TOME er sise LOTO
La différence entre les quantités de cellulose brute et la somme des quantités de cellulose, hémicelluloses et lignine est, pour la plus grande partie, constituée par des matières minérales et azotées.
Les chiffres précédents donnent pour 100 grammes de cellulose brute : Cellulose 220928092090 0e O0 2.8 © © ® © © © be © © © e © © © 735 % LI Hémicelluloses écocesadsese0oceceseceecsecese 4
Lignine . 3œ2ee.os 8400080 %0ececee0oeeees es 9 e © © © 16 %
Ces résultats sont à peu près conformes aux chiffres proposés par MANGOLD (9) pour la canposition de la cellulose brute :
Cellulose 0@%@0e9eesceece ee © © © 8 @ © 6 © © © eo © © © 65 à 80 7e Pentosanes 000000806800 09000. 0€ 00e 5 à 10 Go Lignine DUPONT 0e06e00600PEGS%De RO 00e e 00 16 à 32 %
Indice formique du son : 18,7 p. 100 grammes de son sec.
L'analyse par les méthodes de référence du résidu de l'attaque formique nous a fourni les résultats suivants :
Cellulose- (BERTRAND) 62.502227. 009 Hémicelluloses (furfural) ......6.s006 14 lignine (méthode de référence) ..cc.coe 238
Potal 1525
Les chiffres précédents représentent, pour 100 grammes du produit obtenu par la détermination de l'indice formique :
Cellulose 000°6900009%0%2e09%0e0000060.000 48 A
À Hémicelluloses 000006086994 0000e00e06e € 7,5 Ligmnine 600990000806 0660000@090000e%. 15 %
| Dotal cs. 70,5 %
Remarquons tout de suite que ce total ne représente que 70 p. 100 du poids du résidu formique. Si, comme ces auteurs le prétendent, l'indice formique correspond assez bien à l'indigestible glucidique, il faut noter, toutefois que près du tiers du produit obtenu est constitué par autre chose que par des glucides classiquement indigestibles.
L'analyse, en vue de connaître la nature des 30 centièmes non dosés nous a fourni les chiffres suivants : |
Matières protéiques (N x 5,8) ccc.c.... 2,2 % Matières minérales .,.6....e.socoses 5% Matières solubles dans les solvants
organiques (alcool, éther) .....e...e 16 % Acides volatils (exprimés en acide
lormiqmel se MR TO A RQ co
Total. set ed 2e
Les matières solubles dans les solvants organiques présentent bien les caractères des lipides. Remarquons que l'un des auteurs a reconnu plus tard la nécessité de laver le résidu du traitement fommique à l'alcool et à l'éther (4). Mais dans quelle mesure le produit ainsi obtenu représente-t-il toujours l'indigestible glucidique ?
Le dosage des acides volatils a été effectué par la technique de OLMSTED, WHITAKER et DUDEN (10). L'idée de cette recherche nous est venue d'une remarque de GUILLEMET et PRECEPTIS qui, dans la première comuunication consacrée à l'emploi de l'acide formi que, envisagent la formation probable de formiate de cellulose. De fait, l'allure de 1a courbe d'entraînement des acides volatils, à pente légèrement décroissante, est bien caractéristique de l'acide formique.
Pour le dosage, le résidu du traitement formique est mis à macérer 24 h. dans de l'acide sulfurique à 72 p. 100 en volume, à 0°. Le liquide est dilué, neutralisé, puis ramené en milieu sulfurique afin de libérer les acides faibles. Une partie aliquote est soumise à l'entraînement à la vapeur,
Afin de vérifier que ces acides volatils ne sont pas dus à l'action de la solution sulfurique concentrée sur certaines matières organiques qui constituent le résidu de l'attaque formique, nous avons soumis au même traitement sulfurique du papier filtre, de la cellulose brute obtenue par la méthode de WEENDE et un résidu de digestion pancréatique. Ces deux derniers produits ont été préparés à partir du même son de blé. Dans aucun cas, nous n'avons pu déceler de formation d'acides volatils,
Après autoclavage à 120° pendant 20 minutes, digestion pancréatique et traitement du résidu de digestion par les solvants organiques neutres (alcool, benzène, éther), on obtient un résidu qui représente 52,4 p. 100 du son. L'analyse de ce résidu, effectuée soit conformément aux prescriptions de WILLIAMS et OLMSTED, soit en suivant les techniques de référence, a fourni les chiffres suivants rapportés à 100 g. de son sec 2
WILLIAMS Références
ce coee on 20 72 cm cie > one 0 GE mu ee Cu CD Ca ds
en &. en &o
Cellulose 2092 0e@5S 12,1 2900006ee 12,8 Hémi celluloses e © 24,8 2cee0cesee 2337 Lignine Sseesvcecse s 5,4 9%°99cse 4,9
cm ene mnemes sente
Total e000ce 42,3 Se8e+ecsee® | 41,4
Ces résultats nous montrent que, dans le cas du son, la méthode de WILLIAMS fournit des chiffres voisins de ceux des méthodes de références.
Remarquons que le résidu délipidé de la digestion pancréatique contient un indosé important. L'analyse de ce résidu nous a fourni les chiffres suivants rapportés à 100 g. de son sec :
Matières protéiques (N x 5,8) ....... 6,8 g TR.
Cendres ® ® © © © à © © © ® @ ® © © © ® © © e © © © © 6 & © © » € 2»
On voit que ce résidu renferme encore une proportion importante des matières protéiques contenues dans le son primitif. É
= = SESTEZSESEZSSEEESESEEEEE Eee ee
Si l'on exprime par 100 les quantités respectives de cellulose, hémicelluloses et lignine fournies par les techniques de référence, les résultats des autres méthodes doment les chiffres suivants :
Références Weende Indice formique WILLIAMS
Cellulose 506000 100 64 a 94 »9 Hémi celluloses.. 100 é 6 105 Lignine .....00e 100 AT 21 110
ER re
D'autre part, si l'on désigne par 100 la somme des quantités de cellulose, hémicelluloses et lignine présentes dans le son et obtenues par les méthodes de référence, les autres méthodes foumissent respectivement :
Weende 0 DO 0 © © 9 % © © © © © o © © ® © 26,7 Indice formique c++69° 45 WILLIAMS Sonate LS NL
Ces résultats comparatifs conduisent aux conclusions suivantes :
- Cellulose : les méthodes de référence et de WILLIAMS donnent des chiffres voisins. 11 en est de même pour les deux autres méthodes, mais il existe une di fférence de 30 p. 100 environ entre les résultats des deux groupes de méthodes.
L'interprétation de ces faits est très délicate. S'agit-il d'une destruction d'une partie de la cellulose par les méthodes empiriques de WEENDE et de GUILLEMET et JACQUOT ou plutôt y a-t-il surcharge de la cellulose pure, par des cellulosanes dans la méthode de BERTRAND, par la fraction fermentescible des hémicelluloses dans la technique de WILLIAMS ? Ce dernier fait est incontestable : les hémicelluloses du son sont constituées, pour une faible partie, non évaluée exactement, de glucose qui, d'après le mode opératoire employé, est exprimé en cellulose. Nous avons dit, déjà, que la mé- thode de HERTRAND ne pouvait pas séparer la cellulose des hémcelluloses les plus résistantes. Dans la cellulose obtenue par la méthode de BERTRAND, nous avons trouvé ne teneur en pentosanes d'environ 15 p. 100. Les quantités réelles de cellulose sont certainement inférieures à celles obtenues par les méthodes de BERTRAND et de WILLIAMS et OLMSTED.
Est-ce à dire que les chiffres fournis par les méthodes empiriques représentent mieux la vraie teneur du son en cellulose ? Le fait que le papier soit attaqué par les réactifs employés dans la technique de WEENDE ne prouve pas absolument que la cellulose pure est sensible à ces traitements. En effet, le papier est préparé par des procédés industriels dont le principe est souvent le même que celui employé dans la méthode da BERTRAND d'isolement de la cellulose : action dissolvante des liqueurs alcalines, action oxydante d'un composé chloré, action'dissolvamte d'une solution sulfitique. Il reste vraisemblablement des cellulosanes, préexistantes dans la membrane, ou des composés analogues formés par dépolymérisation de la cellulose au cours des opérations assez brutales de préparation du papier. Ce sont ces substances plus fragiles qui passeraient en solution.
Tant qu'une méthode de dosage de la cellulose pure, mettant en oeuvre des réactifs n'entraînant pas de dépolymérisation n'aura pas été trouvée, il sera impossible de savoir Ja valeur exacte des méthodes proposées jusqu'ici.
Ce que nous avons vu des propriétés de la cellulose permet de penser que le mode opératoire du procédé WEENDE ne doit pas sensiblement avoir de prise sur cette substance et que le produit obtenu mérite bien le nom de ‘cellulose brute!!, puisqu'il représente une cellulose accompagnée d'un peu de lignine et des hémicelluloses les plus
Te
résistantes. La méthode de WEENDE est donc un moyen approximatif de doser la cellulose et les expériences d'utilisation de cette substance par l'animal que cette méthode a permis d'effectuer, sont peut-être acceptables. Mais les résultats qu'elle fournit n°œnt plus aucune signification quand on veut leur faire représenter l'ensemble des substances non digestibles de la ration alimentaire ou des fèces.
- Hémicelluloses : les méthodes de WEENIE et de GUILLEMET et JACQUOT ne dosent qu'une partie infime des hémicelluloses, de 2 à 6 p. 100 dans nos expériences. Dans tous les cas fréquents où ces substances sont abondantes et même quelquefois prédominantes (par exemple dans les parties périphériques du grain de blé); les résultats de ces méthodes smt très inférieur au poids réel des membranes végétales cmtenues dans l'échantillon examiné.
La méthode de WILLIAMS et le dosage du furfural que nous avons choisis comme méthode de référence fournissent des résultats qui doivent, dans le cas du son, conduire à un chiffre acceptable d'hémicelluloses. La façon de calculer la cellulose et les hémicelluloSes par WILLIAMS et OLMSTED n'est pas à l'abri de toute critique. Elle conduit, presque toujours, à sous-estimer les quantités d'hémicelluloses et par voie de cmséquence, à compter trop de cellulose. En effet, cette dernière est estimée d'après la différence entre le pouvoir réducteur total de l'hydrolysat ét son pouvoir réducteur nm fermentescible. En général, celui-ci est incapable de représenter exactement les hémicelluloses dont une partie plus ou moins importante est presque toujours formée de sucres fermentescibles. Ces sucres fermentescibles vont être, par le calcul, convertis en cellulose alors que leur origine est hémicellulosique. Mais si la méthode de WILLIAMS ne peut prétendre qu'à une approximtion de la cellulose et des hémicelluloses, sont très grand avantage réside dans le fait que le pouvoir réducteur de l'hydrolysat étant fixe et le pouvoir réducteur du glucose et d'un mélange xylose-arabinose assez peu différents, la somme des quantités de cellulose et d'hémicelluloses trouvées représente bien ce qu'elle est en réalité, dans l'échantillon examiné, même si les termes de cette somme ne smt qu'approximtifs.
- Lignine : les méthodes empiriques de WEENDE, de GUILLEMET et JACQUOT dissolvent une fraction très importante de la ligmine. La ‘cellulose brute!"', le produit obtenu par la détermination de l'indice formique, ne renferment respectivement qu'environ le tiers et la moitié des quantités de lignine présentes dans les échantillons examinés. Si l'on sait que la lignine est de beaucoup la substance végétale la moins affectée par les divers phénomènes gastro-intestinaux accompagnant la digestion, on conviendra que ces méthodes se prêtent m1 à une étude de l'influence des substances indigestibles sur ces phénomènes.
Les résultats des méthodes de WILLIAMS et de référence, assez cmeordants, indiquent cependant un excédent de 10 p. 100 de lignine par le procédé de WILLIAMS, ce qui est dû, vraisemblablement, à des condensations de la lignine avec des substances azotées et hémicellulosiques.
PR ue III - CHOIX D'UNE METHODE DE DOSAGE,
L'application de différentes méthodes de dosage des éléments les moins digestibles des aliments, à des substances diverses, -au son de blé dans le cas présent-, l'analyse détaillée des résidus fournis par les méthodes employées, nous permettent de juger de la valeur de ces procédés.
Ni la méthode de WEENDE, ni celle de GUILLEMET et JACQUOT ne permettent d'atteine dre le total des constituants des membranes végétales. S'il est permis de penser qu'elles respectent la cellulose, elles retirent une partie très importante des hémicelluloses et de la ligmine.
La méthode de WILLIAMS et OLMSTED nous apparaît conme un réel progrès dans la détermination des composés spécifiques des membranes végétales. Certes, l'estimation des hémicelluloses dans les cas où les matières pectiques sont présentes en quantité notable conduit à des chiffres peu significatifs. Même dans les cas où l'inconvénient résultant de la présence de matières pectiques n'existe pas, nous avons été amené à faire quelques réserves sur la façon dont les quantités de cellulose et d'hémicelluloses sont calculées. Il est vrai, cependant, que la somme des teneurs en cellulose et en hémicelluloses offre de bonnes garanties.
Si nous comparons les analyses complètes d'un même son de blé, les constituants des membranes étant déterminés, soit par la méthode de WEENDE, soit par celle de WILLIAMS et OLMSTED, nous comprenons immédiatement le progrès analytique considérable correspondant à l'emploi de cette demmière méthode. Dans l'introduction à ce travail, nous avons vu que le total de l'eau, des protides, des lipides, des glucides (ami don) et des cendres correspondait à 53 p. 100 environ du son analysé. L'addition, à ce chif- fre, de 10 p. 100 de cellulose brute, dome une proportion de 63 p. 100 de substance: dosée, soit un indosé de 57 p. 100, Si, au chiffre de 53 p. 100, on ajoute la somme de la cellulose, des hémicelluloses et de la ligmine (38 p. 100 environ), on arrive à un total de 91 p. 100. L'indosé ne représente plus que 9 p. 100 du poids du son, ce qui s'explique, en partie, par la présence de certaines substances organiques, l'acide phytique par exemple, qui n'est évalué par aucune des techniques employées pour le dosage des différentes substances énumérées ci-dessus,
Remarquons, cependant, que si les méthodes empiriques, et particulièrement la mé- Thode de WEENDE, ne peuvent être utilisées dans des expériences de nutrition, elles peuvent néanmoins rendre des services. C'est ainsi que l'on peut déterminer approximativement le taux d'extraction des farines d'après leur teneur en cellulose brute (4) Le taux de cellulose brute s'accroît si rapidement , quand on augmente le pourcentage de farine extraite, que les chiffres obtenus ont une bomne valeur comparative.
Mais nous considérons qu'il est très dangereüx de laisser subsister des conclu sions telles que celles que MANGOLD (9), spécialiste de ces questions, tire d'une étude rapide des moyens de détermination des constituants des membranes végétales. MANGOLD dit ceci :
ST es
" Puisque la détermination séparée de la cællulose, de la limine et des hémicelluloses, recommandée aussi par WILLIAMS et OLMSTED, demande trop de temps, et que, d'autre part, la cellulose brute ne se laisse pas dissocier d'une façon constante en ses éléments constitutifs simples par les différents procédés, il est préférable d'utiliser la méthode de WEENDE, pour la détermination de la cellulose brute totale, parti-
culièrement lorsqu'il s'agit d'exécuter une analyse de fourrage ou de déterminer la digestibilité d'une ration ".
Ce qui, pour le son de blé, équivaut à ne doser que le quart du total des constituants spécifiques des membranes. Nous étudierons, par ailleurs, dans quelle mesure la méthode de WEENDE peut nous renseigner sur la digestibilité des aliments, mais nous devons penser qu'elle ne peut fournir que des résultats concernant l'utilisation digestive de la cellulose brute, c'est-à-dire très approximativement de la cellulose, sans rien laisser prévoir du sort des autres constituants des membranes au cours des phénomènes digestifs et de leur influence sur ces phénomènes.
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