Entière solubilité dans l’éther
En résumé, la vitamine B ne peut pas jouer le rôle de facteur de croissance pour des microbes.
Les propriétés des facteurs de croissance des microbes sont spécifiques : déjà en 1858 PAsTEUR signale avec surprise que la culture de la levure en milieu minéral, qui est stimulée par l’addition de
suc de fruit, l’est également par le sérum du sang, mais ne l’est point par l’albumine du blanc d'œuf. Pasreur note aussi que le jus d’oignon, favorable à la culture du ferment lactique, est défavorable à la culture de la levure de bière.
[1,. — VITAMINE LIPOSOLUBLE A.
Dans les expériences qui suivent, nous avons cherché à voir Si la vitamine liposoluble À pouvait rendre à une bactérie acidorésistante quelques-uns de ses caractères naturels, qu’elle avait perdus par la culture sur milieux artificiels.
La bactérie qui a servi pour ces recherches est Nocardia asteroides. Ce microbe avait été appelé Actinomyces asteroides par ÉPPINGER qui l'avait trouvé en 1890 dans le pus d’un abcès du cerveau, chez un malade ayant succombé à une méningite cérébrospinale. Plusieurs noms furent donnés à cette bactérie.
En 1891, Rossi Doria l'appelle : Streptothrix eppingert.
En 1892, SauvaGEeau et Rapais : Oospora asteroides.
En 1895, R. BLancaarp : Nocardia asteroides. 1,
En 1907, Muscrave et CLEGG : Streptothrix freeri.
En 1909, LiINDENBERG : B. brasiliensis.
Brumpr, dans son Précis de Parasitologie (1927) le classe dans la section «minora» du genre « Actinomyces », classe des « Microsiphonés », parmi les « Hyphomycètes parasites ».
Dans le pus du malade, il se présente sous la forme de filaments ramifiés, isolés, qui parfois se dissocient en chainettes ; on observe alors des éléments ressemblant à des bacilles ou à des microcoques. Ils ne sont pas décolorés par la méthode de Gram, sont acidorésistants, et sont virulents pour le lapin.
Les Nocardia qui nous ont servi et qui provenaient de la collection de l’Institut Pasteur, avaient subi de nombreux repiquages sur les milieux non glucosés de Sabouraud, et avaient perdu leurs caractères essentiels
19 Ils n'étaient plus acido-résistants.
29 Ils n'étaient plus virulents pour le lapin.
Dans ces expériences, poursuivies sous la direction du DT Le- GROUX, nous avons utilisé l’huile de foie de morue, l'huile d’arachide et l’huile d’œillette, provenant toutes les trois de la Pharmacie Centrale des Hôpitaux civils de Paris.
Le 30 mai, nous avons incorporé XX gouttes de chacune de ces huiles, stérilisées, à 10 cemc. de gélose, et nous avons laissé ces tubes 24 heures à l’étuve à 370.
Aucun germe étranger n'ayant poussé, nous avons ensemencé le 2 juin une anse de platine de culture de la Vocardia d'Eppinger. Nous observons le 4 juin des colonies abondantes blanchâtres dans les tubes de gélose additionnés d'huile d’oœillette et d’huile d’ara-
chide, et des colonies blanchâtres et plus abondantes encore dans
la gélose additionnée d’huile de foie de morue.
Des tubes témoins, c’est-à-dire des tubes contenant des Vocardia ensemencés sur de la gélose pure,présentent des colonies blanchâtres plus petites et surtout beaucoup moins abondantes que celles des tubes précédents.
Ayant fait une préparation microscopique colorée par le procédé de Ziehl-Neelsen de ces différentes cultures, nous voyons des bacilles allongés et décolorés.
Nous repiquons le jour même, le 4 juin, les Nocardia sur trois tubes de gélose additionnés respectivement d’huile d’œillette, d'huile d’arachide et d’huile de foie de morue et sur des tubes témoins de gélose nutritive.
Nous constatons le lendemain 5 juin l'apparition de quelques colonies blanchâtres, isolées, sur la gélose ordinaire, et de colonies plus nombreuses sur les tubes de gélose additionnée d’huile végé-
tale (huiles d’œillette et d’arachide), et enfin de colonies extrême-
“ment nombreuses ayant envahi tout le milieu de culture dans les tubes contenant de la gélose additionnée d’huile de foie de morue. Au microscope nous voyons des bacilles décolorés par le procédé de Ziehl-Neelsen.
Nous repiquons les MVocardia encore plusieurs jours de suite, les 5, 6 et 7 juin, sur des tubes de gélose additionnée d'huile végétale (huile d’œillette) et d’huile animale (huile de foie de morue et huile
de saumon) et, pour servir de témoins, sur des tubes de gélose : ordinaire. Nous observons toujours la présence de colonies plus abondantes sur les milieux à l’huile et en particulier sur la gélose additionnée d’huile de foie de morue que sur les tubes témoins.
Le 8 juin, après le quatrième repiquage, nous apercevons, sur une préparation microscopique de la culture ayant poussé sur un tube de gélose additionnée d’huile d’oillette, des granulations intra-bacillaires qui ne se décolorent pas par le procédé de Ziehl- Neelsen. Ces granulations intra-bacillaires, et non pas la totalité du corps bactérien, avaient donc acquis un pouvoir acido-résistant en se développant sur de la gélose additionnée d’huile d’œillette.
Pour voir ces granulations facilement au microscope, il faut avoir soin de dissoudre au préalable dans du xylol toute l’huile qui peut se trouver sur la lame.
Au début de nos expériences, ayant dégraissé insuffisamment nos préparations microscopiques, nous avions vu, au milieu de bacilles bien décolorés, quelques « nids » de bacilles ayant conservé la couleur rouge. Il est probable qu'ils étaient encore imprégnés d'huile, qui les avait protégés contre la décoloration.
Ce n’est qu'après avoir dégraissé la préparation soigneusement avec du xylol que nous avons constaté la disparition de ces bacilles acido-résistants. |
Aïnsi Papparition, à partir du 4° repiquage, de granulations acido-résistantes prend toute sa valeur démonstrative (1).
Il séra intéressant de voir si dans la suite des repiquages, ces granulations acido-résistantes deviennent plus nombreuses et plus grosses.
Nous avons voulu voir, d’autre part, si l'addition au milieu de culture de la vitamine liposoluble pouvait avoir comme effet l’exaltation de la virulence de la Nocardia d'Eppinger.
1. Dans sa thèse sur « l’huile de foie de morue et la tuberculose EM CI BLanc dit en 1925-1926 que l’huile de foie de morue ne parait pas avoir une action marquée sur l’acido-résistance du bacille de Koch. Des bacilles émulsionnés dans de l’huile de foie de morue à 370 pendant 5 mois.ne perdent pas tous leur acido-résistance, ne sont pas altérés dans leur morphologie et ne deviennent pas granuleux
Nous avons inoculé, dans la veine marginale de l’oreille de 2 lapins 2 emc. d’une dilution d’une culture de Nocardia ayant poussé sur de la gélose additionnée d’huile. Dans le premier cas, gélose à l'huile d’œillette (lapin de 2 kgr. 500). Dans le deuxième cas, gélose à l’huile de foie de morue (lapin de 2 kgr. 765).
Le premier lapin est mort de pasteurellose quatre jours après avoir reçu son inoculation, et le second est toujours resté en bonne santé.
En résumé, la culture, sur milieux additionnés d’huiles contenant la vitamine liposoluble A, d’une souche de Vocardia asteroides d'Eppinger qui avait perdu son caractère acido-résistant, a rendu en partie cette propriété à cette souche : à partir du 4e repiquage, des granulations acido-résistantes apparaissent.
