un de l'autre, s'étaient ensuite réunis.
La eonlinuité de la membrane de Henle et du sarcolemme peut être reconnue encoie sur des coupes transversales de laiscenux musculaires faites au niveau d'une éminencc nerveuse. I*')ur les obtenir, il faut faire un nombre considérable de préparations, et les examhrcr successivement, jusqu'à ce que l'on rencontre dans l'une d'elles le résultat désiré.
1,0 durcissement du muscle est obtenu de la façon suivante : Après avoir pratiqué, dans les masses musculaires