RÉACTIFS LIQUIDES

Pour monter les pièces à couper sur le chariot qui les porte, on commence par faire durcir dans l'alcool la portion à examiner. L'alcool est le liquide durcissant qui conserve le mieux les bactéries, bien qu'il les contracte et diminue leur volume. Les fragments de tissu doivent être coupés régulièrement suivant des faces planes et parallèles et être durcis dans une quantité d'alcool d'environ 80 fois leur volume. 11 importe, pour que le durcissement se fasse bien, de prendre des tissus aussi frais que possible, recueillis avec des inslrunienls stérilisés. Le fragment durci est collé à l'aide d'une légère couche de gomme ou de gélatine (1) sur un bouchon de liège taillé en hexaèdre ou sur un morceau de bois. La pièce, unie ainsi au bouchon ou au bois, est mise dans un flacon d'alcool à large goulot bouché à l'émeri. Quelques heures après, l'alcool a solidifié la gomme, et la pièce l'ait corps avec son support. Ce dernier est placé dans la pince qui surmonte le chariot du microtome et solidement fixé avec une vis. On monte la lame du microtome, on la mouille avec de l'alcool ainsi que la surface de la pièce à couper, et on la fait ghsser de manière à égaliser la surface de la pièce. Une vis micrométrique permet de faire avancer régulièrement le chariot de façon à obtenir, si la lame coupe bien, des coupes de 10 y. d'épaisseur. Ces dernières sont recueilhes dans l'alcool.

Pour examiner à l'état frais certains organes, le foie, les reins, le cœur, les poumons, on peut y faire immédiatement des coupes minces à l'aide d'un couteau à double lame.

Le microtorae à glace de Jung se compose d'un plateau métallique qu'on refroidit en pulvérisant de l'éther à sa partie inférieure. La pièce à examiner est placée sur la plaque métallique et se congèle en s'y fixant. On peut alors y pratiquer des coupes minces avec le rasoir.

Verick fabrique maintenant des microtomes Rivet en acier, qui possèdent les mêmes avantages que ceux de Thoma.

Le microtome de Roy présente une vis micromélrique qui monte à l'aide d'une roue dentée mise en mouvement par une manette. Il a été très avantageusement modifié par Malassez et Vérick, de telle sorte qu'en renversant l'appareil, on peut faire les coupes dans une cuve contenant de l'eau alcoolisée. Les préparations se font par un mouvement automatique de l'opérateur, sans qu il soit nécessaire de mouiller la pièce ou la lame du rasoir. On transforme facilement cet appareil en microtome à glace (2).

RÉACTIFS LIQUIDES. — Les pi'incipaux réactifs dont on se sert constamment dans la préparation des bactéries sont :

(I) On fait cette gélatine en dissolvant do la gélatine h cliaud dans deux parties d'eau, puis on ajoute deux parties de glycérine.

("2) Malassez, Microtorae perfectionné do Roy (Archives de physiologie, 15 onvcrabre I884).

CORNIL ET BABES. — 2' éd. 3

TECHNIQUE HISTOLOGIQUE

i " L'eau distillée, qu'il est très difficile de conserver pure de toute souillure bactérienne. Nous filtrons d'abord et faisons bouillir l'eau distillée, puis nous la mettons dans un flacon de 2 litres, bouché à son col par un bouchon de caoutchouc. Ce bouchon est pei'cé d'un trou à travers lequel passe un tube de verre recourbé en bas et rempli de ouate. La partie inférieure du flacon s'ouvre par un robinet en verre. Bien que le flacon ne soit jamais ouvert par le haut que pour le remplir, il contient souvent des bactéries fertiles ou non. Mais on peut les négliger, car, dans les opérations successives qu'on fait subir aux préparations, on ne les met dans l'eau distillée qu'après qu'elles ont subi l'action des couleurs d'aniline. Dans les coupes qu'on sort du bain colorant pour les laver dans l'eau distillée, les bactéries sont déjà colorées. L'opération du lavage est rapide, et si des bactéries de l'eau restaient par hasard sur la préparation, elles seraient incolores et par conséquent invisibles au microscope dans les préparations conservées dans le baume ;

2° Des acides, l'acide nitrique, l'acide acétique, l'acide chlorhydrique, l'acide sulfureux, etc. ;

3° Des bases, la potasse caustique, l'ammoniaque, le carbonate de soude et de potasse, l'acétate de potasse ;

4° L'huile d'aniline employée à faire l'eau d'aniline d'Ehrlich. La toluidine utilisée dans le même but (Bàbes);

5° L'alcool et en particulier l'alcool absolu, qui sert à décolorer et à déshydrater les préparations colorées par l'aniline;

6° L'essence de girofle, les essences de bergamote, d'origanum, de térébenthine employées à déshydrater les préparations ;

7" Le xylol, l'essence de cèdre;

8° Le baume du Canada qui sert à enfermer les préparations (1).

L'alcool absolu et l'essence de girofle sont d'un emploi constant ; nous les conservons dans des flacons compte-gouttes qu'on doit toujours avoir sous la main quand on monte les pièces.

Enfin toute la série des matières colorantes (Voy. plus bas).

RÉCOLTE DES LIQUIDES A EXAMINER. — Il faut toujours être muni, surtout lorsqu'on va chercher des liquides dans une salle d'hôpital pour les transporter ensuite au laboratoire, de pipettes propres à les recueillir. Pour préparer ces pipettes, on prend un tube de verre de 5 à 10 millimètres de diamètre; on le divise en morceaux de 20 centimètres de longueur; on chauffe au chalumeau la partie moyenne d'un de ces segments; on l'étiré en l'effilant et on a ainsi deux pipettes terminées par une extrémité capil-

(1) Il est avantageux de so servir do baume de Canada pur renferme et conservé dans des tubes métalliques analogues h. ceux où l'on garde les couleurs à l'huile.