I — METHODES DE DOSAGE COURANTES ET METHODES DE REFERENCE

Dans le travail auquel nous avons fait allusion, au début de ce chapitre (3), nous avons été amené à rechercher ou à proposer des méthodes de référence . Nous en avons détermné les limites d'application et nous avons insisté sur le fait que l'emploi de ces méthodes était incompatible avec la nécessité d'effectuer des dosages en série. Aussi notre choix doit-il, autant que possible, porter sur une méthode plus maniable, mais fournissant des résultats assez semblables à ceux des méthodes de référence.

Pour doser la cellulose, nous avons choisi comme référence la méthode de G . BERTRAND (1): Après un traitement par divers solvants neutres, on fait agir une solution de soude diluée, à l'ébullition. Le résidu lavé est traité alternativement par de l'eau de brome et de l'eau ammoniacale jusqu'à ce que cette dernière ne se colore plus. On filtre, lave, sèche et pèse. Notons que sur Le son de blé, nous avons pu mettre en évidence, dans la cellulose ainsi obtenue, des quantités importantes de substances hémicellulosiques. |

Pour les hémicelluloses, nous avons proposé me méthode de référence qui est une synthèse de plusieurs techniques connues. Elle n'est pas pratique, mais nous avons été amené à la concevoir et à l'utiliser du fait des mauvaises conditions matérielles dans

lesquelles nous travaillions à ce moment. Elle comporte cinq temps différents : - digestion artificielle par la pancréatine à pH = 8,

- hydrolyse du résidu par une solution sulfurique concentrée, à froid, puis diluée à l'ébullition,

- fermentation des hexoses, - formation de furfural, - dosage du furfural.

Remarquons que œtte méthode n'est valable que pour doser les mtières hémicellulosiques formées uniquement ou en très grande proportion de pentoses. Elle est également utilisable dans le cas d'hémicelluloses uroniques fournissant des pentoses dans les conditions de l'hydrolyse en milieu acide.

Pour la lignine, nous avons proposé une méthode basée sur la résistance de cette substance aux traitements par des solutions sulfuriques concentrées. Toutefois, afin d'éviter la formation de produits de condensation de la ligmine avec certaines substances hémicellulosiques ou azotées, nous avons fait précéder l'attaque sulfurique d'une digestion artificielle par la pepsine en milieu chlorhydrique et d'une hydrolyse chimique au moyen d'une solution sulfurique diluée.

Parmi les méthodes de dosage courantes que nous avons envisagées, trois nous sem blent devoir être retenues, pour des raisons très différentes d'ailleurs : la méthode de Weende, la méthode de GUILLEMET et JACQUOT et celle de WILLIAMS et OLMSTED,

1°) La méthode de Weende

Elle a pour auteurs Henneberg et Stohman (8).

L'échantillon est traité à l'ébullition par une solution sulfurique à 1 g.,25 p. 100 centimètres cubes. Le résidu séparé et lavé est traité à l'ébullition par une solution de potasse de même titre. On filtre, lave à l'eau acétique très diluée, à l'alcooï, à l'éther. On sèche et on pèse. Les cendres peuvent être soustraites du poids obtenue On a ainsi la "cellulose brute".

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Nous ne nous faisons aucune illusion au sujet de la valeur qu'il convient d'attribuer aux résultats foumis par ce procédé. Mais puisque l'usage de la méthode classique de Weende est encore très répandu et que la plupart des travaux de nutrition animale concernant les résidus indigestibles reposent sur son emploi, nous avons pensé qu'elle devait être comparée aux résultats obtenus par des procédés plus sûrs.

2°) La méthode de GUILLEMET et JACQUOT.

GUILLEMET et PRECEPTIS emploient les propriétés hydrolysantes et dissolvantes de l'acide formique à une concentration comprise entre 80 et 85 p.100 (7). Précisé dans ses détails techniques par GUILLEMET et JACQUOT, l'usage de la solution formique conduit à la détermination de l'"indice formique" de la substance analysée (5).

L'échantillon est soumis à l'action de la solution formique, à l'ébullitian. On lave le résidu par une solution d'acide formique bouillante, puis par l'eau bouillante. On sèche et on pèse.

GUILLEMET et JACQUOT montrent que leur procédé appliqué, d'une part à l'aliment, et d'autre part aux fèces correspondantes fourmit le même chiffre. Donc, l'indice formique de l'aliment représenterait sa teneur en indigestible glucidique. Ils démontrent qu'il en est ainsi pour le rat (5) et pour l'homme (6).

Nous avons pensé que le fait de pouvoir déterminer d'une façon très simple, les matières glucidiques indigestibles de la ration était très séduisant, et nous avons jugé intéressant d'examiner la valeur des résultats fournis par la détermnation de l'indice formique.

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: Cette méthode consiste essentiellement, après autoclavage et digestion pancréatique préalables, à traiter le résidu par l'acide sulfurique à 60 p. 100 en volume, à froid, puis à l'ébullition en solution diluée de 15 fois. Après neutralisation, les hexoses et pentoses libérés sont dosés, avant et après fermentation, d'après leurs propriétés réductrices. Les hexoses représentent la cellulose, les pentoses correspondent aux hémicelluloses. Le résidu de l'hydrolyse acide est de la limine.

Le principal intérêt de cette méthode est de doser sur le même échantillon les différents constituants spécifiques des membranes végétales. Elle possède une base chi- mique à laquelle les deux méthodes précédentes ne peuvent prétendre,

II - COMPARAISON ENTRE LES RESULTATS FOURNIS PAR CES DIFFERENTES METHODES.

Les expériences biologiques sur l'homme et l'animal que nous rapportons ici devant essentiellement porter sur le blé, nous avons jugé indispensable de rechercher la valeur des méthodes retenues en les appliquant au son.

Les essais ont été pratiqués sur um son de blé de variété indéterminée, qui, en meunerie, est catalogué sous le nom de gros son brossé. Tous les résultats sont exprimés pour 100 g. de son sec.

1°) Analyse effectuée par la méthode de Weende.

Cellulose brute : 11,1 p. 100.

Les méthodes de référence, appliquées à la cellulose brute obtenue ont fourni les résultats suivants 3:

Cellulose CHBRTRAND se cac 8,1 % Hémicelluloses (furfural) .............. 0,45 % Lignine (méthode de référence) ......... 1,8 %