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on fait ensuite évaporer le liquide ; une goutte du I sang à examiner est déposée au même endroit, I et recouverte avec une lamelle couvre-objet; le bleu de méthylène se dissout dans le sérum et colore les éléments parasitaires.
Romanowsky a réussi à colorer les noyaux par I le procédé qui suit :
Le sang desséché et flambé sur des lamelles couvre-objet est exposé dans l’étuve sèche à la température de 105 à 110 degrés pendant trois J, I quarts d’heure ou une heure. Les lamelles sont J 1 ensuite plongées dans un mélange colorant pré- j paré fraîchement avec deux volumes de solution *9 aqueuse saturée de bleu de méthylène étendue^* d’eau à moitié et cinq volumes de solution aqueuse ’m d’éosine à 1 pour 100 étendue d’eau à moitié ; les J •lamelles restent dans ce mélange pendant une s heure au moins ; on lave à l’eau distillée et on' monte dans le baume. Les noyaux sont colorés ,J en violet pourpre.
Mannaberg a employé comme fixatif l’acide J picrique et comme colorant l’hématoxyline- Le :J sang, desséché convenablement à l’air depuis six 9 heures au moins, est plongé pendant vingt-quatre 3 heures dans le fixatif suivant : acide picrique en | solution aqueuse concentrée et eau distillée J (parties égales) et acide acétique cristallisé 5 a 9 5 pour 100; la préparation est mise ensuite dans ' fl l’alcool absolu jusqu’à décoloration complète 9
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(vingt-quatre heures au moins). On colore avec une solution alunée d’hématoxyline jusqu’à ce une la structure du noyau des leucocytes disparaisse, et on se sert d’alcool chlorhydrique à 0,25 pour 100 et d’alcool faiblement ammoniacal pour différencier les éléments.
Grassi et Feletti recommandent les deux procédés suivants :
1„ Le sang desséché est plongé’ dans un mélange d’alcool absolu et d’éther (parties égales) auquel on ajoute quelques gouttes d’acide acétique concentré. La préparation est ensuite portée dans l’hématoxyline, quand elle s’est saturée de matière colorante on lave et on monte dans le baume.
2» On prépare une solution aqueuse diluée de bleu de méthylène ou de fuchsine, en mettant une goutte de” la solution concentrée de bleu de méthylène ou de fuchsine dans un verre de montre rempli d’eau distillée, on recueille une goutte de sang sur un verre couvre-objet et on laisse tomber celui-ci sur une goutte de la solution de bleu de méthylène qui a été déposée sur un verre porte-objet. Pour mélanger le sang à la solution colorante, il suffit de soulever un peu, d’un côté, la lamelle couvre-objet en la laissant ensuite retomber.
D’après Grassi et Feletti, on obtient ainsi une coloration intense des nucléoles et des grains de
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chromatine quand il en existe, la substance du parasite reste incolore (Centralbl. f. Bakter, 1891, t. X, p. 519).
Sacharof a recommandé le procédé suivant pour colorer les flagella : on fait plusieurs préparations de sang frais ; on examine au microscope une de ces préparations, les autres sont mises dans la chambre humide. Lorsque les flagella apparaissent dans la préparation examinée, on fait sécher le sang des autres préparations, on le fixe par la chaleur et on colore avec une solution aqueuse de violet de gentiane.
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