ISOLEMENT ET CULTURE DU BACILLE DE NICOLÂÏER

Chantemesse et Widal ont îsolé le long bacille mince, bacille de Nicolaïer, qui existait dans les plaies de leurs animaux tétaniques. Un tube de sérum liquide était inoculé avec dé Texsudat d une plaie de tétanique. Un grand nombre de cristallisoirs à fond plat, stérilisés, recevaient du sérum que Ton faisait coaguler en les plaçant sur des plaques de cuivre chauffées. Ceci fait, un fil de platine était trempé dans le tube de sérum liquide qui venait de recevoir du virus tétanique, et avec ce fil de platine on traçait des stries sur la première plaque de sérum. Aussitôt après deux gouttes du premier tube de sérum étaient transportées dans un autre tube de sérum liquide, mélangées à toute la masse, et de nouveau un fil de platine était plongé dans ce second sérum liquide pour tracer des stries sur des plaques de sérum solidifié dans les cristallisoirs.

En opérant ainsi successivement par une méthode de dilution sur un grand nombre de tubes, Chantemesse et Widal sont arrivés à n'avoir dans les derniers tubes, et par conséquent sur les dernières plaques de sérum, qu'un très petit nombre de germes.

Aussitôt ensemencées, ces plaques étaient mises sous une cloche appuyée sur un plateau de verre. Les bords de la cloche et le plateau étaient usés à Témeri et tapissés d'une mince couche de suif de chandelle. La cloche renfermant les plaques de sérum et un vase plein de pyrogallate de potasse, était mise en communication avec une trompe d*Alvergnat qui faisait le vide, les dernières traces d'oxygène étant absorbées par le pyrogallate de potasse.

La cloche étant mise à Tétuve, il se développait sur les plaques de sérum différents microbes. On trouvait en abondance de^ colonies blanches et sèches formées de microcoques ; on voyait aussi des points ou même des traînées d'un blanc jaunâtre, d'apparence muqueuse, autour desquelles le sérum n'était pas liquéfié tout d'abord mais rendu clair, transparent, citrin. Cette transparence attirait facilement l'attention au milieu d'une plaque de sérum coagulée et opaque. La colonie blanc jaunâtre que l'on trouve au centre des zones translucides est formée d'après ces auteurs par une culture pure des bacilles de Nicolaïer. Les jours qui suivent, le sérum se liquéfie lentement. Une goutte de la partie liquéfiée montre une culture pure de bacilles de Nicolaïer. Ils sont longs.

minces, animés de mouvements lents qui ressemblent beaucoup aux mouvements du vibrion septique. Leur longueur est inégale. Beaucoup d'entre eux portent à une de leurs extrémités une petite sphère réfringente dont le diamètre est plus grand que celui du bâtonnet. Parfois ces bacilles sont rangés parallèlement, les uns à côté des autres, de telle sorte que Timage aperçue au microscope rappelle un peu la forme des spermatozoïdes. Ces bacilles prennent mal la matière colorante et se décolorent facilement. Une fois colorés, on voit que la teinte est uniforme dans le corps du bâtonnet, mais les sphères terminales sont, les unes, les petites, entièrement colorées, tandis que les plus grosses offrent une partie centrale claire dont la circonférence . \* est colorée.

\ ^^ Chantemesse et Widal ont reconnu que

\ / / '/? ^^^ sphères étaient bien des spores puis- ^f j '/ qu'elles résistent à Fébullition à 100 degrés

^ / pendant plusieurs secondes. Ces auteurs ont

^.^^^ ^ inoculé à Tétat de pureté les bacilles de Nico-

^s\ laïer à des animaux, soit avec des cultures

faites et conservées dans le vide, soit avec Fia. 215. - Microbes du j^s cultuTos au coutact de 1 air. Ils ont tou-

tétanos cl après des cultures de chantcmesao jouTs échoué dans IcuTS tcutatives pour reproduire le tétanos avec des cultures pures ' bapuetW de tambour; du bacillc dc -Sicolaicr. Cette culture ne

3, l.àtonnetB en série; .

4. bàionni-tibciit àhout; répaud aucunc mauvaise odeur, tandis que

5, bâtonnet» bout à bout. , , . i • , . • i

les plaies des animaux tétaniques exhalent une odeur infecte; ils ont pensé que le virus tétanique ne produisait peut-être ses effets qu'en présence d'autres microbes qui préparent un terrain de culture locale. Ils ont donc inoculé le bacille de Nicolaïer à Tétat de pureté môle à la culture du petit microcoque qu'ils avaient trouvé dans les plaques de sérum, ou bien mêlé à d'autres cultures de microbes. Ils ont aussi, préalablement à l'inoculation, fait des lésions locales, soit par le traumatisme, soit par l'injection d'acide lactique, de potasse, d'iodure de potassium, etc. Les résultats ont toujours été négatifs.

Ce fait que la culture pure du bacille de Nicolaïer ne donne pas le tétanos pourrait faire penser que ce microbe n'est pas l'agent pathogène de la maladie; mais Chantemesse et Widal

ORIGINE ÉQUmE OU TELLURIQUE DU TÉTANOS. 973

pensent qu'une affirmation pareille ne peut pas non plus être donnée.

D'une part, en effet, on trouve toujours ce bacille dans les plaies de Thomme ou des animaux morts du tétanos ; d'autre part, il peut s'agir d'une diminution rapide de la virulence qui ne se conserve intacte que dans certaines conditions qui nous sont encore inconnues. C'est pour cela sans doute qu'il est impossible de transporter en séries ininterrompues le virus tétanique d'un animal sur un autre. Il en est de même pour l'espèce humaine. On a vu des épidémies de tétanos qui frappent plusieurs personnes en quelques jours, mais elles ne se continuent jamais.

Une expérience de Chantemesse et Widal donne la preuve de cette diminution rapide de la virulence du tétanos sous l'influence de l'air, de la lumière et de la chaleur. La terre qu'ils prenaient dans la rainure du plancher donnait toujours le tétanos quand on l'inoculait aussitôt après l'avoir prise. Il leur suffisait de pulvériser ce fragment de terre sur une feuille de papier et de le laisser pendant vingt-quatre heures dans l'atmosphère du laboratoire pour qu'il ne donnât plus le tétanos.

L'étiologie du tétanos a fourni récemment la matière d'une intéressante discussion à l'Académie de médecine. Verneuil*, à la suite d'une laborieuse enquête et d'un nombre considérable de faits, a mis en avant l'origine équine du tétanos. D'après Yerneuil, le tétanos, transmissible entre animaux de même espèce ou d'espèces différentes, de l'homme à l'homme ou de l'homme aux animaux et réciproquement, se transporte du cheval tétanique àl'homme blessé, soit directement soit indirectement par des objets iétanifères souillés par le cheval. Tout en admettant que la terre est souvent l'origine du tétanos, Verneuil soutenait qu'elle doit sa virulence à sa souillure par le cheval tétanique, et que dans cette double virulence du cheval et de la terre, la priorité appartient au cheval.

Ces conclusions ont été combattues par les vétérinaires membres de l'Académie, par Leblanc qui ne croit pas à la contagion du tétanos par les animaux, par Goubaux et Nocard. Ce dernier, sans nier la possibilité de la contagion de blessés placés en contact plus ou moins direct avec des chevaux tétaniques, pense

1. Bulletin de l'Académie des êciencesy t. XXI, pp. 287, 280; 337, 381 et 402, 1889

que, dans la plupart des faits invoqués par Verneuil, la contagion par le cheval n'est pas prouvée, car les chevaux incriminés n'avaient pas le tétanos et n'avaient eu aucun contact avec des chevaux tétaniques. Nocard s'en tient à l'action tétanique de la terre cultivée, et si son mélange avec le fumier peut être l'origine du microbe tétanique, le fumier du bœuf et du mouton devrait être incriminé au même titre que celui du cheval. On n'a d'ailleurs jamais encore mis en évidence les microbes du tétanos dans les matières intestinales de ces animaux, et rien ne prouve qu'il y vive. Aussi Nocard regarde-t-il comme hypothétique l'origine équine du tétanos.

Dans cette même discussion, Trasbot (/oc. cit., p. 636) a rapporté les expériences faites avec du pus de plaies de chevaux ayant succombé au tétanos et avec lequel on a pu quelquefois, non toujours, donner le tétanos à des animaux. Son inoculation est plus difficile à réaliser sur le cheval que sur le lapin, ce qui, on le comprend, n'est pas en faveur de l'origine équine de la maladie. Trasbot a vu en effet que le tétanos transmis expérimentalement au cheval est épuisé après un seul, deux ou trois passages. Dans la plupart des expériences tentées., on n'a même pas obtenu un second passage. 11 faut en conclure que l'organisme du cheval ne constitue pas un terrain de puUulation bien favorable au tétanos. Trasbot a essayé lui-même sans succès d'inoculer des chevaux avec le pus de plaies suivies de tétanos. Depuis â6 ans, il n'y a pas eu un seul cas de tétanos observé à l'école vétérinaire d'Alfort parmi les serviteurs et les élèves qui soignent les chevaux.

Ce qu'il y a de plus certain dans Fétiologie du tétanos, c'est la contamination des plaies par des fragments de terre en contact avec elles, soit directement, comme lorsque la plaie a traîné sur le sol, soit indirectement lorsqu'elle a été contaminée par des linges ou vêtements souillés eux-mêmes par du terreau. Le cheval qui couche dans sa litière ou dans une prairie porte sur la peau, dans son sabot, sur sa ferrure, de la terre, et on peut expliquer ainsi qu'il est tétanifère puisque ses poils sont souvent couverts de boue, puisque ses pieds en ont toujours. Une plaie cutanée produite chez un homme par un coup de pied de cheval pourra donc être suivie du tétanos, comme une plaie dans laquelle restera une écharde de bois ayant traîné d'abord sur le sol. En y réfléchissant.

ÈTIOLOGIE DU TÉTANOS DE l'hOMME. 575

on voit combien sont multiples les occasions de contamination par la terre : les mains des cultivateurs, jardiniers, garçons d'écurie, palefreniers, cavaliers, en sont tachées une partie du jour et constamment, s'ils n'ont pas des soins absolus de propreté. Un blessé ou les premières personnes qui touchentune plaie peuvent doncy porter des fragments de terre . On comprend même à la rigueur qu'une plaie par arme à feu puisse donner le tétanos quand le projectile a traversé des objets de vêtement souillés eux-mêmes par la terre, comme cela arrive toujours aux soldats en campagne qui couchent sur le sol, et qui ont de la boue à leurs vêtements. Dans les pays chauds, où l'on a attribué au froid de la nuit le tétanos observé chez des personnes qui passent la nuit en plein air, chez les enfants surtout, il est probable que le décubitus sur la terre et la contamination par elle ont plus d'action que le froid et l'humidité.

Parvenus à la fin de cet important chapitre des maladies consécutives aux plaies, nous pouvons jeter un coup d'œil en arrière et nous assurer qu'il a été fait de grands progrès dans l'étude de leur étiologieet de leur anatomie pathologique. Après les premières découvertes de Pasteur, Koch, par son travail sur les maladies expérimentales et par ses méthodes nouvelles, nous a donné la clef de cette étiologie. Fehleisen, Rosenbach, Passet, etc., ont réussi à isoler, d'après les procédés de Koch, certaines espèces des micro-organismes pathogènes, qu'on rencontre dans l'érysipèle, la pyémie et la septicémie. Mais il ne faut pas croire que tout soit dit sur la question. Le travail de Rosenbach, bien qu'il ait marqué un progrès important et qu'il ait spécifié plusieurs espèces de bactéries pathogènes, n'était pas complet. La méthode employée par cet auteur pour isoler les microbes de la septicémie et de la pyémie n'était pas absolument irréprochable.

Les lésions produites par les micro-organismes isolés par Rosenbach n'étaient pas non plus bien décrites au point de vue histologique. On a en effet continué les recherches relatives aux maladies consécutives aux plaies, on a isolé par les meilleures méthodes les micro-organismes qui les causent, étudié le mode d'introduction de ces microbes, leurs propriétés chimiques, les conditions de leur croissance et de leur disposition, aussi bien que les lésions histologiques qui en sont le résultat.

Une autre question qui se pose, c'est la connaissance exacte

des substances chimiques dont la présence est constante dans les septicémies. Il s'agit de savoir quelle est leur action et si leur genèse est liée constamment au développement et aux phénomènes de nutrition des bactéries. Nous avons vu qu'on anîve par la recherche méthodique des bactéries, dans les septicémies, à pouvoir constater dans l'intérieur de l'organisme différentes bactéries ordinairement saprogènes et inoffensives, mais qui peuvent devenir virulentes. On y trouve aussi des bactéries qui n'appartiennent pas en propre aux microbes pyogènes, mais qui ressemblent à ceux des septicémies expérimentales de Koch.

Nous avons vu qu'on a souvent affaire à une association de bactéries qui se compliquent les unes par les autres dans les maladies consécutives aux plaies. Ces associations bactériennes nous rendent compte de la variabilité des symptômes et du pronostic de ces maladies. Nous croyons qu'elles pourront à un moment donné servir à fonder une thérapeutique rationnelle.

Nous nous soôimes efforcés d'étudier, dans ce chapitre, les lésions histologiques de ces diverses maladies et de déterminer leur relation avec la présence des micro-organismes dans les divers organes affectés. Nous croyons avoir montré que le siège, la nature et la distribution des lésions pathologiques sont en rapport avec les bactéries et que celles-ci sont bien réellement la cause de celles-là. »Nous avons pris comme exemple et étudié surtout dans ce but les altérations du rein consécutives aux maladies infectieuses et en particulier aux maladies déterminées par les plaies.