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Les mêmes laits ont été constatés sur des œufs de tortue et des œufs de caméléon.

Des expériences directes m'ont fourni plus tard la contreépreuve de l'observation précédente. Si l'on prend la lécithine (mélangée de cérébrine) qui forme la substance des corps bii'éfringents et qu'on Tagite avec de l'eau albuniineuse, la substance gontle et perd en partie ses caractères o]»tiques; elle les recouvre lorsque l'eau s'est évaporée.

L'influence de la dessiccation sur l'apparition des corps polarisants était mise ainsi en pleine évidence. C'est vraisemblablement cette condition pbysique et non pas une condition physiologique, comme l'avait cru M. Dareste, qui présidait aux oscillations observées durant le cours du dévelo})pement dans la proportion des corps polarisants. On sait (pie l'œuf de poule subit, du commencement à la lin de rincul)ation, une perte d'eau, et l'on comprend en conséquence le fait de l'augmentation parallèle des corps biréfrinticnts dans la vésicule ombilicale du lœtus. Au moment de l'éclosion et dans les jours qui suivent, elle ne renferme pas autre chose. Quant au foie de l'embryon ou du jeune animal, il nous a toujours présenté des corpuscules extrêmement volumineux et ne ressemblant en rien aux véritables granulations glycogéniques. Ajoutons que la présence de ces corpuscules n'a rien d'inattendu pour les physiologistes, qui savent que l'on a, depuis quelques années, signalé et même dosé la lécithine dans la sécrétion du foie.

En résumé, la dessiccation nous fournissait un excellent moyen d'obtenir en quantiti'' suffisante la matière à examiner; mais en même temps qu'elle mettait ce moyen entre nos mains, elle nous apprenait à nous eu passer. Sachant, en elfet, que les corps biréfringents ne sont qu'un état physique particulier d'une substance qui existe abondamment dans l'oiuf, on pouvait rechercher directement cette substance sous son état dilfus, sans se restreindre à ses concrétions biréfringentes.

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C/esl là ce que je lis de concert avec ^1. Moral.

Excunen successif des différentes substances contenue dans Voiiif. — Tout d'abord, nous écartâmes riiypollièse que les corps polarisants de Tœuf pourraient être de la leucine. Outi'e que les rapports de cette substance avec l'albumine et les albuminoïdes, dont elle est un produit de dédoublement ou de destruction, rendaient peu vraisemblalde son existence dans Vamf frais, une autre raison excluait à priori cette substance, à savoir, l'abondance des corps polarisants dans l'œuf dessécbé. Une telle proportion de leucine n'aurait pas échappé aux cbimistes qui, pour faire l'analyse de l'œuf, commencent précisément par le soumettre à la dessiccation. Or aucune analyse n'en fait mention.

Cependant, en raison du peu d'autorité qu'ontpour nous les raisonnements à priori, nous voulûmes soumettre à l'épreuve expérimentale l'hypothèse de la nature leucique des corps de l'oîuf. Nous préparâmes de la leucine en assez grande quantité et aussi pure que possible; nous l'avons obtenue sous les deux états, en boules et en lames cristallines, cette dernière forme correspondant au maximum de pureté. Dans un cas ni dans l'autre nous n'avons reconnu de propriété optique comparable à celle des corps biréfringents de l'œuf; le plus souvent, lorsque la leucine est en boules, elle est opaque pour la lumière transmise. Le résultat est tout aussi négatif avec les composés leuciques, par exemple le chlorhydrate.

Les corps analogues à la leucine, les amides de la série grasse, furent soumis aussi à l'examen. Latyrosine fut préparée et examinée dans la lumière polarisée. Quoique biréfringente, comme la leucine, elle n'offre pas le caractère de la croix.

Corps gras et dérivés. — La cholestérine, puis les corps gras et leurs dérivés furent ensuite soumis à l'épreuve. L'oléine, la margarine, la stéarine, la palmitineet la cétine dissoutes n'ont pas donné lieu à des observations qui soient

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ànieiilionnei", au moins pour le bul que nous poursuivons en ce moment.

Les acides gras méritent d'être signalés. L'acide margarique et, à un moindre degré , les acides oléique et stéarique forment des groupements microscopiques de cristaux divergeant à partir d\m point central, et souvent d'une laçon très-régulière. Ces boules cristallines réalisent les conditions physiques nécessaires à la production des croix de polarisation, à savoir, la disposition de particules biréfringentes symétriquement distribuées autour d'un point ou d'un axe. De lait, on voit apparaître la croix de polarisation, mais elle présente une constitution qui rend impossible la confusion avec les corps de l'œuf. Les branches de la croix, au lieu de former un champ uniformément brillant, sont sillonnées de traits radiés obscurs; en un mot, on distingue parfaitement les houppes d'aiguilles cristallines dont le groupement a produit le phénomène. L'aspect est assez caractérisé pour qu'on puisse le faire servir, dans l'analyse chimique (jualitative, à la reconnaissance des acides gras. Mais il y a des combinaisons des acides gras qui présentent des ph('nomènes tout aussi distinctement que les corpuscules de l'œuf : le savon d'oléate de soude est dans ce cas. Oue l'on neutralise l'acide oléique ou que l'on saponifie l'oléine pure avec la soude, on obtient une masse glutineuse qui, dissociée dans la glycérine et examinée au microscope polarisant, fournit des croix Irès-neltement dessinées.

On peut dès lors se demander si les corps biréfringents de l'œu! sont formés par un savon de ce genre, par exemple par l'oléate de soude. L'abondance des corps gras de l'œuf permet une telle supposition. Le jaune ou vitellus contient en effet , en moyenne , d'après les analyses de Gobley (1), une proportion de 21,30 pour 100 de marga-

(1) (loblcy, Jdurnal de pliurmacic et de chimie \'^\. l XII, p. li.

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rine et d'oléine; d'autre part il contient aussi une petite proportion de soude plus ou moins énertiiquemcnt engagée dans des combinaisons. Les éléments du composé polarisant existent donc, et l'on est fondé à rechercher si le composé lui-même n'existerait pas, et s'il ne formerait pas précisément la matière des corpuscules polarisants.

L'expérience répond négativement. Les analyses de l'œuf ont bien fourni une proportion considérable de margarine et d'oléine, mais jamais d'acides gras libres ou de savons. Gobley a particulièrement insisté sur ce point, qui était capital pour ses recherches. En second lieu, les bases alcalines ne sont pas libres, mais combinées à des acides énergiques, chlorhydrique, sulfurique; déplus, leur quantité est extrêmement faible en comparaison des corps gras à saponifier, et insignifiante en comparaison des corps polarisants à la constitution desquels elles devraient participer.

A la vérité, certains traitements et l'incubation ellemême peuvent faire apparaître dans l'œuf une proportion notable d'acides gras, stéarique, margarique et phosplioglycérique. Mais c'est par la destruction d'une combinaison naturelle, la lécithine, dans laquelle ces corps sont engagés et d'où ils sortent sans être neutralisés. Cette lécithine, véritable savon de choline, est, d'ailleurs, susceptible de fournir par elle-même, comme nous le verrons, les corpuscules biréfringents les plus remarquables.

La conclusion de ces faits et de la longue discussion à laquelle nous venons de nous livrer est que les corps gras, ne peuvent, pas plus que l'amidon ou la leucine, être invoqués pour expliquer les corps j)olarisants de l'œuf. Certains savons, les oléates entre autres, conviendraient parfaitement à en rendre compte; nous pensons même que quelques corpuscules polarisants peuvent avoir cette composition, mais dans les conditions normales c'est le très-

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pelil nombre. La grande masse des corpuscules, sinon la lolalilé, esl tbrmée d'une autre matière dont nous devons poursuivre la détei'minaliou.

Parmi les matériaux de l'œid, il ne reste plus que deux groupes à examiner : d'abord les matières albuminoïdes, qui donnent lieu à des observations intéressantes; en second lieu les matières grasses pbospborées, lécithine et cérébrine, qui contiendront la solution du problème.

Matières a I bu )n inouïes. — - Le jaune d'œuf renlermc une variété d'albumine qui a reçu le nom de vitelline, une petite quantitéd'albumine véritable et des traces de caséine. La vitelline seule est en proportion suffisante pour èlre dosée : le jaune d'œuf de poule en contient 15,76 pour 100 (moyenne), d'après Gobley; l'œuf de car[)e en renferme 14 [tour 100 ; les ouifs de Tortue contiennent une substance identi({ue (paravitelline).

Toutes ces substances sont certainement biréfringentes. Tjiot a découvei't, connue Ton sait, que l'albumine était lévogyi'c, et depuis lois plusieurs auteurs ont mesuré son pouvoir rotatoire. Néanmoins, lorsque ces substances sont pures, elles ne présentent pas des groupements tels, qu'elles puissent manifester la croix de polarisation : la dessiccation ne détermine pas des ligures régulières.

Les conditions cbangent dès que les albumines sont unies aux bases ou aux sels alcalino-terreux. M. Karting (d'Ltrecbt) (1) a observé qu'en mélangeant suivant des ]>rocédés particuliers le carbonate de chaux à l'albumine, ou obtenait des corpuscules ou ca/cos^ J<cr//t'S, qui seraient formés de la combinaison des deux substances {calcoglobuline); ces corps présentent des zones concentriques, et manifestent de la façon la plus nette la cioix de polarisation. La gélatine, le sang, ont donm' niatièi'c à des observations de même nature. De notre côté, et avant d'avoir connaissance des travaux de )l. llarlini;, nous avions obteiui

(Il Ilarliiiy, Herherchcs de iiiorpltoloyic sfiiitltélique. Aiiistenlain, 1ST"2.

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des résultais analoLiiies. M. Moral et moi nous mélangeâmes un jour à une masse de vilelhis quelques cenlimèlres cubes d'une solution concentrée de baryte; le lendemain, il y avait dans la profondeur et. surtout à la surlace du uK'dange, un nombre immense de corpuscules polarisants plus petits que ceux de l'œuf el de forme moins régulièrement sphérique. L'albumine d'œuf bien pure, traitée de la même manière, nous a donné des corps d'une régularité parfaite présentant les croix avec les anneaux isocbroiiiatiques et les couleurs de la polarisation lamellaire. La vitelline,la serine se comportent comme l'albumine. Toutes les substances albuminoïdes ou collagènes (gélatine, osséine), mélangées à la solution de baryte, se recouvrent d'une pellicule exclusivement formée de ces spbérules polarisantes. D'autres bases que la baryte et la cbaux, d'autres sels que les carbonates, présentent, au degré près, les mêmes phénomènes.

En résumé, nous avons vu que le plus grand nombre, sinon la totalité, des principes azotés de l'organisme i)euvent, sous l'inlluence des sels alcalino-terreux, fournir des corpuscules bin'IVingents.

Arrivés à ce point de nolie recliei'cbe, nous voyons que notre problème a complètement changé de face. La question est pour ainsi dire renversée : il semblait diflicile au début de trouver une substance de l'œuf qui offrît le phénomène de la croix ; maintenant au contraire, il serait diflicile d'en trouver une qui ne le présentât point. L'embairas est de choisir j)arini ces matières celle qui entre véritablement dans la composition des corpuscules décrits, et d'éliminer les autres.

Un moyen précieux d'élimination se présente. Les composés alcalino-terreux de la vitclline et des autres albiiiiiinoïdes sont insolubles dans l'alcool el dans l'éllier, el ce