VI - LES METHODES D'ANALYSE
Nous avons exposé, par ailleurs, les méthodes d'analyse que nous avons employées pour la détermination des constituants spécifiques des membranes végétales et pour celle des acides gras volatils (voir la lère partie, p. 6 et la 3ème partie, pe 88.)
Nous avons établi les bilans d'azote, de phosphore et de calcium, afin de connaître, indépendamment du problème de la cellulose, l'état de fonctionnement de l'organisme au cours des différentes périodes expérimentales et les influences respectives des pains blanc et complet sur ces bilans. Nous avons employé les techniques suivantes :
Sade
1°) Azote.
L'azote total a été déterminé par la méthode de KJELDAHL modifiée. Des prises d'essai de 3 cm3 d'urine acidifiée ou de l'ordre de 0,900 g. de matières fécales sèches étaient additionnées de IO 8. de sulfate neutre de potassium, d'une pointe de canif de sélénium en poudre et de I5 cm3 d'acide sulfurique pur. La minéralisation, la distillation et la titration étaient effectuées selon les procédés classiques.
Pour les substances dant nous ne disposions qu'en faible quantité, par exemple pour les résidus de digestion artificielle dont on voulait connaître la teneur en azote, les dosages ont été réalisés au moyen d'une microméthode décrite dans le livre de LOISELEUR (8) avec l'aide du sélénium en poudre comme catalyseur.
2°) Matières minérales.
a) Calcium. - Dans les fèces sèches de 2 ou 3 jours consécutifs, le dosage a été effectué sur une prise d'essai de l'ordre de 400 mg. Le poids de l'échantillon correspondait exactement chaque jour à la deux centième ou quatre centième partie, suivant les périodes, du poids frais des matières fécales.
Pour les urines, la prise d'essai était de 5 cm3. Le prélèvement était fait dans le mélange des parties aliquotes des urines de 3 ou 2 jours consécutifs.
Pour les fèces, la prise d'essai aurait pu être beaucoup plus faible, mais nous avons voulu faire des prélèvements importants qui mettent davantage à l'abri d'un défaut éventuel d'homogénéité des matières fécales sèches.
Dans tous les cas, la minéralisation et le dosage ont été effectués conformément à la tecmique décrite par GUILLAUMIN pour le sang (7), seule la cinquième partie du liquide de minéralisation des fèces était utilisée par dosage..
b) Phosphore. - Les prises d'essai utilisées pour le dosage du phosphore sont les mêmes que celles employées précédemment. Pour l'urine la minéralisation a été faite de la manière suivante :
L'échantillon d'urine est introduit dans un matras de KJELDAHL de I00 cm3. Après concentration par chauffage, au 1/3 environ du volume primitif on introduit 2,5 cm d'acide sulfurique concentré et IO cm3 d'acide nitrique. On chauffe doucement. Lorsque le mélange brunit, on laisse refroidir et on ajoute 3 cm3 d'un mélange nitro-perchlorique à parties égales. On chauffe d'abord jusqu'à décoloration, puis fortement jusqu'à émission de fumées blanches. On laisse refroidir. On ajoute I0 cm5 d'eau distillée, on rince à 2 ou 3 reprises à l'eau distillée, tous les liquides étant introduits dans une fiole jaugée de 20 cm5. On porte 1/2 heure au bain marie bouillant pour hydrolyser les pyrophosphates. On complète à 20 cm5; I0 cm5 de liquide sont traités selon la tecmique de COPAUX (3).
Pour les fèces, la minéralisation est effectuée en employant des quantités dou bles d'acide nitrique et de mélange nitro-perchlorique.
L'po
3°) Extrait sec urinaire.
Nous avons déjà dit (voir 3ème partie, p.104) comment cet extrait a été obtenu. La prise d'essai était de IO cm5.
4°) Vitamine B].
La vitamine Bl a été dosée dans l'urine au moyen de la méthode de WANG et HARRIS (13) par transformtion de la vitamine en thiochrome. Le dosage était fait immédiatement sur les urines recueillies pendant 24 heures.
Pour les produits de meunerie, nous avons préconisé, en collaboration avec Je. BOISSELOT, une technique de dosage de cette vitamine (2). C'est par cette méthode que nous avms déterminé les teneurs des pains en aneurine.
Pour le son et l'extrait de son (voir 3ème partie, tableau XII, p.92) cette même tecmique a été employée mais l'estimation de la fluorescence du thiochrome a été faite non à la vue, mis au moyen du fluoromètre SPEKKER.
Tous les dosages dont les résultats sœmt rapportés dans ce travail ont été effectués en double. Lorsque l'écart entre les deux valeurs différait de plus de 2 p. 100, de nouveaux dosages en double étaient refaits.
- MI - BIBLIOGRAPHIE - 4ème partie.
l. ATWATER (W.0.). - I2 th Annual Report of Storrs (Connecticut) Agricultural Experiment Station; 1899, p. 69-II0.
2+ BOISSELOT (J.) et FOURNIER (P.). - Bull. Soc. Chim. biol., 1944, 26, 227. .
3e COPAUX (H.). - C. R. Acad. Sc, 1921, 175, 656.
4. FLEURY (P.). - Fiches techniques de Chimie biologique, Véga, édit., Paris, 1939, 5ème édition, fiche 21.
2+ FOOD and AGRICULTURE ORGANIZATION of the UNITED NATIONS. - Report of a Committee on Calorie Conversion Factors and Food Composition Tables convened by the Nutrition Division of the Food and Agriculture Organization of the United Nations, Washington 24-28 February 1947.
6. GOIFFON. (R.). = Manuel de Coprologie clinique. Masson édit., Paris, 1942.
7e GUILLAUMIN (C+0°)e -— Bull. Soc. Chim. biol., 1932, I4, 105.
8. LOISELEUR (J.). - Techniques de Laboratoire. Masson édit., Paris, 1947, p. 637:
8 b. Mac CANCE (R.A-), WIDDONWSON (E.M.), MORAN (T.), PRINGLE (W.J.S.) et MACRAE (T.F.). - Biochem. Journ., 1945, 39, 213:
9. RANDOIN (L.). - Normes de l'alimentation humaine dans (11) p. 26-27.
10. RANDOIN (L.), FOURNIER (P.) et DIGAUD (4.). - Bull. Soc. sc. Hyg. alim., 1944, 32, 21; Bull. Soc. Chim. biol., 1945, 27, 40.
II. RANDOIN (L.), LE GALLIC (P.) et CAUSERET (J.). - Tables de composition des Aliments. 2ème édition, Lanore, édit., Paris, 1947,
12. RUBNER (M.). - Arch. f. Anat. u. Physiol. Abt., 1916, 221 et 237 13. WANG (Y.L.) et HARRIS (L.J.). - Biochem. Journ., 1939, 35, 1356.
14. WILLIAMS (R.D.) et OLMSTED (W.). - Journ. of Nutr., 1956, IL, 433.
