LES MILIEUX NATURELS COMPRENNENT
Les milieux aux grains de céréales : grains d'orge, de blé, de riz, de maïs, placés sur une épaisse couche de coton hydrophile imbibée d’eau ordinaire ;
Le milieu au crottin de cheval, composé de crottin légèrement imbibé d’eau. Sur ce milieu le développement est pauvre en apparence, mais riche au point de vue de la morphologie du champignon ;
Le milieu au champignon de couche, composé de morceaux de champignon de couche reposant sur du coton hydrophile imbibé d'eau.
Les milieux naturels sont utilisés dans des tubes à essai de 18 m/m. Ces tubes sont d’abord bouchés au coton cardé et stérilisés vides, à la chaleur sèche (1 heure à 180°), pour éviter les moisissures. Après préparation, ces milieux naturels sont stérilisés à l’autoclave 20 minutes à 120°, à deux reprises, à 24 heures d'intervalle.
Le milieu aux grains d'orge ou de blé et au germe de blé, se prépare comme le milieu aux grains de céréales, mais en ajoutant du germe de blé aux grains de blé et d'orge. Toutefois, la stérilisation à l’autoclave est faite à 115° pendant 15 minutes, à deux reprises à 24 heures d'intervalle.