CHAPITRE VI

Nous exposerons ici les expériences de contrôle, en milieux non syphihtiques.

Ces recherches ont porté sur les sérums artificiels, les sérums humains de sujets indemnes de syphilis, les sérums animaux.

A. — Sérums artificiels physiologiques.

Il n’est guère de série d'essais où nous n’ayons examiné plusieurs préparations témoins dans une solution de chlorure de sodium physiologique. Tantôt,et plus le souvent,ces préparations ne subissaient aucune autre manipulation ultérieure ; tantôt, après un délai de une demi-heure à une heure, lorsqu'on s'était assuré qu'il ne s’était point fait d'agglutination spontanée, on chassait le sérum artificiel pour le remplacer par un sérum syphilitique ou sain. Nous avons ainsi examiné 180 préparations en solution de chlorure de sodium, dont 130 n’ont subi aucune manipulation ultérieure, et, par con-

séquent, ont servi de témoins pendant plusieurs heures.

La plupart de ces essais ont été faits avec une solution de chlorure de sodium à 7 gr. 5 p. 1.000, certains avec des solutions de concentration différentes : 8, 8,5 , 9 et 9,5 p. 1000.

Or, si le sérum physiologique constitue un excellent milieu pour voir vite et bien des tréponèmes, il est médiocre pour leur vitalité.

$ 1. Chlorure de sodium à 8-9,5 p. 4.000. — Les concentrations supérieures à 8 p. 1.000 sont très rapidement nuisibles à la vie du tréponème. Le parasite y apparaît comme considérablement grossi, hydropique pour ainsi dire. Ses tours de spire sont épaissis, d’un diamètre exagéré, et paraissent au moins deux ou trois fois plus gros que normalement ; la vrille est plus grossière, un peu déroulée. Le tréponème est très réfringent, lumineux ; mais il est peu mobile et il n’est point rare de le voir déjà mort en une heure et au plus en trois. 1l ne peut donc être question d'examen prolongé et encore moins d’agglutination.

$ 2. Chlorure de sodium à 7,5 p. 1.000. — À priori, si l'agglutination est un phénomène spécifique,elle ne doit jamais se produire dans le sérum physiologique. Or, sur les 180 lames que nous avons examinées, en ce milieu, nous avons noté trois fois les agglutinations caractéristiques. Le fait est des plus importants ; il mérite qu'on s’y arrête. Nous donnerons donc quelques détails sur ces observations.

4° Ad... malade 318, syphilides papuleuses vulvaires, datant de 10 jours; début de la syphilis non précisé ; aucun traitement jusqu'alors. .

Un fragment de la surface d’une des papules humides est mis dans du sérum à 7,5 p. 1.000 à 4 h. 10 (3 préparations). è

A 4 h. 98, les tréponèmes sont très nombreux, mobiles et isolés les uns des autres dans les trois lames.

À 5 h. 30, ils sont toujours très nombreux, mais on voit un assez grand nombre de petites étoiles, bien mobiles, dans deux des lames. À 7 h. 44, leur nombre est toujours considérable. Mais, au même point soigneusement repéré, on ne trouve plus qu’un petit agglutinat dans une lame ‘et quelques-uns dans une seconde.

Des préparations faites avec les tréponèmes de cette malade, le même jour, dans différents sérums syphilitiques, montrent partout des agglutinations très marquées. Le sérum d’une syphilis primaire, avec début le la roséole, donne de nombreuses étoiles en 50 minutes ; le sérum de trois syphilis secondaires agglutine fortement ces tréponèmes en 55 minutes et 4 h. 33. Fait important : le sérum d’un sujet indemne de syphilis, agglutine également en 48 minutes et 3 h. 25.

Notons, pour le moment, que ce jour-là les agglutinations ont été intenses dans tous les milieux, mais que cependant, elle a été beaucoup plus faible et moins rapide dans le sel physiologique que dans les sérums humains, et que, de plus, dans le sel, les agglutinats ont presque tous disparu en l’espace de 1 h. 40 ; il s'agissait, en grande partie, d'étoiles éphémères.

2° Coff.…..., malade 66, plaques hypertrophiques vulvaires, ayant débuté trois semaines auparavant, syphilides érosives buccales, céphalée ; aucun traitement.

Des fragments d’une des plaques hypertrophiques sont mises à 4 h. 49 dans une solution de NaCI à 7,5 p. 4.000.

À 5 h. 41, les tréponèmes sont innombrables dans les préparations; on voit de grosses étoiles partout où des hématies se sont accumulées et forment des piles ; ailleurs les tréponèmes restent isolés. Cette préparation contient une grande quantité de sang, entrainé avec le fragment leucocytique.

Deux jours après, on regarde la même préparation ; les tréponèmes sont toujours aussi nombreux, déroulés et morts ; mais, au même point, on ne voit plus d’agglutinats.

Dans la même série, une lame avait été préparée en remplaçant le sérum physiologique, cinq minutes après la mise en contact, par le sérum de la malade elle-même. Cette manipulation a pour résultat de diminuer considérablement le nombre des tréponèmes, et cependant, malgré leur faible abondance, nous notons des agglutinations caractéristiques en 1 h. 45.

Cette malade a servi encore à d’autres essais comme fournisseur tantôt de tréponèmes, tantôt de sérum.

Deux jours auparavant, ses tréponèmes agglutinaient très fortement dans d’autres sérums, en moins de une heure et, le fait est intéressant, ils agglutinaient assez fortement dans un sérum non syphilitique, en même temps que d’une façon intense et rapide dans son propre sérum (comme la malade précédente).

Son sérum a, par ailleurs, été utilisé contre des tréponèmes d’autre origine (tableau A, p. 186, n° 20) ; il s’est toujours, dans des conditions normales, montré très agglutinant en une-heure environ.

3° Rich..., malade 38 ; plaques hypertrophiques vulvaires confluentes, datant de quinze jours ; début de la syphilis non précisé ; aucun traitement jusqu'alors.

On fait dix frottis, avec les tréponèmes de cette malade, dans une solution - de NaCI à 7,5 p. 1000. Sur ces dix lames, une seule présente des agglutinats.

Cette préparation avait été montée à 3 h.55 ; à 4 h. 32, on y trouve des tré- - ponèmes extrêmement nombreux, qui forment, en certains endroits, là seulement où des hématies sont accumulées, de nombreuses étoiles vivantes.

A 5 h. 925, on assiste très nettement à la formation d'étoiles éphémères, même dans les points où la préparation ne présente pas d’hématies, mais on les voit se disloquer sous les yeux, après quelques minutes, sans se reformer.

Les neuf autres lames se sont comportées de façon régulière et il n’est noté, à propos, d'aucune d’elles, d’amas d’hématies, comme dans la précédente. 6

Mais, l'avant-veille, nous avions observé le même phénomène d’étoiles : éphémères, dans les mêmes conditions, avec les mêmes ftréponèmes à propos d’un sérum non syphilitique. Dans ce cas encore, au moment du prélèvement, il s'était fait une extravasation sanguine dont une partie avait été entraînée

dans la préparation.

A ces trois observations se résument les agglutinations dans la solution

physiologique de chlorure de sodium.

Nous aurons à y revenir dans le chapitre VIIT, où nous condenserons et

discuterons tous les faits d'auto-agglutination (voir lableau I).

$ 3. — Citrate de soude à 5 p. 4000. — Nous avons faitun certain nombre d'essais avec une solution de citrate de soude, à divers taux de concentra tion. C’est à 5 p. 1000 que les solutions se sont montrées le moins nocive: pour les tréponèmes.

Ceux-ci se conservent, mobiles et à peine plus gros, pendant une à deux heures. Nous n'avons pas constaté d'agglutination spontanée sur dix prépa: rations.

Les solutions moins concentrées provoquent, déjà à 4p. 1000, une rapide dissolution des tréponèmes.

$ 4. — Conclusions. — Le sérum physiologique ne constitue pas le milie le plus favorable aux tréponèmes : il provoque leur mort en quatre à cim heures.

Sur 180 préparations, nous avons constaté trois fois une agglutination L'étude de ces observations et de leurs conditions sera plus utilemen exposée au chapitre VIII, où nous réunirons tout ce qui à trait à l'auto: agglutination.

B. — Sérums humains non syphilitiques.

$ 1. — Choix des sujets non syphilitiques. — Nous avons déjà décri (p. 27) l’action d’un sérum non syphilitique sur les tréponèmes.

Nous avons utilisé le sérum de 31 malades chez lesquels, par l'in terrogatoire, par l’examen clinique, enfin par la réaction de Wassermann nous pouvions éliminer toute infection syphilitique. Nous avons ainsi, à chaquesérie, recueilli de 1 à 4 sérums non syphilitiques, dont lespréparations ajoutées à celles qui avaient été faites en sérum artificiel, conslituaien chaque fois de 6 à 12 lames témoins. La plupart de ces sérums on été prélevés dans les salles de dermatologie de l'hôpital Broca; d'aucun proviennent d'enfants du service de M. le docteur Netter, à Trousseau, don nous élions à ce moment l’interne. Nous tenons à le remercier vivemen de nous avoir ainsi laissé profiter des ressources de son beau service.

Nous avons eu parfois quelques diffcultés à nous assurer de l'absenc certaine de la syphilis chez un certain nombre de malades. Nous n'en cite rons, pour preuve, que trois exemples :

L'une d'elles, Dut..…., malade 222, (tableau C, p. 202, n° 21), âgée de 66 ans présentait un ulcère de jambe dont on pouvait admettre l’origine variqueust Cependant le sérum de cette malade, dans. les deux recherches qui en ont ét faites, s'est montré régulièrement agglutinant en moins de cinquante minutes

r al

Nous ne saurions, en face de cette lésion, dont l'origine syphilitique est souvént si difficile à diagnostiquer, éliminer la notion d’une infection spécifique antérieure. Nous n'avons pu, par un interrogatoire serré, lever nos doutes, nous préférons donc faire des réserves sur cette observation.

Il nous a été plus facile de considérer comme syphilitiques deux autres malades qui étaient entrées à l'hôpital pour une affection d'autre nature. Du sérum avait été prélevé chez elles, pour servir de témoin (malades 426 et 197 : tableau'A, p. 180, n°5 28 et 29). La séro-agglutination fut, dans les deux cas, très nettement positive, et ces malades présentèrent, presque simultanément, des accidents indiscutablement syphilitiques.

La réaction avait donc eu, ici, une réelle valeur diagnostique. Ces exemples montrent Lout au moins la nécessité de grandes précautions dans le choix des sujets non syphilitiques.

S 2. — Morphologie des tréponèmes. — Le sérum d'un sujet indemne de syphilis constitue, à notre avis, le meilleur milieu pour étudier la morphologie exacte et la vitalité des tréponèmes.

Ceux-ci paraissent souvent grêles, fins, pâles el par conséquent difficiles à discerner.

Ils sont bien mobiles, mais il est rare qu'ils présentent des mouvements convulsifs, sauf peut-être peu de temps avant leur mort.

La mobilité des tréponèmes se conserve mieux et plus longtemps dans un sérum syphilitique que dans tout autre milieu. Nous avons déjà signalé cette différence de vitalité, qui peut, jusqu'à un certain point, fournir quelque présomption en faveur de la nature syphilitique ou non d’un sérum donné. l Certes, nous avons vu les tréponèmes perdre parfois leur vitalité en cinq heures, et même dans un cas en deux heures (tableau C); mais c'est là un fait exceptionnel ; presque toujours, au contraire, les microbes restent mobiles pendant un temps beaucoup plus long et rarement inférieur à huit heures. Il nous est arrivé, assez souvent, de constater encore des mouvements fort nets même en vingt-quatre heures, du jour au lendemain.

$ 3. — Agglutination. — Un intérêt plus grand encore s'attache à la constatation d'agglutinats dans ces sérums nou syphilitiques.

Sur les 150 préparations qui ont été faites en tel milieu nous avons relevé 11 fois les agglutinations caractéristiques. (Abstraction faite de celles que nous a données le cas d’ulcère variqueux douleux que nous avons rapporté plus haut.)

Partout ailleurs, les tréponèmes sont restés parfaitement isolés les uns des autres, aussi longtemps qu'a duré l'observation. Beaucoup de ces lames

renfermaient un nombre colossal de tréponèmes, au point qu'ils échap paient à toute numération mème approximative. Par contre, les prépara tions de la même série, en sérum syphilitique, présentaient des étoile: typiques et volumineuses, bien que, souvent, les tréponèmes fussent er nombre beaucoup plus réduit.

Cependant la constatation de ces onze cas d’agglutination ôterait touts valeur aux autres, si nous ne rendions pas compte, en détail, des condi: tions dans lesquelles ils se sont produits.

1° Lef... (Tableau C, p. 200, n° 12), malade 213, varices développées a deux membres inférieurs, eczéma variqueux.

Les 28 préparations faites dans le sérum de cette malade, avec les trépo nèmes de 12 sujets différents, nous ont donné six fois des agglutinations légères.

Cette fréquence relative pourrait, évidemment, faire penser à une infectior syphilitique, au moins latente, chez cette malade si un examen plus approfondi des conditions dans lesquelles se sont produits ces agglutinats, ne permettail pas d'éliminer cette cause d'erreur.

Il faut tout d’abord remarquer que, à d’autres essais, en face des trépor nèmes d’autres malades et quoique ceux-ci fussent en nombre énorme, il ne s'est pas fait d'étoiles même après un long temps d'observation; il faudrait dont admettre une grande inégalité, d'un jour à l'autre, du pouvoir agglutinant dé cette malade, en l'absence de toute modification brusque des lésions et de tou traitement mercuriel.

D'autre part, nous allons voir que, chaque fois qu'il y eut agglutinatior avec le sérum de cette malade 213, le fournisseur des tréponèmes était juste: ment une femme atteinte de syphilides récentes, en pleine poussée.

a) La première fois, le fournisseur des tréponèmes est Loff.., malade 316 cette femme présente des plaques hypertrophiques vulvaires qui datent dé trois semaines, elle n’a encore reçu aucun traitement général ni local.

La lame est préparée à 4 h. 49; à 5 h. 15, les tréponèmes sont très nom: breux, mobiles et isolés ; à 6 h. 15, ils se présentent dé même, cependant or peut voir une petite étoile à quatre branches.

Dans la même série, nous voyons des sérums syphilitiques provoquer de agglutinats nets et même intenses en moins d’une heure.

Cette lame n’a pas été examinée à des intervalles plus éloignés. Nous nt pouvons donc dire s’il s'agissait d'étoiles éphémères ou stables.

Dans une nouvelle série, deux jours après, il n’y eut agglutination qu’et sérums syphilitiques.

b) Sept jours plus tard, dans le sérum de la même malade, nous avons wi les tréponèmes de la malade 66 (innombrables dans cette préparation) agglu tiner faiblement en 3 h. 30. Cette malade 66 présente des plaques hyperlro phiques vulvaires dont le début remonte à trois semaines; elle n'a sub aucun traitement. Nôus avons vu, précédemment, que les tréponèmes de cett malade s'étaient légèrement agglutinés en 1 h. 30 dans une solution phy siologique de chlorure de sodium (p. 96, 2) partout où des hématies s'étaien accumulées dans la préparation. Les tréponèmes de cette femme se son

toujours montrés très agglutinants, aussi bien ce même jour que dans une série faite deux jours après; son sérum était également très actif vis-à-vis des tréponèmes d’autres malades.

c) Un peu plus tard, ce furent les tréponèmes prélevés sur la malade 318, qui s’agglutinèrent dans le sérum de Lef.…

Cette malade, Ad..., présentait depuis dix jours des syphilides papuleuses vulvaires ; aucun traitement n'avait encore été institué. de

À cet essai, on put noter, en 3 h. 20, une agglutination fort nette des tréponèmes, mais seulement là où des hématies encombraient en grand nombre la préparation.

Nous rappellerons que la malade 318 nous a déjà donné une agglutination dans une solution de chlorure de sodium (p. 96, 4e).

d) Quelques jours après, ce fut avec les tréponèmes de Goull... (malade 69) que nous observâämes une seule petite étoile en 4 h. 45. Cette malade offrait des plaques, hypertrophiques vulvaires, dont le début remontait à trois semaines; elle avait reçu, la semaine précédente, deux injections intraveineuses de cyanure de mercure.

Trois jours auparavant, cette même malade 69 avait déjà vu ses tréponèmes s'agglutiner fortement dans son propre sérum; et celui-ci, à plusieurs reprises, s'était toujours montré très agglutinant pour des tréponèmes d'autre origine (tableau A, p. 178, n° 46).

e) Une fois encore, les tréponèmes de Mang... (malade n° 63) agglutinèrent très faiblement dans le sérum de Lef...; il se produisit de rares petites étoiles en 4 h. 10.

Cette malade 63 portait depuis deux mois des plaques hypertrophiques vulvaires ; ses tréponèmes agglutinèrent ce même jour, très fortement, en 4 h.5, dans son propre sérum et, à d’autres essais, le sérum de cette malade fut trouvé très agglutinant vis-à-vis des tréponèmes prélevés sur d’autres sujets.

f) Enfin, ce sérum nous a donné, une dernière fois, l'occasion d'observer des agglutinats. Il s'agissait, ce jour-là, des tréponèmes de Sil..., malade 807.

Celle-ci n'avait qu'une seule plaque hypertrophique, sur une grande lèvre, qui datait de quinze jours, elle n’avait reçu aucun traitement.

Les préparations furent faites à 3 h. 55. Dix minutes après, les tréponèmes étaient très nombreux, mobiles et isolés. Mais à 5 heures on pouvait voir de nombreuses petites étoiles libres; à 6 h. 40, elles étaient devenues très rares, au point que, dans une lame, nous n’en pûmes retrouver qu’une seule.

Par ailleurs, les tréponèmes de cette malade, en face d'un sérum syphilitique, s'étaient agglutinés déjà nettement en quarante minutes, ce même jour, et de facon intense en 2 h. 40.

90 Trill..., eczéma des avant-bras (malade 214; tableau C, p. 200, n° 13).

Cette femme présente, une seule fois, entre à essais à jours différents, une agglutination nette avec les tréponèmes de la malade Jac..., n° 61. La syphilis de cette dernière est très active, elle consiste en syphilides papuleuses vulvaires, en syphilides séborrhéiques sur le tronc, en iritis; le tout remonte àun mois; elle vient de recevoir quatre injections de cyanure de mercure.

Sur l’une des quatre préparations, faites simultanément, nous voyons une petite étoile en 4 h. 50; sur une seconde, deux agglutinats en deux heures.

Ces derniers se rencontrent en un point de la préparation où des hématies sont accumulées. |

Mis en présence de sérums syphilitiques, les tréponèmes de cette malade 61 montrèrent une tendance plus marquée et plus rapide à l’agglutination. Fait intéressant : ils se sont agglutinés à une deuxième reprise dans le sérum d’un autre sujet non syphilitique (voir l'observation suivante). Quant à son sérum, il fut toujours très agglutinant pour les tréponèmes d’autres malades (tableau A, p. 186, n° 18).

3° Chat... malade 215 (tableau C, p. 202, n° 14), présente de la vaginite et de l'urétrite blennorragiques.

a) Dans une préparation faite avec son sérum et les tréponèmes de la même malade que précédemment (Jac…, malade 61), nous observons, 1 h. 20 après le contact, une seule étoile parmi des tréponèmes innombrables et isolés. Mais, en 2 h. 40, les agglutinats sont devenus plus nombreux et surtout plus volumineux; à ce même moment, on assiste à la formation, dans une des lames, de petites étoiles éphémères. A côté de celles-ci, des étoiles permaz nentes apparaissent, deviennent nombreuses quand on examine la lame une heure plus tard; on les retrouve en voie de dégénérescence, le lendemain.

b) Cette même malade 215, non syphilitique, a été, une deuxième fois;

l'occasion d’observer des agglutinats. C'était avec les tréponèmes de Rich..4 malade 38, atteinte, depuis quinze jours, de plaques vulvaires confluentes. . Les tréponèmes étaient extrêmement nombreux dans les préparations ; ilse fit une agglutination d'abord assez forte en 4 h. 35; puis, un certain nombre des étoiles disparurent, une seule put encore être observée après huit heures de contact.

Les autres lames de la série examinée le même jour, montées en sérums syphilitiques, eurent une agglutination beaucoup plus rapide et surtout plus intense. :

Nous avons déjà vu (p. 97, 3°) que les tréponèmes de cette malade 38 s'étaient, le lendemain, spontanément agglutinés dans une solution de NaCl physiologique. |

4° Mich..., malade 209, lupus de la jambe (tableau C, p. 200, n° 2).

Le fournisseur de tréponèmes fut, dans ce cas, Lev..., malade 13 (plaques hypertrophiques vulvaires, syphilis de trois mois, 9 piqûres d'huile grise et 3 de cyanure récentes).

Les tréponèmes étaient très nombreux dans les préparations ; et, en 2 h. 45, nous vimes d'assez nombreux agglutinats mobiles, là seulement où les hématies étaient abondantes.

Dans la même série, le même jour, des sérums syphilitiques agglutinent les tréponèmes de cette malade 13, déjà fortement en moins d’une heure pour les uns, de deux heures pour d’autres, c'est-à-dire d’une façon beaucoup plus intense. Le propre sérum de cette femme agglutinait fortement ses tréponèmes en 55 minutes.

3° Gom..., paralysie infantile, malade 220 (tableau C, p. 202, n° 49).

Une seule fois, parmi cinq essais différents et malgré le nombre toujours extrèmement élevé de tréponèmes dans les préparations, nous avons observé, en 1 h. 33, quelques petites étoiles, en un endroit d’une préparation où les

hématies étaient tassées les unes contre les autres; partout ailleurs ils demeurèrent isolés. Revue 2 h. 30 après le contact, au même endroit repéré, cette lame ne présentait plus qu'un seul amas de tréponèmes, dont il était difficile d'affirmer s’il s'agissait d'un agglomérat ou d'un véritable agglutinat.

Les tréponèmes provenaient, dans ce cas, comme les jours précédents, de Jam... malade 77, dont les plaques hypertrophiques vulvaires remontaient à. un mois et qui n’avait encore recu aucun traitement.

Les autres lames de cette série, en sérums syphilitiques, présentaient une agglutination beaucoup plus marquée et rapide.

$ 4. —Sérumschauffés. — Nous nedirons rien de ce petitgroupe de recherches. Cinq fois, des sérums de sujets non syphilitiques ont été portés à 56-58°, pendant une demi-heure. Ils se sont exactement comportés, vis-à-vis des tréponèmes, comme les mêmes sérums non chauffés et gardés comme témoins : il n’y eut pas agglutination.

$ 5. — Conclusions. — Ainsi, 150 essais ont été faits avec le sérum de sujets indemnes de syphilis. Presque tous ont été des plus favorables à l’observation : les tréponèmes de ces préparations étaient le plus souvent extrêmement abondants. |

Le sérum non syphilitique constitue un milieu où les tréponèmes conservent le mieux leurs caractères ; la durée de leur vie y atteint son maxi- -mum, en général plus de huit heures et souvent jusqu'à vingt-quatre heures.

Sur ce nombre déjà élevé d'examens, nous avons onze fois observé des agglutinations.

Celles-ci apparaissent en général 1 heure à 4 h. 45 après le contact, mais le plus grand nombre d’entre elles ne persistent pas; nous avons, à maintes reprises, constaté l'existence de ces étoiles éphémères.

La critique de ces dernières observations, rapportées en détail, sera faite au moment où nous réunirons tous les faits analogues pour décrire et interpréter le phénomène de l’auto-agglutination (chapitre VIIT):