EE LA
1, Soc. de Méd. et de Chir. pratiques de Montpellier, 14 mai, 1890.
2, Revue de Médecine, 1890, 926.
SF
nn
A 4 re ?
af e " T2 # + "a ; £ 4 4
EE RS ra PES
les hématozoaires chez un malade, de faire l'examen du sang avant de commencer le traitement; les corps sphériques et les flagella disparaissent rapidement sous l'influence de la médication quinique, les corps en croissant résistent davantage. 4
L'efficacité de la quinine dans les fièvres pa- 4 lustres s'explique bien depuis qu'on sait que le … À parasite du paludisme est un hématozoaire, Les sels de quinine dont l’action sur les schizophytes «2 est faible, sont au contraire très toxiques pour les protozoaires. Il suffit d'ajouter une parcelle … ; d’écorce de auinquina à une infusion de fom F4 pour détruire tous les infusoires (Dujardin, Binz, … Bochefontaine). ‘4
Technique. — Lorsqu'on se propose d'étudier l'hématozoaire du paludisme il faut avoir soin d’abord de recueillir du sang dans de bone conditions, c’est-à-dire chez des malades qui ont. la fièvre et qui ne sont pas soumis à la médica ; tion quinique; le moment le plus favorable est, … dans la fièvre intermittente, le début des accès. k ;
Le sang doit être examiné: 1° à l’état frais; % après dessiccation et coloration. L'étude du sang frais et pur est très intéressante; si la pré paration a été bien faite, en évitant les causes d’altération du sang signalées précédemment, les éléments parasitaires ne peuvent pas être con- |
HÉMATOZOAIRE DU PALUDISME. 69
fondus avec des éléments normaux déformés; on peut observer les mouvements amiboïdes des corps sphériques, les mouvements si remarquables des flagella et, en prolongeant l’examen, quelques-unes des transformations des éléments parasitaires. | |
Sur les préparations de sang desséché, on colore difficilement les flagella qui, déformés et immobiles, sont beaucoup moins intéressants que dans le sang frais, mais on voit bien les
. croissants et les corps sphériques.
Le sang est desséché comme il a été dit au chapitre précédent; on voit très bien au milieu
des hématies les corps en croissant qui se con- servent pendant longtemps; les préparations non - colorées doivent être montées à sec, le baume du Canada rendrait trop transparents les élé-
ments normaux du sang et les éléments parasi-
taires. | |
Le sang desséché et fixé peut être coloré à l’aide de différents réactifs. Le bleu de méthylène seul ou associé à l’éosine, l’hématoxyline et le violet de gentiane donnent de bons résultats. |
La solution aqueuse concentrée de bleu de mé- thylène colore au bout de quinze à trente seeondes les éléments parasitaires (corps sphériques et croissants) qui prennent une teinte d’un bleu plus pâle que les noyaux des leucocytes. Les corps
en croissant se colorent moins bien que les corps sphériques et les corps segmentés.
En ajoutant une petite quantité d’une solution aqueuse de borax à la solution de bleu de méthylène, on augmente beaucoup la puissance colo: rante de ce réactif qui colore même les hématies
si on le laisse agir trop longtemps; il suffit de.
quinze secondes pour obtenir la coloration voulue des éléments parasitaires.
Un bon moyen de préparation des corps en croissant consiste à faire disparaître les hématies en trempant la lamelle de verre couverte de sang desséché dans de l’eau acidulée avec l'acide acétique et en colorant ensuite avec la solution de bleu de méthylène boratée. Les croissants se colorent bien et ils sont très faciles à voir, les hématies ayant disparu.
La double coloration par l’éosine et le bleu de méthylène donne d'excellents résultats; nous colorons d’abord à l'aide de la solution aqueuse d’éosine (15 secondes), nous faisons agir ensuite la solution aqueuse concentrée de bleu de méthylène (15 à 50 secondes); la préparation est lavée avec soin à l’eau distillée, séchée et montée dans le baume. :
Le violet de gentiane et le violet dahlia sont utiles pour la coloration des petits éléments sphériques qui adhèrent aux hématies, ou qui y sont inclus ; il faut avoir soin de ne pas laisser agir
HÉMATOZOAIRE DU PALUDISME. 71
ces réactifs assez longtemps pour qu'ils colorent
: fortement les hématies.
Sur les préparations colorées avec le violet de gentiane ou le violet dahlia, on distingue mal les grains noirs de pigment, ce qui est un inconvénient. |
L'hématoxyline alunée (formule de Latteux)
donne d’assez bons résultats.
. La safranine colore les éléments parasitaires en rose vif, tandis que. les hématies prennent une teinte d’un jaune rosé, mais cette différence de teinte n'est pas suffisante pour bien mettre en évidence les éléments parasitaires.
Dans l’intérieur des corps sphériques colorés
‘par le bleu de méthylène on voit souvent des ‘espaces clairs, arrondis, qui correspondent aux
noyaux. Après coloration par le violet de gentiane, on distingue parfois de petits noyaux ac-
. colés à la circonférence externe (Sacharof).
. Plusieurs procédés spéciaux ont été préconisés pour colorer les noyaux des hématozoaires.
Celli mélange une goutte de sang frais à une goutte de sérum coloré par le bleu de méthylène, la coloration se produit lentement; la préparation doit être laissée dans la chambre humide pendant plusieurs heures.
On obtient les mêmes résultats par le procédé
de Soulié : on dépose sur une lame porte-objet
une goutte d’une solution de bleu de méthylène,
Es QD 2 NN Le de AS fes is à LASER TE Ve
on fait ensuite évaporer le liquide; une goutte du - : sang à examiner cst déposée au même endroit el recouverte avec une lamelle couvre-objet; le bleu de méthylène se dissout dans le sérum et. colore les éléments parasitaires. TU Romanowsky a réussi à colorer les noyaux par D le procédé qui suit: +
Le sang desséché et flambé sur des lamelles
couvre-objet est exposé dans l’étuve sèche à la température de 105 à 110 degrés pendant troie - quarts d'heure ou une heure. Les lamelles sont … ensuite plongées dans un mélange colorant préparé fraîchement avec deux volumes de solution aqueuse saturée de bleu de méthylène étendue #2 d’eau à moitié et cinq volumes de solution aqueuse ni: d'éosine à 1 pour 100 étendue d’eau à moitié; les … ne. lamelles restent dans ce mélange pendant une | 7 heure au moins; on lave à l’eau distillée et on … : monte dans le baume. Les noyaux sont en violet pourpre. 4
Mannaberg a employé comme fixatif l'acide É picrique et. comme colorant l'hématoxyline. ne à 3 sang, desséché convenablement à l’air depuis sc heures au moins, est plongé pendant vingt-quatre … heures dans le fixalif suivant : acide picrique en … N solution aqueuse concentrée et eau distillée ke. (parties égales) et acide acétique cristallisé 3 à. 10 o pour 100; la préparation est mise ensuite PU D: l'alcool absolu jusqu’à décoloration complète |
rh 2
Re
Pr Pl aus +
HÉMATOZOAIRE DU PALUDISME. 73
(vingt-quatre heures au moins). On colore avec une solution alunée d'hématoxyline jusqu’à ce que la structure du noyau des leucocytes dispa- . raisse, et on se sert d'alcool chlorhydrique à 0,25 pour 100 et d'alcool faiblement ammoniacal pour différencier les éléments.
Grassi et Feletti recommandent les deux pro- “4 cédés suivants :
Je Le sang desséché est ie dans un mé- Be d'alcool absolu et d’éther (parties égales) - auquel on ajoute quelques gouttes d'acide acéà tique concentré. La préparation est ensuite portée … dans l’hématoxyline, quand elle s’est saturée de matière colorante on lave et on monte dans le baume. | .. 2° On prépare une solution aqueuse diluée de - bleu de méthylène ou de fuchsine, en mettant … une goutle de la solution concentrée de bleu de Dour ou de fuchsine dans un verre de . montre rempli d’eau distillée, on recueille une à ‘ Mtie de sang sur un verre couvre-objet et on : à laisse tomber celui-ci sur une goutte de la solution de bleu de méthylène qui a été déposée sur un verre porte-objet. Pour mélanger le sang à la À solution colorante, il suffit de soulever un peu, d un côté, la lamelle couvre- -objet en la laissant | ensuite retomber, . D’après Grassi et Feletti, on obtient ainsi une
coloration intense des nucléoles et des grains de
7à PROTOZOAIRES.
chromatine quand il en existe, la substance du parasite reste incolore (Centralbl. f. Bakter, 189, t. X, p. 519).
Sacharof a recommandé le procédé suivant pour colorer les flagella : on fait plusieurs prépas rations de sang frais; on examine au microscope une de ces préparations, les autres sont mises
dans la chambre humide. Lorsque les flagella
apparaissent dans la préparation examinée, on
fait sécher le sang des autres préparations, on:
le fixe par la chaleur et on colore avec une solution aqueuse de violet de gentiane.
BIBLIOGRAPHIE
A. LAvERAN. Communic. relatives aux parasites du paludisme ? Acad. de médecine, 25 nov. et 28 déc. 1880, 25 oct. 1881. Acad. des Sciences, 24 oct. 1881 et 23 oct. 1882. Soc. méd. des hôpitaux, 24 déc. 1880, et 28 avril 1882. — Du MÈèME. Nature parasitaire des accidents de l’im-
paludisme. Paris, 1881. — Du MÈME. Même sujet. Revue Scientifique, 29 avril 1882. — Du MÊME. Traité des fièvres palustres. Paris, 1884. — E. Ricuarp. Des parasites de
l'impaludisme. Acad. des sc., 20 février 1882 et Revue Scientifique, 1883, p. 113.— E. MARCHIAFAVA et À.CELLI. Sulle alteraz. dei globuli rossi nella infez. da malaria. Reale Accad. dei Lincei, Roma, 1884. — A. LAVERAN. Du paludisme et de ses microbes. Soc. méd. des hôpitaux. 24 juillet 1885. — E. MARCHIAFAVA et A. CELLI. Nuove Ricerche sulla infez. malarica. Annali di agricoltura, Roma, et Fortschr. der Med., 1885. — DES MÊMES. Studi ulteriori sulla infez. malarica. Annali di agricol-
Ne DE le
HÉMATOZOAIRE DU PALUDISME. 75
dura, 1886. — (1. STERNBERG. The malarial germ of Laveran. The med. Record. New-York, n° du 4% et du 8 mai 1886. — GoLGi. Sull’infez. malarica. Archivio per le sc. med., T. X, n° 4. — CouncILMAN. Sur certains éléments trouvés dans le sang des sujets atteints de fièvre intermittente. Assoc. of Americ. Physic., 18 juin, et Maryland Med. Journ., octobre 1886. — METCHNIKOFF. Centralbl. f. Bakter., n° 21, 1886. — E. MARCHIAFAVA et A. CELLI. Sulla infez. malarica. R. Accad. med. di Roma, 1887 et Arch. ital. de biologie, 1888,T. IX, fasc. 5. — Des MÊMES. Hémoplasmodie malarique. Assoc. méd. ital.
‘4 Pavie, 1887. — MercuniKkorr. Étude sur les affections
malariennes. Russkaïa med., 1887. — E MaurEez. Rech. sur l’étiologie du paludisme, 1887. — CounciILMax. Nouvelles observ. sur l’état du sang dans les fièvres malariales. Med. News, 1887. — Du MÊME. Rech. complém. . sur le germe de la malaria de Laveran. Réunion annuelle de la Soc. pathol. de Philadelphie, 1887. — * A. LAvERAN. Les Hématozoaires du paludisme. Ann. de . de l'Inst. Pasteur, 25 juin 1887. — W. OsLEer. Communñic. à la Soc. pathol. de Philadelphie. The British med. Journ., 1887, p. 96. — Preirrer. Centralbl. 1. Bakter, 1887. — Coun. Méme rec., n° 12, 1887. — Tommasr CRU- . DELI. Deuts. med. Wochensch., nov.1887.— DANILEWSKY. Matériaux pour servir à la parasitologie du sang. Arch. slaves de biologie, 1886-1887. — Du MÊME. Contrib. à la question de l'identité des parasites pathogènes du sang chez l’homme avec les hématoz. chez les animaux. Cen- tralbl. f. med. Wiss. 1886-1887. — Du MÊME. Rech. sur la parasitol. comparée du sang. Zooparasites du sang des. oiseaux. Kharkov, 1888 (en langue russe). — B. JAMES. The: micro-organisms of malaria. Soc. pathol. de New- York, 25 janv. The med. Record, p. 269, 1888. — A. LAVE- RAN. Des hématoz. du paludisme. Ann. de l'Institut Pasteur, 1888. — Scuravuzzi. Untersuch. über die Malaria in Polen. München. med. Woch., n° 24 et Beiträüge zur Biol. der Pflanzen. Breslau, 1888. — E. MARCHIAFAVA et A: CELLI. Arch. per le sc. med., T. XI et Arch. ital. de
biologie, 188. — CouxcILMan. Nuere Untersuch. über Laveran’s Organismus der Malaria. Fortschr. der Med, n° 12 et 13, 1888, — VANDyYKE CARTER. Note on Ssomen aspects an relations of the Blood-Organisms in 20 Scientif. Mem. by Med. Offic. of the Army of India. Anal. in the Lancet, 16 juin. p.1201, 1888.— C. GoLGr. Il fagôcitismo nell'infez. malarica. Soc. méd. chir. de Pavie. « Riforma medica, mai 1888. — Evans. État du sang dans les fièvres interm. Soc. clin. de Londres. Anal. in Bul letin méd., p. 608, 1888. — A. CATTANEO et A. Monri. Les parasites du paludisme et les altérations dégénér. des globules rouges. Congrès médical de Pavie et Archiv. J per le se. mel, T. XII, 1888. — A. Cecui et G. GUAR NIERI. Sur la structure intime du plasmodium malarise. Al Rif. med., 7 sept. et 12 oct. 1888. — N.-A. SACHAROF. Rech. sur le parasite de la fièvre palustre. Soc. méd. de « Tiflis. Centralbl. f. Bakt., 1889, p. 452 et Archiv. de méd. ‘1 expérim., 1% mai 1889. — Du MÊME. Sur l’analogie du parasite de la fièvre intermit. avec celui de la fièvre récurrente. Soc. de méd. de Tiflis. Centralbl. f. Bakt., 1889, et Arch. de méd. expér.,; mai 1889, p. 482. — CHENZINSKY (Odessa). Zur Lehre über den Mikroorgan. der Malaria= « fiebers. Centralbl. f. Bakt., 1888, Bd. III. — SouLté. Étiologie du paludisme. Soc. de biologie C. r., 1888, p. 766. — CHaLAcaniKkov. Rech. sur les parasites du sang chez les animaux à sang froid et à sang chaud (en langue ” russe). Kharkov, 1888. — C. GoLcr. Intorno al preteso bac. malariæ di Klebs, Tommasi Crudeli e Schiavuzzi. - Torino, 1889. — Du MÊME. Sur le développement des . parasites du paludisme dans la fièvre tierce. Fortschr. NN der Med., 3, et Arch. per le sc. med.,T. XIII, p.173, 1889. ê — À. CELLI et G. GUARNIERI. Sull'etiol, dell’'infez. mala- - Ee. rica. Ann. di agricoltura, 4889. — Prerro CANALIS. Sopra il ciclo evolutivo delle forme semilunari di Laveran. 5 Roma, 1889. — CnenziNsky. Contrib. à l'étude des
micro-organismes du paludisme. Th. de doctorat.
Odessa, 1889. — T.Guazpti et E. ANrouiser. Due casi di febbre malarica sperim. Aecad. med. di Roma. Anno XV:
