COLORATION, NUMÉRATION ET CULTURE DES BACTÉRIES DE L*EAU

nus dans de petites éprouveltes mesurant environ 20 centimètres, bouchées à la ouate, préalablement stérilisées et fermées par un dernier bouchon de caoutchouc légèrement flambé.

L'analyse doit commencer aussitôt que possible après la cueillette de l'eau; si elle ne peut se faire le jour même, on entourera les éprouvettes de glace pour éviter que certaines bactéries n'augmentent de nombre.

Cette cause d'erreur a été bien mise en lumière par le travail de Meade Bolton; il a montré qu'à 22°, certains microbes contenus dans l'eau subissaient une multiplication évidente.

Dans l'échantillon d'eau bien agitée, on prend, à l'aide d'une pipette graduée et stérilisée, quelques centimètres cubes pour la culture et pour l'examen microscopique direct.

Ce dernier procédé se compose de deux temps :

1® Examen microscopique simple des bactéries dans Veau, — On examine une goutte d'eau recouverte de la lamelle avec un objectif sec pour éviter les oscillations qu'un objectif à immersion homogène imprimerait à la goutte d'eau. On doit avoir aussi un oculaire muni d'un micromètre; on fait varier la lumière soit à l'aide des diaphragmes, soit par la simple rotation du miroir. Dans la surface sombre de la préparation, les bactéries interceptent la lumière et se dessinent soit immobiles, soit douées de mouvements rapides. On peut ainsi reconnaître leur présence, leurs mouvements, soupçonner leur nombre; mais ce procédé ne permet pas de pénétrer bien loin dans ranalyse bactériologique.

2« Coloration et numération des bactéries sur des lamelles. — On fait tomber de la pipette une ou plusieurs gouttes sur des lamelles qu'on soumet ensuite à une dessiccation rapide dans Tétuve. Une fois desséchées, on les passe, lentement, trois fois dans la flamme d'une lampe à l'alcool et on les colore de diverses manières, suivant les méthodes connues.

La coloration des lamelles a beau être faite avec soin, on se heurte souvent à des difficultés d'examen que nous allons signaler. Ces difficultés tiennent aux éléments inorganiques de l'eau qui restent après l'évaporation. Les gros cristaux sont facilement reconnus, mais les petites rayures formées par le chauffage, les petits corps sur lesquels s'attache la matière colorante peuvent en imposer pour des bactéries ou du moins inspirer des doutes à l'observateur. En vain on essaye de faire agir sur la préparation desséchée divers agents chimiques pour enlever ou l'acide silicique ou les carbonates et sulfates; il faut dire qu'on réussit difficilement à atteindre le but désiré.

Il est bien entendu, d'autre part, qu'on doit se servir d'une solution de matière colorante fraîchement préparée, totalement exempte de bactéries.

La préparation colorée sert à l'examen et à la numération des microbes. Si l'on a employé une goutte d'eau pour la préparation, la pipette graduée nous indique combien de gouttes d'eau sont contenues dans un centimètre cube, et la numération des bactéries que renferme cette goutte nous permettra de conclure au nombre total des microbes dans un centimètre cube.

Si l'eau contient peu de bactéries, on peut déterminer leur nombre en comptant ceux qui existent, dans la préparation tout entière, mais si ce nombre est très considérable, il faut calculer pour toute la surface sur la

CORNIL ET BABES. — S*' ÉD. 14

210 LKS MICROBES DE l'aIR, DE l'eAU ET DU SOL.

moyenne trouvée pour plusieurs parties semblables. Il est alors préférable de se servir d'un porte-objet pourvu de divisions en carré comme pour los numérations de globules de sang, où la grandeur du cbamp de vision est déterminée. On compte le nombre des bactéries contenues dans plusieui^ divisions de la plaque; on prend la moyenne, soit 50. On sait, d'autre pari, que la goutte d'eau s'est étalée sur une surface de 5 millimètres carrés. Si on calcule combien de fois le chiflTre mesuré par le champ du microscope est contenu dans les 5 millimètres carrés, il suffira de multiplier ce quotient par 50 pour avoir le nombre total des bactéries contenues dans une goutte d'eau.

Il est évident que cette méthode de numération n'a pas de grandes prétentions à l'exactitude. Les causes d'erreurs sont nombreuses et, dans les calculs, les erreurs se multiplient énormément.

Si l'eau contient très peu de bactéries, les inconvénients ne cessent pas d'exister. Car, si l'on ne compte par exemple que cent bactéries dans un centimètre cube, comme dans l'eau des réservoirs de la Vanne, il faudra, étant donné le faible diamètre du champ de vision du microbe, multiplier les changements de position de la préparation pour apercevoir une seule bactérie. Avec un objectif à immersion homogène et un fort oculaire, il sera nécessaire de varier trois ou quatre cents fois le champ visuel pour observer un microbe.

Malgré ces inconvénients, on ne peut se passer de praticpier cet examen tel que nous l'avons dit, parce que seul il nous renseigne sur le nombre approximatif de bactéries contenues dans un échantillon d'eau, sur les microbes vivants et les microbes morts et sur les organismes anaérobiesou autres comme le crenothrie qui ne se cultivent pas dans les milieux artificiels que nous possédons.

3® Cultures. — La forme seule ne permettant pas de déterminer la nature d'un microbe, il faut en venir aux procédés de culture. On utihse ici la méthoile de culture sur j^laques ou mieux dans les cristallisoii-s plats de Babes et l*elri.

Les plaques de gélatine ensemencées avec l'eau à examiner*, conservées à l'étuve dans la chambre humide, ne tardent pas à se couvrir de colonies de diverses espèces. On les examine attentivement à l'œil nu et à la loupe. Elles fluidifient ou ne fluidifient pas la gélatine. L'observation de toutes ces colonies, avec un faible grossissement, 100 diamètres, par exemple, permet de noter les différences de structure, de développement des colonies. Celles

1. Arloing [Revue d'hygiène, 20 juin i8S8) a imaginé un appareil propre à disperser régulièrement sur la plaque de gélatine tous les microbes contenus dans un volume d'eau connu. La gélatine nutritive est étalée sur une plaque de verre quadrillé enfermée dans une boite fermée à sa partie supérieure par deux vantaux de verre. Au milieu de la réunion de ces deux lames de verre, il existe une ouvertare pour laisser passer f extrémité effilée de la pipette qui contient feau à examiner. Cette pipette est tenue verticalement par une tige métallique. La plaque de gélatine se meut suivant sa largeur et sa longueur au moyen de deux vis placées en dehors de Tapparcil. Pour l'ensemencer, on laisse couler goutte à goutte le liquide contenu dans la pipette en même temps qu'on déplace la lame de gélatine, de telle sorte qu'une goutte de feau tombe sur chaque carré du quadrillage.

BACTÉRIES DE i/eAU. 211

qwï paraissent otro de mémo espèce sont examinées au microscope au moyen de préparations colorées; toutes enfin sont prises successivement en cultures pures dans des tubes.

On se servira îiussi de plaques d'agar-agar dont on examinera les colonies au microscope.

Bien que cette méthode, due à M. Koch, soit ta meilleure, on y relève plusieurs défauts dont il importe de prévenir le lecteur:

1® Il y a des bactéries contenues dans Teau d'analyse, dont on ne soupeonnera môme pas la présence, parce qu'elles ne croissent pas dans la gélatine nourricière ou qu'elles ne peuvent y germer qu'au delà des limites de température dans lesquelles la gélatine reste ferme.

2« Les bactéries qui demandent un temps assez long pour se développer sur les plaques n'ont pas le temps d'apparaître parce qu'elles sont détruites ou masquées par les bactéries qui croissent rapidement.

C'est le grand défaut qui s'oppose à la recherche de certains microbes dans les eaux potables renfermant beaucoup de bactéries. En trente-six% ou quarante-huit heures, les germes qui tluidi fient la gélatine ont liquéfié la plaque et empêché toute reconnaissance d'une colonie pathogène. Ce défaut de la technique a empêché pendant bien longtemps de trouver dans Teau potable le microbe de la fièvre typhoïde. En introduisant dans la lechnique l'emploi de l'acide phénique qui s'oppose avec efficacité h la U nidification de la gélatine, et qui, d'autre part, ne gêne pas l'évolution des colonies typhiques, MM. Chantemesse et Widal ont rendu leur recherche beaucoup plus facile. Leur procédé consiste à verser préalablement dans les tubes où l'on fera les ensemencements d'eau, 4 ou 3 gouttes d'une solution à 1/20 d'acide phénique.

3* Il est des bactéries qui ne croissent pas du tout dans la gélatine choisie, parce qu'elle est trop alcaline ou trop acide, etc.

4*» ï-es anaérobies obligatoires doivent être étudiés avec la technique particulière des cultures sans air.

o° Sur les plaques de gélatine, il y a des bactéries qui croissent et qui ne proviennent pas de l'eau à examiner; elles sont, en général, dues à l'air ambiant, et il est facile d'obvier à cet inconvénient en se servant des cristallisoirs plats.

6° Si l'eau contient trop de bactéries, on peut l'étendre avec «le l'eau tlistillée exempte de germes. Ce procédé expose à des erreurs assez grandes, car on n'a pas la preuve que les microbes soient uniformément répandus ilans la masse et qu'une partie du mélange puisse servir à établir une moyenne exacte. Il faut, dans ce cas, faire un très grand nombre d'essais «le contrôle. Pour éviter cette erreur, on ensemence à Bucarest trois tubes «lo 'gélatine, le premier en y mêlant un centimètre cube de l'eau à examiii#»r, le second C,o et le troisième 0®«,2o.

En raison des différentes causes d'erreurs que nous avons signalées et «l'aiitres encore qui tiennent peut-être à l'inégale répartition des bactéries «lans les sources, on ne peut donner des résultats définitifs sur le caractère liactériologique entier des sources avant d'avoir obtenu des chiffres constants par la répétition de nombreux essais.

212 LES MICROBES DE L^AIR, DE l'eAU ET DU SOL.

L'examen bactériologique d'une eau ne doit pas aboutir seulement à la constatation d'un nombre plus ou moins grand de bactéries; le point de vue qui entre en considération est celui-ci: les bactéries trouvées sont-elles regardées comme engendrant des maladies? et, dans le cas contraire, quelle est l'espèce d'inlluence que nous devons en attendre?

Nous savons que les microbes du choléra (Koch), le vibrion seplique (Pasteur), le microbe de la septicémie des lapins (Gaffky), des microbes septiques capsulés (Babes), etc., et celui de la fièvre typhoïde ont été trouvés dans l'eau potable; la connaissance des caractères de la plupart de ces bactéries est assez avancée pour qu'on doive toujours, avec une technique suffisante, reconnaître leur présence quand elle existe.

Pour les autres microbes non pathogènes, appelés saprophytes, les effets de leur activité vitale consistent dans la création de combinaisons inorganiques et organiques.

Schlœsinget Milntzont démontré que les procédés de nitrificafion dans le sol, et que les oxydations des composés du carbone étaient dus à des microbes. Cohn a fait voir qu'à la même cause appartenait la réduction des sulfates en hydrogène sulfuré et en soufre, ainsi que celle des nitrates en nitrite, ammoniaque et azote gazeux.

Malgré la puissance de développement et les effets chimiques que produisent les bactéries saprophytes, l'expérience nous enseigne qu'elles n'exercent pas beaucoup d'intluence sur la santé humaine. L'eau que nous buvons tous les jours en contient une quantité considérable. Mais parmi ces organismes, combien nous sont encore inconnus et mériteraient peutêtre d'être classés au nombre des microbes pathogènes?

Plagge et Proskauer (Zeiischr. f. Hygiène, IL 3, 1887J pensent, qu'une eau peut être regardée comme bonne, si elle ne contient pas plus de 50 à 150 germes dans 1 centimètre cube. L'eau des couches profondes du sol est toujours dans cette condition, tandis qu'à la surface des puits ouverts, l'eau renferme des impuretés provenant de l'air; aussi est-il préférable de se servir de pompes qui puisent l'eau par des tuyaux plutôt que d'employer des puits ouverts à l'extérieur. En face de l'examen bactériologique, l'examen chimique est de moindre valeur; si l'eau se trouve à la limite de son contenu permis en bactéries, c'est-à-dire si elle renferme à peu près 300 germes par centimètre cube, il faut tenir compte de sa constitution chimique. Ce sont surtout les chlorures, l'acide nitreux et l'ammoniaque qui constituent une contre-indication pour son usage.

Plagge et Proskauer, ainsi que Koch, proclament la nécessité, pour une grande ville, de faire analyser régulièrement tous les mois l'eau de boisson (eau de sources ou eaux filtrées fournies par la ville) et l'eau des rivières ou fleuves qui la traversent. Au point de vue physique, chimique et bactériologique des eaux do la ville de Fîucarest, l'un de nous a vu qu'à un moment donné les filtres avaient cessé de fonctionner et que certaines eaux, renommées pour leur pureté, contenaient des masses de bactéries. L'eau de la rivière de Dumbovitza qui renferme 2 000 bactéries par centimètre cube à son entrée dans la ville, en contient 20000 à 30 000 à sa sortie. Il existe un rapport direct entre l'infection apparente de l'eau et son con-

tenu en bactéries saprogènes et pathogènes ayant la propriété de liquéfier la gélatine.

Pour examiner si une eau est riche en bactéries pathogènes, on injecte à la fois à un lapin, à une souris et à un chien, de 0^*,b à 1 centimètre cube do cette eau. Si l'un de ces animaux meurt, on pourra réussir à isoler la bactérie ou les bactéries pathogènes qui auront causé la mort. Il est plus difficile de déterminer les bactéries pathogènes d'une eau par la culture sur plaques et par l'inoculation, à des animaux, des colonies qui s'y seront développées.

Bactéries du sol. — Il est superllu de faire remarquer que les bactéries de l'air, de l'eau et du sol sont jusqu'à un certain point liées par beaucoup de rapports ; celles qui se trouvent dans Tair se déposent à la surface de la terre et des eaux ; les microbes qui se trouvent à la surface de la ten'e, lorsque celle-ci se dessèche et se réduit en particules, seront élevées dans l'air par les vents et les courants de l'atmosphère ; le sol reçoit aussi une partie des microbes qui se trouvent dans l'eau, dans les eaux d'égout et les eaux ménagères, et celles qui se trouvent dans les déjections de l'homme et des animaux. La quantité des bactéries qui existent et vivent à la surface de la terre est incomparablement plus grande que celle contenue dans les eaux les plus sales, les eaux d'égout par exemple.

La répartition des divers microbes dans le sol est variable suivant la nature du leiTaindont il s'agit. Les terrains peu fertiles en contiennent une beaucoup moins grande quantité que les terres arables, fumées avec les produits de déjection de l'homme et des animaux; la terre des forêts en renferme moins que le terrain de nos jardins. L'humus formé à la surface des terres cultivées, et dont la couche est plus ou moins pi'ofonde, est formé de débris de végétaux mêlés ii la terre elle-même et en renferme également une très grande quantité. Le sol est donc le réceptacle essentiel des bactéries, leur grand magasin. Dans une goutte d'eau mêlée avec une parcelle de terreau à peine palpable, on en trouve des milliers. Le sol des rues, constamment souillé dans les villes par les déjections des chevaux, en est rempli.

La terre arable renferme, eu outre de microcoques et de bacilles saproj<ènes, une quantité de bacilles pathogènes, les bacilles de l'œdème malin, de la septicémie de Pasteur, les bacilles du tétanos infectieux, le bacillus seplicus agrigenus, un streptococcus, le staphylococcus aureus, etc. H suffit d'inoculer aux souris, aux cobayes et aux lapins de p<'tits fragments de terreau pour obtenir une mortalité supérieure à celle qui résulte de rinoculation de pareille quantité de viande putréllée. Avec une plus grande quantité de terreau insérée sous la peau, on détermine chez presque tous ces animaux une mort rapide, causée soit par les bactéries elles-mêmes, soit par les ptomaînes dont l'absorption amène une véritable intoxication. Les plaies de l'homme, quand elles ont été souillées par la terre, quand un membre fracturé, par exemple, a traîné sur le sol, quand des fragments de la terre ont pénétré dans la plaie, s'accompagneront le plus souvent d'accidents graves, d'œdème gangreneux par exemple.

Les légumes destinés à l'alimentation qui sont situés dans la terre arable, comme les pommes de terre, les asperges, les carottes, petites

214 LES MICROBES DE l'aIR, DE L*EAU ET DU SOL.

raves, etc., ceux qui peuvent être en contact avec la surface du sol, comme les salades, les choux, etc., certains fruits constamment souillés par la terre comme les fraises, arrivent dans nos cuisines avec une quantité de bactéries à leur surface, quel que soit le mode de fumure employé; les eaux ménagères qui emportent les débris de terre après le lavage de ces aliments en contiennent une grande quantité. Les légumes seront mangés sans danger après la cuisson. Mais Thygiéniste doit faire des réserves pour ceux qu'on consomme crus comme les salades et les fraises. Ces aliments peuvent amener dans le tube digestif non seulement des bactéries mais aussi des œufs de parasites aninmux comme le ténia.

L'étude de la détermination des espèces des bactéries du sol, de lem' rôle, de leurs propriétés, de la destruction ou de la vie des diverees espèces pathogènes ou non dans ce milieu, de leurs actions réciproques les unes sur les autres, est en réalité peu avancée, ce qui tient en partie à leur nombre considérable et à la difficulté de les isoler.

Nous avons indiqué déjà que Schlœsing et Mttntz avaient démonti-é que la nitrification de Tammoniaque, l'oxydation des substances organiques. >r faisait par l'intermédiaire de microbes qu'ils ont décrits comme des microcoques. Ces expériences répétées avec les mêmes résultats par Waringtoii. Dehérain, etc., démontrent que les liquides les plus chargés en matière> organicjues comme les eaux d'égout, lorsqu'elles sontépandues à la surface d'un sol meuble, cultivé et aéré, sont le siège de modifications chimiques telles que l'eau en est épurée et passe lentement à travers le filtre que lui offre la terre de façon à arriver limpide dans les couches inférieures et la nappe souterraine. Wolny et Fodor ont attribué «à des micro-organismes la production de l'acide carbonique dans le sol. Les microbes nitrific:ateursile Schlœsing et Mûntz ne sont pas les seuls qui jouissent de cette propriété. Heraeus [Zrilschrift f. Hygiène, 1886) a montré que beaucoup d'autres espèces, le bacillus prodigiosus, les spirilles du fromage, les spirilles de Finkler, les bacilles du tyi)hus, les bacilles du charbon, les slaphylococci. possèdent la propriété d'oxyder l'ammoniaque et de le transformer en acide nitreux, tandis que d'autres espèces, deux bacilles de l'eau par exemple, réduisent fortement les nitrates. 11 est certain qu'fi la suiface du sol, il si» passe surtout des fermentations et oxydations qui sont liées à la formation de bactéries oxydantes et aboutissent à la nitrification. Cette oxydation est favorisée par les labours et opérations agricoles qui ameublissent la teiTe humide en la mettant, dans une couche plus ou moins profonde, en contact avec l'air. 11 en résulte une disparition extrêmement rapide et complète des matériaux organiques. En un mot, l'épuration par le sol est le procédé le plus parfait de clarifier les eaux chargées de matières organiques, et la filiration de ces eaux a travers la terre les rend pures à la nappe souterraine d'où sortent les sources et oii Ton creuse les puits pour l'eau d»* boisson. Frankland et Schlœsing ont constaté ce mode de filtration dans de> tubes en verre ou en fonte remplis de terre argilo-sableuse de 2 à 3 mètres de long et d'un diamètre de 15 à 20 centimètres, à la partie supérieure desquels on versait de l'eau d'égout; on pouvait analyser cette même eau clarifiée il la partie inférieure du tube.

Nous avons répété ces expériences à l'occasion de la question si impor- Uinle pour Paris de Tépandage et de l'utilisation agricole des eaux d'égout*, eu remplissant des tubes de 2 à 3 mètres avec de la terre de Gennevilliers; nous versions sur la surface supérieure de la terre des microbes déterminés, faciles à reconnaître, comme le prodigiosus, le bacille typhique, etc., et jamais ces organismes ne passaient à Textrémité inférieure du tube. Grancher* a fait de son côté des essais analogues avec plusieurs séries de grands tubes métalliques remplis de terre de (iennevilliers, dont le sable est mélangé d'un peu d'argile et «le cailloux. Les grands tubes de Grancber présentent, tous les 20 centimètres suivant leur longueur, lie petits tubes métalliques borizonlaux, sortes de drains percés de trous et terminés par une extrémité conique creuse à l'aide de laquelle on peut retirer un fragment de terre à examiner. En versant d'une façon continue à leur surface supérieure des cultures pures d'une bactérie donnée, on suit son passage sur des couches plus profondes, ii des distances de 20, 40, 60 centimètres au-dessous de la surface à l'aide des drains horizontaux, (irancher a constaté ainsi (jue les microbes (bacilles d'Eberth) versés à la surface» de la terre ùne descendent pas à une profondeur de plus de 30 à 40 centimètres, malgré un arrosage quotidien, pendant trois mois, à la surface du tube.

La composition du sol influe beaucoup sur le passage des bactéries. Si le sol est uniquement sableux et pierreux, la filtration s'effectue assez rapidement, tandis qu'elle est beaucoup plus lente si le sol est argileux. Les conditions du filtre sont très variables. Mais, d'une façon générale, on peut dire qu'il n'y a plus de bactéries à 1 mètre de profondeur dans un sol tassé. La propagation des bactéries dans le sol se fait non ï*"»»- ^>* seulement suivant une ligne verticale, mais aussi suivant Perforateur des directions obliques, lorsqu'une fosse non étanche, par exemple, laisse échapper dans son voisinage par infiltration les matières provenant des déjections. La nappe souterraine peut être ainsi souillée par des fosses ou par tles puisards qui communiquent avec elle directement ou par des fissures. Cependant, à moins de conditions toutes spéciales tenant à la composition du sol, la nap[)e souterraine contient une eau pure. Par exemple, un puits de 8 à 9 mètres creusé à Berlin dans la cour de l'institut d'hygiène, dont la paroi et les tuyaux avaient été stérilisés d'abord à l'acide phénique, a permis d'obtenir, après un pompage de quelques milliers de litres, une eau absolument dépourvue de germes.

Pour examiner les bactéries du sol, C. Frànkel se sert d'un perforateur (fig. 117) qu'il enfonce dans la terre jusqu'à la profondeur voulue,

1. CoRNiL, Rapport sur l'utilisation des eaux d'égout et l'assainissement de la Seine j 1888.

2. Granchbr, Comité consultatif d'hygiène, et Grancher et Deschamps. Archives de méd. expérimentale , n» 1, 1889.

de

tijre; d, capsule; /•, aUeron de la capsule qui l'ouvre quand on tourne le perforateur : o, pointe de l'appareil.

2i6 LES MICROBES DE L AIR, DE L EAU Et DU SOL.

puis i»ii tournant le perforateur dans la direction de la flèche, on ouvro une petite capsule (d) qui se trouve à IVxtréniité du perforateur et qui se ferme en retournant ce dernier. On retire ensuite le peiforateur, on examine un cinquantième de centimètre cube de la terre en faisant un mélange intime avec la gélatine liquéliée qu'on solidifie d'après Esmarch aux parois du tube d'essai; de celte façon on peut facilement coiapl^r le nombre de germes qui y poussent. Par cette méthode qui donne des résultats assez constants, on peut s'assurer du fait connu que, tandis que dans les couches supérieures il y a beaucoup de bactéries, dans les couches plus profondes il n'y en a souvent point du tout. Il est intéressant de savoir que les bactéries ne disparaissent pas peu à peu mais tout d'un coup; à une profondeur de 1 mètre à 1 mètre et demi il n'y en a plus. On avait supposé que dans les couches profondes du sol il existe des anaérobies, et que celles-ci devaient souvent être pathogènes, mais les recherches de Frànkel ne confirment pas ces hypothèses. En plaçant des cultui'es sur gélatine de bactéries connues à diverses profomleurs dans un puits, pour étudier leur mode de croissance, on constate qu'à 2 ou 3 mètres, les bactéries ne se développent plus. Suivant Frânkel les bacilles du charbon cessent de se développer à la profondeur de 1 mètre et demi. Cet auteur a déposé, à une profondeur de 3 mètres, une culture de bacilles de la fièvre typhoïde, et il a constaté qu'ils s'y développaient et y vivaient pendant la plus grande partie de l'année. Grancher et Deschamps ont vu, dans les tubes contenant de la terre arrosée avec des cultures de bacilles de la fièvre typhoïde, que ceux-ci étaient vivants à une profondeur de 20 et 40 centimètres, cinq mois et demi après l'ensemencement. Ils se conservent mieux dans le sol que dans une culture sur gélatine-peplone laissée à l'air libre.

Au-dessous de la couche de terre arable, le sol n'est soumis à aucune modification, si ce n'est celle qui résulte de la tlltration de l'eau. Celleci filtre avec la plus grande lenteur dans les sols peu perméables, en sorte que les bactéries et leure spores s'y trouvent placées dans de très bonnes conditions de stabilité et de conservation. Elles y sont en quelque sorte ensevelies, et leur développement, leur multiplication dans les couches pi-ofondes sont à peu près nuls. Leur transport par les animaux qui vivent dans la terre, les vers de terre, larves, taupes, etc., ne sVfTectue que dans des limites très restreintes.

Il serait ou ne peut plus intéressant de savoir ce que deviennent les bactéries pathogènes placées dans les couches superficielles de la terre, mais nous devons avouer que nous sommes encore peu renseignés sur ce point. L'action de l'air et du soleil interviennent assurément comme agents il'atténuation. D'après les recherches de M. Rolton et de tteraeus, on sait d'une façon générale que les bactéries pathogènes, accidentellement déposées sur le sol, s'y trouvent en concurrence vitale avec le grand nombre des saprophytes qui y vivent conslamment en quantité considérable et qu'elles ne tardent pas h succomber faute d'aliments de nutrition. Les bacilles de la fièvre typhoïde doivent y disparaître plus ou moins rapidement. Leurs spores, s'ils en présentent à la surface du sol, sont beaucoup moins résîs-

UinLs que ceux du charbon. Nous rappellerons que Koch a essayé de cultiver les bacilles du charbon dans le terreau, dans la vase riche en humus provenant des rives d'un fleuve, dans la boue mélangée d'eau, et qu'il n'a obtenu aucun développement. Haussnitz a fait des recherches analogues sans résultat au laboratoire de Flugge. Encore faut-il remarquer que dans ces expériences de laboratoire on se sert de terre stérilisée et aérée, conditions favorables au développement des bactéries pathogènes, tandis que dans le sol naturel elles ont à lutter contre les saprogènes, dans un milieu chargé d'acide carbonique.