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ques. Leur diagnostic sur les coupes, quand ils sont dispersés sous cette forme dans les tissus où parmi les éléments du pus, est loin d'être aisé même pour le spécialiste. Par contre l'aspect onduleux, finement spiralé, qu'ils revêtent parfois est significatif et oriente immédiatement l'observateur. Le centre du paquet filamenteux est dans bien des cas si dense qu'il prend en masse le colorant.

La zone hyaline, qui forme le pourtour du grain, paraît rayonnée : elle est en effet hérissée d'éléments claviformes ou massues, dont la grosse extrémité est périphérique. Ces massues sont très réfringentes à l'état frais. Elles prennent le Ziehl, mais non pas le Gram. L’éosine, les fuchsines acide et basique diluées, la safranine, les teignent en rose plus ou moins intense ; souvent, un fin filament Gram positif parait les centrer,

Les massues font souvent défaut dans lactinomycose humaine. Comme nous le verrons plus loin, leur présence où leur absence importent pour le diagnostic de l'espèce.

Histologie

Le grain parasitaire est dans les tissus le centre d'un follicule inflammatoire réactionnel, Ie « nodule infectieux actinomycosique de Poncet et Bérard ». On décompose schématiquement ce foll'cule en trois parties : région centralé nécrosée et purulente où flotte le grain ;

Zone moyenne d'inflamimation polymorphe où polynucléaires, Ivmphocytes, cellules épithélioïdes sont mélangés en proportions variables ;

Enfin gaine fibreuse périphérique mince.

Quelquefois le corps étranger inoculateur (d'origine vévétale le plus souvent) sera décelé dans l’abcès Iui-même.

Brumpt a montré cornment se formé le follicule : c'est une cellule géante, contenant à son intérieur les éléments parasitaires qui sont à son origine ; le parasite détruit ensuite la. cellule géante dont il se nourrit et devient libre

dans les tissus. On peut quelquefois découvrir des images de macrophagie sur les coupes, mais l'interprétation des stades de début de la jeune colonie parasitaire est toujours délicate.

Nous voyons que le sel élément réellement « spécifique » du follicule est le grain lui-même. Les caractères histologiques proprement dits du micro-abcès peuvent être réalisés par un corps étranger banal. Or le grain mêlé à des Gébris purulents flotte au centre de labcès ; il s’en dé-

lache facilement pendant les manipulations de la pièce, notamiment pendant la confection des coupes au microtome. Les chances d'identification dépendront donc directe- ment de la quantité des micro-abcès présents dans les coupes.

Forme suppurée : C'est justement dans la forme! t\pique suppurée que les micro-abcès abondent.. L'inflammation y affecte une disposition nodulaire et la présence de plusieurs follicules dirige déjà l'esprit du chercheur vers la possibilité d’une mycose, Une recherche attentive permettra, dans la plupart des cas, de découvrir des parasites, surtout au niveau de la zone périphérique, c'est-à-dire de la zone &'exrtension de l'infection. Les lésions ont déjà évolué, en effet, dans les régions le plus anciennement atteintes : les éléments cellulaires avoisinant le follicule sont souvent comprimés el atrophiés ou même détruits par son développement ; des cavités se creusent et le contenu de l'abcès peut s'évacuer par des trajets fistuleux qui dissocient les tissus. Les follicules n’ont généralement pas tendance à se fondre avec les follicules voisins ; mais il est fréquent de trouver des traînées inflammatoires surtout péri-vasculaires qui unissent les follicules entre eux.

En résumé, l'activité du parasite paraît ci manifestement supérieure aux réactions défensives des tissus ; Les macrophages eux-mêmes disséminent les éléments pathogènes dans l'épaisseur des tissus et als ete de la sorte les nodules infectieux.

FORMES PSEUDO-NÉOPLASIQUES.

Dans la variété pseudo-néoplasique, au contraire, la dé: fense de l'organisme est si intense qu’elle semble presque disproportionnée avec la cause qui la provoque. Une réac- UÜon aussi marquée et, disons-le, aussi partiellement victorieuse du parasite, appartient aux tissus richement vascularisés, tels les tissus musculaires et osseux.

Sur les coupes les éléments parasitaires sont rares : on ne peut guère les mettre en évidence qu'au centre même de Ia tuméfaction dans les régions les plus anciennement enflammées et parfois aussi au niveau des minces et rares cordons inflammatoires qui en partent. Dans ce dernier cas, c’est en bordure des trajets, directement au contact du tissu scléreux qu'on pourra découvrir des grains caractéristiques. Le reste des préparations montrera un tissu de granulation à ses divers stades, « exsudatif », « productif » et d’ « organisation fibreuse définitive » mêlés en proporlions très variables suivant les cas. Chacun de ces types d'inflammation, si on l’envisage isolément, peut conduire à des interprétations erronnées ; il existé en effet, à côté des zones d'organisation scléreuse riches en collagène, pauvres en éléments fixes, des régions vraiment désordonnées el atypiques : très cellulaires, riches en divisions nucléaires, semées de néo-capillaires ; lexubérance de ces lésions « surproductives » pourrait faire penser à un examen superficiel aux aspects du sarcome globo-cellulaire. En d’autres points l'hyperplasie conjonctive est semée d'éléments ïnflammatoires dispersés ou groupés en follicules et de fréquentes cellules géantes plus où moins achevées : ces images histologiques se rapprochent beaucoup de celles données par des lésions tuberculeuses extensives. Mais l’incohérence même de l'ensemble doit permettre d'éviter @e telles erreurs d'interprétation. Nous rappellerons que la topographie générale des lésions lues à un faible grossissement ne doit jamais être perdue de vue dans létude d'une prépara-

tion fre pathologique : ici, un tel polymorphisme, quel qu'impressionnants que puissent être certains détails, n’appartient guère au granulome tuberculeux même surinfecté, et encore bien moins à la tumeur maligne.

Cette discussion même aura suffi à montrer la di fficulté du diagnostic de ces formes rares d’actinomyeose : l'hésitation que l’on peut avoir dans les interprétations de la nature d’une telle lésion doit toujours engager l'observateur à multiplier les coupes et à effectuer les colorations convenables qui permettront la mise en évidence incontestable du parasite dont la découverte seule tranchcra le diagnostic.

TECUNIQUES DE RECHERCHE.

Un diagnostic bactériologique n’a de valeur scientifique que s’il est complet : trop souvent la recherche médicale manque de la rigueur nécessaire, que l'observation clinique humaine, il est vrai, ne rend pas toujours possible. Un simple examen du pus par exemple permettra en général un diagnostic suffisant au point de vue médical pour instituer le traitement iodé nécessaire. Mais du point de vue bactériologique le diagnostic complet doit comporter la détermination exacte de l'espèce pathogène.

Une telle identification est difficile el appartient au spécialiste : aussi rappellerons-nous simplement les techniques qui permettront de lui fournir les éléments indispensables de ce diagnostic ; la culture et les coupes de grains parasitaires. ’

Examen direct. — La recherche des grains dans le pus, lorsqu'ils sont abondants, ne présente en général aucune difficulté. On les isolera facilement en étalant le pus sur une lame de verre et en dissociant les grumeaux avec des aiguilles ou le fil de platine. Une fois le grain isolé on l’écrasera entre lame ct lamelle et on l’examinera à l’état frais d’abord, puis avec une coloration au Gram, ou mème après double coloration de Ziehl et de Gram.

Dans quelques cas les grains sont très rares ou'même absents. Il faudra alors multiplier les étalements et, si aucun grain n’a pu être décelé, colorer plusieurs lames atin d'y rechercher des touffes de’ fins filaments ramifiés. Il est capital de poursuivre la recherche de ces éléments avec persévérance, car ils peuvent être très rares ou masqués par la pullulation de germes d'infection secondaire dans le cas de lésions ouvertes. I arrivera de ne mettre en évidence que des formes fragmentées, parfois en macrophagie et dont le diagnostic est fort délicat. N |

Les grains les plus volumineux seront fixés dans le liquide ‘de Bouin ; on en fera des coupes qui seront très utiles pour Fidentificalion, au même titre d’ailleurs que les coupes de tissu pathologique contenant dé semblables grains parasitaires. | !

Coupes de tissus. — Le prélèvement des fragments de tissus sera fail avec soin et devra porter sur les régions manifestenrxent enflammées, ainsi que sur les fongosités. Une. série de fragments sera mise en réserve au cas où la recherche sur les premiers blocs serait restée négative.

La fixation se fera simplement dans le liquide de Bouin ou dans le formol à 16 % Le matériel sera manipulé avec précaution lors des changements de liquide et des coupes: au mierotome afin d'éviter de détacher les éléments parasitaires.

- Les coupes seront colorées par lhématine-éosine au point de vue histologique. Cette coloration .qui ne met pas en évidence les filaments de toutes les espèces sera complétée par un Gram, safranine ou éosine, qui précise parfaitement la nature des grains. Enfin la coloration de Mann recommandée par M. Langeron est particulièrement belle et le parasite s'y détache parfaitement (bleu de méthyle-60sine).

Culture. — L'ensemencement ne devra pas être pratiqué sur des fragments pris au hasard : les filaments morcelés,

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dégénérés, sont cn effel presque toujours incapables de se développer. Pour se rendre compte du bon état des filaments on appliquera le procédé de J. H: Wright : il consiste à écraser le grain entre déux lames stérilisées par flambage. L'une des lames permet de vérifier l’état des filaments après coloration au Gram ; Fautre, mise à l'abri de l'air dans une boîte de Petri stérile, servira à l'ensemencement. Le fragment de grain dont la vitalité a ainsi été vérifiée est dilué dans une goutte de bouillon ; une trace de ce liquide servira AUX SeMIS.

Les ensemencements se feront toujours à la fois en milieu aéré et privé d'air. Jamais il ne faudra négliger de pratiquer de cultures en anaérobiose, du fait de la fréquence dans l'actinomycose humaine des germes anaéorobies (Cohni Streptotrix Israeli). | fe

Les milieux à conseiller sont la carotte, la pomme de terre glycérinée, les milieux de Sabouraud, le sérum coagulé en aérobie. En anaérobie, la gélose glucosée de Veillon est excellente. L'addition dans ce dernier milieu de sérum et de quelques gouttes « d'extrait globulaïre » préparé selon la technique de Legroux facilitent souvent la culture.

Les tubes seront mis à l'étuve à 37°. Quand on dispose d’une quantité suffisante de culture il sera alors prudent de garder un ensemencement en aérobie et un en anaérobie à la température du laboratoire. l

Le développement des germes n’est jamais bien rapide. I faut compter au minimum 6 à 12 jours d’étuve avant que la culture n'apparaisse : de même le développement de l’actinomyces bovis est très lent et demande souvent près de trois semaines.

Muni de ces divers éléments de diagnostic le mycologiste aura. la possibilité de déterminer l'espèce pathologique en cause, de pratiquer, s'il y a lieu, des inoculations et des rétrocullures.et la nature de la lésion sera ainsi précisée avec toute la rigueur qu'on est.en droit d'exiger actuellement.

GHABITRE [PUS

Etude et Choix du TA CIHENL.

Quand les étapes successives du diagnostic ont été franchies et que l’on se trouve en possession d’un diagnostic

- ferme, il est possible, et seulement alors, de choisir et d'ap-

pliquer une thérapeutique rationnelle. Nous allons donc envisager successivement les traïtements dont sont justiciables les différentes affections que nous venons d'étudier.