TECHNIQUE GÉNÉRALE D'ÉTUDE D'UN CHAMPIGNON DES TEIGNES
L'isolement en culture pure, l'étude des caractères morphologiques microscopiques et la détermination spécifique des champignons des teignes constituent des opérations délicates décrites par Sabouraud, Bodin et Langeron. L’exposé ci-après de la technique générale d’étude d’un champignon des teignes fait mention des perfectionnements obtenus dans ces méthodes de recherches et apporte une contribution personnelle, en ce qui concerne l’ensemencement parcellaire et l'isolement en culture pure.
14° Récolte et conservation des poils
La récolte des poils et des squames doit être faite sur une lésion non traitée.
Avec une pince à épiler flambée, arracher les poils et les croûtes que l’on déposera ensuite entre deux lames de verre préalablement flambées et refroidies.
Faire une récolte aussi abondante que possible des croûtes où se trouvent généralement les poils parasités.
Envelopper les deux lames dans du papier blanc sur lequel on inscrit : la date de la récolte, l’espèce atteinte et l’âge du sujet.
Ainsi récoltés, les produits peuvent être expédiés très loin et conserver leur vitalité pendant au moins 2 ans.
Es
2° Milieux et méthodes de culture
Pour obtenir une morphologie aussi complète que possible, il faut faire varier les conditions physiologiques de croissance en cultivant ces champignons sur des milieux d’étude variés.
Outre les milieux d’épreuve classiques de Sabouraud, on doit utiliser les milieux naturels aux grains de céréales, au crottin, au champignon de couche et les milieux à base de polysaccharides (amidon et dextrine) ou à la farine de blé, indiqués par Langeron et Milochevitch.
Les milieux aux grains de blé et d'orge ont donné des résultats remarquables dans la culture des Trichophyton mégasnorés des bovidés. Ils constituent d’ailleurs, au double point de vue chimique et physiologique, un ensemble très complet.
La composition moyenne des grains de blé ou d'orge est la suivante :
Blé Orge HA st DR een Care 13 13 Matières minérales et traces de métaux (manganèse zinc, CUVE... 4,5 RR Matières #arotées LOIS SAME Se 10 10,4 Matibres ÉTASSS semi enr entE deee 1,8 1,8 Matières amylacées .,.5:.sssuase due 1e 68,2 CENUIOSET Re TERRE 11 4,4 100 100
Dans le germe ou l’assise protéique de ces grains on rencontre d'autre part des diastases et des vitamines.
Pour le blé, les diastases sont nombreuses : maltase, lipase, phosphatase, cellulase, gluténase. Le grain de blé contient en outre du carotène, composé défini C40 H56, que des recherches récentes permettent de considérer comme une provitamine A, et aussi des vitamines hydrosolubles.
Sans doute, la stérilisation peut altérer ou détruire certains de
ces principes, mais W. H. Schopfer a récemment montré qu'il existe dans le germe de blé une vitamine hydrosoluble qui résiste à 115°- 120° pendant 15 minutes et aux alcalis. Cette vitamine est un facteur de croissance qui accélère le développement végétatif ainsi que la sexualité. La valeur de ce facteur a été éprouvé sur une mucorinée, Phycomyces blakesleeanus, par la numération des zygotes produits sur des milieux additionnés ou non de ce facteur hydrosoluble et thermostable.
Sur le conseil du Docteur Langeron, j'ai utilisé cette propriété du germe de blé pour rechercher les organes de propagation des Trichophyton mégasporés à culture faviforme. Dans ce but, le germe de blé, produit de déchet des meuneries, a été associé aux milieux aux grains de blé ou aux grains d'orge (1).
Enfin, d’autres milieux ont encore été employés :
La gélose au bouillon de culture de staphylocoques, d’origine humaine, bovine ou équine (Baudet) :
La gélose au moût de bière.
Ces différents milieux ont la composition suivante : a) MILIEUX D'ÉPREUVE CLASSIQUES.
Gélose mallosée :
Eau naturelle (du robinet) ............. 1000 gr. Mallos®ornt-de-Chanut/7..,..2....:... 40 gr.
Peptone granulée de Chassaing ......... 10 gr. COS re DEEE un Ne 03 vai be de fe 18 gr.
Pour la gélose glycosée, remplacer le maltose brut par le glucose massé de Chanut, en même quantité.
Les géloses maltosée et glycosée sont préparées suivant la technique indiquée par Sabouraud. Les produits utilisés pour leur fabrication doivent être de même origine que ceux empluyés au Labora-
(1) Je remercie M. le Pharmacien-Colonel Bruère d’avoir mis aimablement à ma disposition des germes de blé pour la préparation de ces milieux, ainsi que des documents qu'il a bien voulu me communiquer.
toire de l'Hôpital Saint-Louis, si l’on veut obtenir des résultats comparables avec les cultures types des champignons des teignes décrits par cet auteur. C’est là une précaution de très grande importance pour la détermination précise des espèces étudiées.
b) MILIEUX NATURELS ET A BASE DE POLYSACCHARIDES.
