I. Eléments figurés du samj normal

a) Sang de l'homme. — Les hématies ont la forme d'un disque circulaire déprimé au centre; leur diamètre moyen est de 7,5 p.; à côté des hématies qui mesurent de 7 à 8 jjl de diamètre et qui sont de beaucoup les plus nombreuses dans le sang

normal, on trouve des hématies de 9 [j. et d'autres

qui n'ont que 6 [x de diamètre.

Les hématies, très élastiques, s'allongent, s'effilent pour traverser les plus fins capillaires et reprennent ensuite leur forme caractéristique.

Chaque hématie se compose d'une partie soluble dans l'eau ou hémoglobine qui lui donne sa coloration rougeâtre et d'une partie insoluble ou stroma qui lui donne sa forme caractéristique ; le stroma est plus dense à la périphérie qu'au centre, mais l'hématie n'a pas de membrane d'enveloppe proprement dite, elle ne possède pas non plus de noyau, ou du moins aucune méthode n'a permis jusqu'ici d'en déceler la présence.

Dans une préparation de sang frais, les hématies ont une grande tendance à s'empiler ; ce phénomène persiste dans le sang défibriné (Ranvier).

A l'état normal, les hématies ne présentent aucun mouvement amiboïde ou autre ; des déformations mécaniques sont occasionnées par les conflits avec les parois vasculaires ou avec les globules rouges ou blancs voisins ; mais l'hématie reprend sa forme dès que la cause qui l'avait modifiée a disparu.

Les leucocytes, de forme sphérique, incolores, se rapportent à trois variétés :

1" Leucocytes petits (4 à 6 de diamètre), renfermant un gros noyau et très peu de protoplasma.

2" Leucocytes plus gros (7 à 10 ij.), renfermant plusieurs noyaux ou un seul noyau allongé en boudin.

0° Leucocytes du volume des précédents ou un peu plus gros, renfermant un ou plusieurs noyaux et des granulations qui se colorent fortement par l'éosine, ce qui a valu à ces leucocytes le nom d'éosinophiles.

A la température ordinaire de la chambre (16 à 18"), les leucocytes du sang de l'homme ne présentent pas de mouvements amiboïdes; en se servant de la platine chauffante on voit des mouvements amiboïdes se produire quand la température arrive à 57 degrés et surtout quand elle atteint 40 degrés. Ces mouvements ne s'observent que dans les leucocytes des deuxième et troisième variétés. Les leucocytes poussent des prolongements et présentent un mouvement de reptation qui, signalé par Davaine, a été bien étudié par Max Schultze.

Lorsqu'on mélange à du sang frais un peu de cinabre finement pulvérisé, ou voit à la température de 58 à 40 degrés les leucocytes s'emparer des granulations colorées (Max Schultze).

Les leucocytes ou phagocytes peuvent également s'emparer des microbes et les détruire, aussi leur rôle est-il considérable dans la lutte de l'organisme contre les maladies infectieuses; les beaux travaux de Metchnikoff sur la phagocytose

et sur l'immunité ont mis la chose hors de doute. En étudiant plus loin l'hématozoaire du paludisme, nous verrons que les leucocytes jouent un rôle important dans la destruction de ce parasite.

Les leucocytes n'ont pas d'enveloppe; ils se composent d'une petite masse de protoplasma entourant le ou les noyaux. Les noyaux très peu apparents dans le sang frais sont mis en évidence par un grand nombre de réactifs.

Il y a environ un leucocyte pour 500 à 400 hématies.

En dehors des hématies et des leucocytes, qui sont faciles à reconnaître, on trouve dans le sang normal d'autres éléments plus petits, moins bien caractérisés; il s'agit d'une part des corpuscules auxquels Hayem a donné le nom d'hématoblastes et, d'autre part, de granulations de nature indéterminée.

Les hématoblastes sont des corpuscules globuleux ou de forme irréguUère, qui mesurent de '2 à 5 jx de diamètre; ils sont incolores ou présentent une teinte jaunâtre; ils ne possèdent pas de noyaux.

Ces corpuscules sont, d'après Hayem, des hématies en voie de formation; d'où le nom d'hématoblastes.

Les hématoblastes s'altèrent rapidement après que le sang est sorti des vaisseaux ; aussi leur

observation dans le sang frais est-elle assez délicate.

Edington a signalé l'existence dans le sang de corpuscules sphériques, incolores, ayant à peu près le tiers du diamètre d'une hématie. Ces corpuscules se formeraient dans l'intérieur d'un globule blanc spécial; d'abord incolores, ils grandiraient peu à peu en devenant biconcaves, se chargeraient d'hémoglobine et se transformeraient en hématies.

Ces corpuscules, auxquels Edington donne le nom d'albocytes, paraissent correspondre aux hématoblastes de Hayem ; personne n'a revu, après Edington les leucocytes de nature spéciale dans lesquels les albocytes prendraient naissance ; quant à la transformation des albocytes en hématies, il est beaucoup plus difficile de la constater que ne le dit Edington.

Un autre observateur anglais, Norris, a décrit, sous le nom de troisième corpuscule du sang, des globules incolores, invisibles. La présence de ces globules a été constatée par Norris au moyen de la photographie, qui permet de distinguer dans un milieu des objets qui ont le môme pouvoir de réfraction que ce dernier, et qui par suite sont mvisibles à l'œil, pourvu que leur pouvoir photogénique soit différent de celui du milieu (Renaut). M""= Hart a montré que les corpuscules invisibles de Norris ne sont autres que des hématies dont

l'hémoglobine a disparu sous l'action des réactifs

ou des agents chimiques.

On trouve enfin dans le sang normal des granulations de nature indéterminée et des granulations graisseuses.

La présence à l'état normal dans le sang de granulations de nature indéterminée est très importante à connaître au point de vue de l'étude des hématozoaires; ces granulations ont été prises en effet, plus d'une fois, pour des éléments parasitaires.

Au Congrès de Berlin (1890), Kollmann (de Leipzig) a appelé l'attention sur ces pseudomicrobes du sang humain normal. Lorsqu'on examine du sang humain normal recueilli avec les précautions antiseptiques, on constate, dit Kollmann, une quantité de petits corps qui ressemblent à des raicrocoques ou à des bacilles; ces corpuscules, dont les plus gros mesurent 0,5 de diamètre, sont animés de mouvements très vifs. L'examen par les réactifs colorants confirme qu'il s'agit de produits artificiels dérivés des hématies ou des leucocytes; les cultures dans les milieux ordinaires sont stériles.

b) Sang des autres mammifères. — Le sang de la plupart des mammifères ne diffère du sang de l'homme que par les dimensions des hématies ; encore ces dimensions sont-elles, pour quelques

espèces, très voisines de celles des hématies de l'homme.

Chez le singe, le chien, le lapin, les hématies mesurent 6 à 7 jx; chez le chat 5 à 6 [x; chez le porc 6 à 6,5 p.; chez le bœuf 5 à 6 [x; chez le cheval 5,5 [j.; chez le mouton 4,7 à 5 jj.; chez la chèvre -4 à 4,6 ;x; chez l'éléphant 9,5 [jt..

Chez les caméliens les hématies ont une forme elliptique; elles se distingaient d'ailleurs des hématies elliptiques des vertébrés ovipares par l'absence d'un noyau.

c) Sang des vertébrés à hématies elliptiques avec noyaux. — Les hématies ont la forme de disques aplatis à contour régulier, elliptique. Au centre de l'ellipse se trouve un noyau ovalaire, incolore ; le reste de l'hématie est imprégné de matière colorante (hémoglobine) et présente une teinte jaunâtre.

Il n'y a pas de membrane d'enveloppe proprement dite, mais un exoplasme mou qui peut laisser passer le noyau; le noyau s'échappe par un passage qui se referme derrière lui.

La surface du noyau n'est pas lisse, il y a une série de plis saillants séparés par des dépressions.

L'éosine, qui a pour l'hémoglobine une grande affinité, ne colore pas les noyaux des hématies, ce qui prouve que ces noyaux ne contiennent pas d'hémoglobine.

En trailanl le sang par l'alcool au tiers, on voit apparaître clans chaque noyau qui se gonfle un ou deux nucléoles. Les hématies à deux noyaux sont très rares.

Les dimensions des hématies elliptiques varient beaucoup chez les oiseaux, les batraciens, les reptiles et les poissons.

Oiseaux en général : les hématies mesurent : 15 à 18 [j. de long, sur 6 à 9 [j. de large.

Pigeon : 11 à 14 [jl de long, sur 6 [i. de large.

Grenouille : 15 à 16 ij. de long, sur 10 [x de large.

Tortue : 26 -x de long, sur 11 [x de large. Poissons : 9 à 16 [x de long, sur 6 à 10 ix de large.

Les hématies elliptiques présentent souvent des stries qui rayonnent du centre vers la périphérie ; ces stries sont produites par des plis de la surface qui se forment quand le contenu a subi une diminution de volume (Renaut).

Les leucocytes diffèrent à peine de ceux des mammifères; comme ces derniers, ils appartiennent à trois types ; mais les leucocytes des animaux à sang froid, ceux de la grenouille en particulier, sont animés de mouvements amiboïdes à la température ordinaire.

La fibrine donne lieu, dans le sang retiré des vaisseaux, à la formation defdaments qui se mon-

trent plus ou moins rapidement suivant l'élat du sang-, suivant aussi que le sang- a été exposé plus ou moins longtemps à l'air.

Dans le sang- étalé en couche mince des préparations histologiques ordinaires, la fibrine forme des réseaux très délicats avec des points nodaux occupés par des granulations plasmiques.

d) Organes liénialupuiéLiques. — Il paraît démontré que la rate, les ganglions lymphatiques et la moelle osseuse collaborent à la formation du sang-, bien que nous ne sachions pas exactement quel est le rôle de chacun de ces organes. Les hématozoaires ont souvent leur siège d'élection dans ces organes dits hématopoiétiques, dont l'étude anatomo-pathologique est inséparable de celle du sang; c'est surtout dans la rate, dans les voies lymphatiques ou dans la moelle des os qu'on trouve les formes parasitaires les plus variées, celles qui permettent le mieux de suivre les transformations des hématozoaires.

Les filaires ont leur siège d'élection dans les voies lymphatiques, et c'est là seulement qu'on peut rencontrer des individus adultes.

Les hématozoaires du paludisme ont leur siège d'élection dans la rate, qui par suite est toujours altérée dans le paludisme; contrairement à ce qui arrive pour les filaires, les parasites du paludisme n'envahissent pas les voies lymphatiques,

mais on les trouve en abondance dans la moelle

des os.

Le trypanosome des oiseaux doit être recherché surtout dans la moelle des os.

II. Altérations des éléments normaux du sang. — Les éléments normaux du sang, les hématies ea particulier, s'altèrent rapidement sous l'action de différentes causes, après que le sang a été extrait des vaisseaux; il importe de bien connaître ces altérations accidentelles, afin de ne pas les confondre, comme on l'a fait plus d'une fois, avec des altérations produites par des hématozoaires.

Supposons qu'une goutte de sang a été recueillie dans les meilleures conditions pour être soumise à l'examen histologique ; la goutte de sang a été exposée à l'air très peu de temps, on ne l'a mélangée à aucun liquide, le sang a été étalé en couche très mince entre deux lamelles couvre-objet et porte-objet; la préparation bordée à la paraffine est examinée à la température ordinaire du laboratoire.

Dans ces conditions, les hématies se présentent avec leurs caractères normaux dans les premiers moments de l'examen, mais au bout d'un temps variable (une demi-heure, quelquefois plus rapidement) on voit se produire des modifications importantes.

Les hématies pâlissent et prennent Taspect crénelé ; les bords sont festonnés et les crénelures qui existent sur les deux faces donnent lieu à de petites taches sombres ; en faisant varier la vis micrométrique on se rend facilement compte qu'il s'agit, non de taches, mais de petites saillies.

Les hématies pâlissent de plus en plus et finissent par devenir incolores et sphcriques; leur résistance dans une môme préparation est variable, si bien qu'on rencontre à côté d'éléments normaux, des hématies montrant des espaces clairs, crénelées, ou bien déjà décolorées et sphériques. Un grand nombre de causes peuvent hâter ces altérations des hématies et produire des altérations nouvelles.

Sous l'action de l'air, les hématies prennent rapidement l'aspect crénelé; aussi lorsqu'on veut examiner du sang frais, faut-il le mettre le plus vite possible à l'abri du contact de l'air; dans les préparations histologiques de sang frais, l'aspect crénelé apparaît en premier lieu sur les bords des préparations.

L'action de l'air produit en outre la coagulation rapide du sang, qui doit être évitée, les fdaments de fibrine étant gênants pour la recherche et l'examen des éléments parasitaires; la coagulation est très rapide en particulier dans le sang des oiseaux.

Lorsque le sang est soumis t une compression un peu forte les hématies se déforment, se fragmentent; à côté d'hématies normales ou plus ou moins altérées, mais reconnaissables encore, on trouve des fragments d'hématies dont l'aspect est extrêmement varié.

L'action de la dessiccation est très différente suivant qu'elle est lente ou rapide.

Lorsqu'une goutte de sang recueillie sur une lame porte-objet et recouverte avec une lamelle couvre-objet est abandonnée à une dessiccation lente, les hématies se confondent et forment des amas jaunâtres, en apparence amorphes; c'est avec beaucoup de peine qu'on arrive à reconnaître dans une pareille préparation quelques hématies très déformées.

Lorsque la dessiccation se produit très rapidement, les hématies sont au contraire fixées exactement dans leur forme (Welcker). Après avoir recueilli du sang en couche très mince sur une lamelle couvre-objet on agite la lamelle dans l'air et; mieux encore, au-dessus de la flamme d'une lampe à alcool; les hématies sont fixées si exactement dans leur forme qu'on a pu se servir de ce procédé pour les mesurer.

Sous l'influence de la dessiccation, même opérée rapidement et dans de bonnes conditions, on voit souvent se produire de petits espaces clairs dans l'intérieur des hématies {a-l fig. 1).

Ces vacuoles formées arlificiellement ont été dé-

Fig. 1. — a — l. Sang normal desséché — a, h, c, hématies avec lacune centrale, l'hématie c est crénelée. — d, e, f, h, hématies avec lacune centrale, au milieu de la lacune débris de l'hématie. — g, hématie avec plusieurs petites lacunes. — k, l, hématies délormécs avec lacunes centrales. — >n-y, altérations des hématies par la chaleur (57°). — m, n, o, premiers degrés de l'altération, les hématies ont des lacunes et sur les -bords se forment de petites boules sarcodiques. — p, q, r, altérations plus avancées, il se forme des prolongements animés souvent d'un mouvement oscillatoire; — s, t, u, v, degrés plus avancés de l'altération; les hématies se décolorent, diminuent de plus en plus de volume et en fin de compte on ne trouve plus que des granulations en chaînette x ou libres, y.

crites plus d'une fois comme des éléments para-

sitaircs; elles restent incolores sur les préparations traitées par les réactifs colorants, ce qui permet de les distinguer des protoplasmas parasitaires.

L'action de la chaleur comme celle de la dessiccation est très variable suivant les conditions dans lesquelles elle s'exerce. Lorsque la chaleur agit sur du sang frais, elle donne lieu à des altérations profondes des hématies et à la destruction complète de ces éléments lorsqu'elle atteint 57 degrés; au contraire, lorsque le sang est desséché, la chaleur est un des meilleurs procédés de fixation des hématies.

L'action de la chaleur sur les hématies à l'état frais a été bien étudiée par Max Schultze et par Ranvier.

Lorsqu'on met une préparation de sang frais sur une platine chauffante dont on élève peu à peu la température et qu'on examine la préparalion avec un grossissement de 300 à 400 diamètres, on constate ce qui suit :

Tant que la température est inférieure à 56 degrés C, on n'observe pas d'altérations des hématies; à 56 ou 57 degrés les hématies commencent à se déformer, elles deviennent sphériques et se séparent lorsqu'elles étaient empilées; sur les bords apparaissent de petites boules sàrcodiques qui deviennent de plus en plus saillantes, refoulées qu'elles sont par la sortie d'autres boules

semblables; il se forme ainsi des prolong'emenls de longueur et d'épaisseur variables qui sont animés quelquefois d'un mouvement oscillatoire. A côté de ces prolongements adhérents aux hématies on trouve des boules sarcodiques libres, animées d'un mouvement brownien.

Ces déformations augmentent avec l'élévation de la température ; à 70 degrés on ne trouve plus guère dans la préparation que de petits globules transparents, incolores, de volume variable {x-y fig. 1).

Ranvier a indiqué un procédé commode pour étudier ces altérations des hématies : après avoir fait une préparation histologique de sang frais on chautfe un petit barreau d'étain et l'on pose pendant quelques secondes l'extrémité chaude de ce barreau sur un point de la lame couvre-objet; au point de contact, les hématies sont détruites; mais en s'éloignant de ce point on trouve des hématies qui ont subi des déformations de moins en moins profondes.

Talamon a appelé de nouveau l'attention sur ces altérations des hématies et en particulier sur ce qu'il a nommé les déformations flagellaires.

Talamon produit ces altérations en plaçant la préparation de sang frais à 8 ou 10 centimètres d'un feu de coke très ardent; 10 à 12 secondes suffisent pour produire les déformations; la lamelle porte-objet appliquée sur le dos de la main

donne à ce moment ime sensation de brûlure assez marquée. Ce procédé expérimental ne vaut pas les précédents : si l'on chauffe trop la préparation, tous les globules du sang sont détruits; d'autre part on ne sait pas à quelle température se produisent les déformations.

Ces déformations des hématies ne se produisent qu'à 57 degrés, c'est-à-dire à une température qui n'est atteinte que lorsqu'on chauffe le sang par un procédé artificiel ; nous ne les avons jamais observées dans du sang qui n'avait pas été chauffé, alors môme qu'il s'agissait d'individus profondément anémiés ; or nous verrons plus loin que l'anémie est une condition prédisposante des déformations des hématies.

Lorsque le sang a été desséché avant d'être chauffé, les hématies supportent parfaitement une température de 100 ou 110 degrés, sans se déformer ; la chaleur a même pour effet de les fixer dans leur forme et de leur permettre de résister à l'action de réactifs qui les altèrent profondément à l'état frais ou lorsqu'ils ont été simplement desséchés.

Les conclusions pratiques à tirer de ces faits sont les suivantes :

Lorsqu'on veut conserver du sang desséché, il faut avoir grand soin de ne pas le soumettre à une température égale ou supérieure à 57 degrés avant de l'avoir desséché presque complètement; faute

de quoi les hématies subissent de profondes altérations.

En second lieu, il faut se rappeler que les espaces clairs qui se montrent dans les hématies desséchées sont fréquemment le résultat delà dessiccation.

La congélation altère profondément les hématies, l'hémoglobine se dissout dans le sérum, et les hématies réduites au stroraa deviennent très ^ pâles, puis incolores; en même temps elles prennent la forme sphérique.

L'eaic altère très rapidement les hématies, l'hémoglobine est dissoute, les hématies décolorées deviennent très difficiles à voir, elles perdent leur foi*me discoïde caractéristique pour prendre la forme sphérique. Il suffit de déposer sur la lamelle couvre-objet qui reçoit le sang une légère buée avec l'air expiré pour que quelques globules rouges se décolorent et prennent la forme sphérique (Hayem).

Il arrive souvent, lorsqu'on se procure du sang par la piqûre du doigt, que le sang se mélange à un peu de sueur; les hématies s'altèrent rapidement dans ces conditions, elles prennent l'aspect crénelé, avec des espaces clairs ; un certain nombre d'entre elles sé décolorent et deviennent sphériques.

L'action de l'eau se produit surtout sur le sang frais; elle est moins rapide et moins profonde sur

les hématies desséchées, surtoul lorsque la dessiccation date de plusieurs jours; néanmoins, quand on veut faire agir des solutions aqueuses sur du sang desséché, il faut toujours employer au préalable vm des moyens de fixation des globules rouges que nous indiquerons plus loin.

On peut se servir de la propriété qu'a l'eau de détruire les hématies pour mettre en évidence certains éléments parasitaires que l'eau n'altère pas (éléments en croissant dans le sang palustre).

Nous n'avons eu en vue jusqu'ici que les altérations des hématies provenant d'individus à l'état sain ; sous l'influence d'états pathologiques variés, les hématies peuvent subir des altérations dont nous devons maintenant nous occuper.

La vulnéi'abilité des hématies augmente sensiblement chez les anémiques.

Dans certains cas d'anémie grave, les hématies s'agglomèrent dans les préparations ; au lieu de globules empilés, on trouve des îlots lobulés jaunâtres (Hayem).

Chez les anémiques les hématies sont moins nombreuses et moins colorées que chez l'homme sain. Nous ne pouvons que mentionner ici les belles recherches de Hayem et Malassez sur la numération des globules et sur le dosage de l'hémoglobine ; l'exposé de ces recherches nous éloignerait de notre sujet, c'est-à-dire de l'étude des altérations des éléments figurés du sang pou-

vant donner lieu à confusion avec des hématozoaires.

Les hématies altérées des anémiques montrent presque toujours, lorsqu'on desséche le sang-, des vacuoles ou mieux des taches claires qui sont dues soit à une rétraction de l'hémoglobine, soit à une déchirure de l'hématie ; dans le premier cas l'éosine donne encore une coloration, très pâle, il est vrai, au niveau de la tache claire ; dans le deuxième cas, après coloration par l'éosine, la tache reste claire, incolore.

Lorsqu'on chauffe ou lorsqu'on comprime ce sang malade, on produit les altérations décrites ci-dessus, mais avec une facilité d'autant plus grande que les hématies s'éloignent davantage du type normal. On peut observer cà 50 degrés, par exemple, les altérations qui d'ordinaire ne se produisent qu'à 57 degrés.

Hayem a appelé l'attention sur certaines déformations des hématies qui s'observent dans les anémies profondes; ces déformations ont été rattachées par lui aux quatre types suivants:

1" Certains globules rouges parfois très volumineux ont la propriété de changer de forme sur place (contractihté amiboïde).

2» Certains globules rouges montrent des prolongements en doigt de gant immobiles ou mobiles; les mouvements de ces prolongements sont le plus souvent de simples oscillations; quelque-

l'ois il se produit un prolongement tenlaculaire

très délié.

5" Mouvement oscillatoire des globules nains qui restent en suspension dans le plasma.

4° Éléments se déplaçant dans la préparation (pseudo-parasites). Le plus souvent ces derniers éléments se présentent sous l'apparence de bâtonnets noueux, étroits, d'une longueur très variable.

« Ces pseudo-parasites sont animés d'un mouvement d'oscillation continue autour de leur axe vertical et, de plus, de mouvements d'inflexion suivant leurs faces. Il résulte de ce double mouvement et de l'irrégularité de leur contour que chacun d'eux considéré individuellement change constamment de forme, particularité qui, à elle seule, suffirait pour distinguer ces corps mobiles des parasites avec lesquels on pourrait les confondre.

(c Tel élément qui, à certain moment, a l'apparence d'un bâtonnet, prend tout à coup celle d'une petite masse arrondie portant une sorte de flagellum. D'autres fois, le bâtonnet simulant une bactérie s'incurve pour prendre la forme d'un V ou d'un petit triangle. Dans d'autres cas encore l'élément prend l'aspect d'un diplocoque.

« Quelle que soit leur forme, tous ces petits corps se déplacent activement dans la préparation, ï {Bulletin delà Soc. méd. des hôpitaux, 1890, p. 119.)

Browicz a constaté que les mouvements décrits par Ilayem persistent pendant plusieurs jours dans des préparations faites aseptiquement et qu'on peut les provoquer en élevant brusquement la tempéi'aturs du sang-.

Il parait évident, comme le dit Browicz, que ces mouvements ne sont pas d'ordre vital.

Mosso a prétendu qu'en injectant du sang- de chien dans la cavité péritonéale d'un oiseau on constatait, trois ou quatre jours après l'injection, des déformations des hématies du sang- injecté, analogues à celles que produit l'hématozoaire du paludisme.

Tous les observateurs qui ont entrepris de contrôler les recherches de Mosso ont constaté que ces assertions étaient inexactes.

A. Cattaneo et Monti ont injecté dix-huit fois du sang- de chien dans le péritoine des oiseaux (poulets et pig-eons) d'après la méthode de Mosso, et ils ont examiné le contenu du péritoine à des époques variant du premier au quinzième jour après l'opération.

Le sang injecté se sépare dans les . premiers jours en une partie liquide et un coagulura ; à mesure qu'on s'éloigne du moment où l'injection a eu lieu, la partie liquide diminue et le coagulum devient plus consistant.

On trouve dans la partie liquide et dans le coagulum des globules rouges (d'oiseau et de chien),

plus OU moins altérés, des globules blancs normaux ou granuleux, des cellules globuliféres ou pigmentifères analogues à celles qui ont été décrites par Bizzozero dans la moelle des os, qui paraissent dériver de l'endothélium péritonéal. Ces éléments du sang altéré ne sauraient être confondus avec les éléments parasitaires du sang palustre.

Marchiafava et Celli, qui ont reproduit l'expérience de Mosso, sont arrivés aux mêmes conclusions que Cattaneo et Monti.

Les hématies elliptiques présentent souvent des espaces clairs ou vacuoles qui sont parfois extrêmement nombreux dans les préparations de sang desséché.

Nous avons déjà eu l'occasion de signaler la déformation particulière aux globules elliptiques qui consiste dans l'apparition de stries rayonnant du centre vers la périphérie ; il s'agit d'un plissement de l'hématie qui a une certaine analogie avec la déformation qui donne aux hématies des mammifères l'aspect crénelé.

Les effets de la chaleur, de la dessiccation, de l'eau sur les hématies elliptiques sont, à très peu près, les mêmes que sur les hématies rondes. Le noyau des hématies elliptiques résiste à la destruction par la chaleur ou par l'eau.

Ici, comme pour le sang de l'homme, la résis-

tance des hématies est assez variable ; les hématies des gTenouilles et des tortues qui ont été soumises à un long- jeûne sont très difficiles à conserver; les hématies sont pâles, elles se déforment rapidement et présentent de nombreuses vacuoles.

III. Examen histologique du sang. Moyens de fixalion des éléments normaux. Action de quelques réactifs colorants sur le sang. — L'étude des hématozoaires doit être faite en premier lieu dans le sang- frais et pur; c'est le meilleur moyen de se préserver d'un grand nombre de causes d'erreur. Lorsque le sang frais a été recueilli dans de bonnes conditions et qu'on procède immédiatement à l'examen, les éléments normaux du sang se présentent avec leur aspect caractéristique, et les hématozoaires se distinguent facilement au milieu de ces éléments, d'autant plus qu'ils sont animés parfois de mouvements très vifs et très caractéristiques.

Dans le sang desséché les éléments normaux ont subi assez souvent des altérations : formation d'espaces clairs, fragmentation des hématies, etc., qui peuvent jeter le doute dans l'esprit de l'observateur lorsqu'il s'agit de la recherche des hématozoaii-es les plus inférieurs ; enfin on ne trouve plus que les cadavres des hématozoaires, qui peuvent être déformés, difficiles à reconnaître.

Examen dic sang frais. — Le procédé le plus simple pour étudier le sang de l'homme consiste à piquer le bout du doigt avec une épingle flambée ; des lamelles couvre-objet et porte-objet bien propres ont été préparées à l'avance. En pressant le doigt piqué on fait sortir une goutte de sang qui est recueillie sur une lame porte-objet et recouverte aussitôt avec une lamelle; le sang s'étale, on presse légèrement sur la lamelle couvre-objet de façon à obtenir une préparation suffisamment mince, le sang en excès est absorbé sur les bords de la lamelle avec un linge fin.

Les hématozoaires se présentent en général sous des formes trop caractéristiques pour qu'on soit exposé à les confondre avec les poussières qui se trouvent en suspension dans l'air ou à la surface de la peau; il n'est donc pas indispensable de recueillir le sang avec pureté ; il est bon toutefois de se mettre autant que possible à l'abri des poussières qui gêneraient l'examen.

Si le doigt du malade dont on veut examiner le sang n'est pas propre, il faut le laver à l'eau d'abord, puis à l'alcool, en ayant soin de le sécher complètement avant de faii'e la piqûre. Pour peu que la peau soit humide, le sang s'étale, se mélange àl'eau, etles hématies se déforment; au contraire, lorsque la peau est bien sèche, le sang qui sort par la piqûre forme une goutte bien limitée et saillante qu'il est facile de recueillir et dans laquelle

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les hématies ne se déforment pas, si Ton opère assez vite.

Lorsque la peau est couverte de sueur, il faut s'efforcer d'éviter le mélange du sang à la sueur ; on sèche la peau et l'on recueille le sang aussi vite que possible à sa sortie de la piqûre.

On peut border à la paraffine, mais cette précaution n'est pas indispensable; le sang qui se coagule sur les bords de la préparation, au contact de l'air, fait lui-même obturation; il reste hquide au centre pendant plusieurs heures, ce qui est suffisant pour les examens ordinaires. Lorsqu'on veut faire l'examen du sang avec de forts grossissements ou qu'on se propose d'étudier les mouvements des éléments parasitaires, il est bon de border à la paraffine afin de supprimer les mouvements que l'évaporation du sang imprime aux hématies.

Pour examiner le sang des oiseaux, on fait avec une épingle une piqûre à une des veines du pli de l'aile, après avoir enlevé quelques plumes; le sang est recueilli avec une pipette.

Pour avoir du sang du rat, on saisit la queue de l'animal avec une longue pince à travers les bar reaux du piège et l'on en coupe l'extrémité ; le sang qui s'écoule est recueilli directement sur une lamelle couvre-objet.

Chez la grenouille, on coupe un des doigts de l'une des pattes.

Chez le lézard, on coupe l'exlrémité de la queue.

Le grossissement à employer pour l'examen varie nalurellement avec la nature des hématozoaires qu'on veut étudier.

Examen du sang desséché. — Pour obtenir de bonnes préparations de sang desséché il faut se mettre à l'abri de toutes les causes d'altération des hématies qui ont été signalées plus haut; on opérera vite pour éviter l'action de l'air, on ne comprimera pas trop fortement le sang, on aura soin de ne pas le porter à la température de 57» avant d'avoir obtenu une dessiccation presque complète. Bien qu'il s'agisse d'un procédé d'examen très simple, nous croyons qu'il n'est pas inutile d'entrer ici dans quelques détails.

1° On nettoie avec soin quelques lamelles couvre-objets dans l'eau d'abord et au besoin dans l'eau additionnée d'acide chlorhydrique, puis dans l'alcool.

2» On recueille une goutte du sang à examiner sur une lamelle couvre-objet.

5° On applique aussitôt sur la première lamelle une deuxième lamelle, de manière que le sang s'étale en couche mince et uniforme entre ces deux lamelles.

4° On fait alors glisser les lamelles l'une sur l'autre, on les sépare et on les agite dans l'air; le sang, qui forme une couche très mince à la sur-

face de chaque lamelle, se dessèche rapidement.

5° On saisit à l'aide d'une pince chaque lamelle et on la passe trois fois dans la flamme d'une lampe à alcool, en ayant soin de ne pas tourner du côté de la flamme la surface recouverte de sang.

Le sang- desséché peut être examiné sans autre préparation, sans coloration, et ce procédé donne d'excellents résultats pour certains éléments parasitaires. La lamelle couvre-objet est placée sur une lame porte-objet et l'on borde à la paraffine; la préparation est montée à sec; le baume rendrait les éléments trop transparents.

Lorsqu'on se propose de soumettre les préparations desséchées à l'action des réactifs colorants en solution aqueuse, il est bon de fixer les hématies plus complètement qu'elles ne l'ont été parla dessiccation et parla chaleur.

Le mélange à parties égales d'alcool et d'éther, conseillé par Roux, fixe très bien les hématies; on verse quelques gouttes de ce mélange à la surface delà lamelle recouverte de sang desséché, on laisse en contact pendant quelques secondes; on sèche après avoir fait écouler le liquide en excès.

Les vapeurs d'acide osmique fixent bien les hématies, mais elles sont d'un emploi moins commode que le mélange d'alcool et d'éther. Le sang desséché est laissé pendant quelques secondes

au-dessus de rorifîce d'un flacon à large tubulure renfermant une solution d'acide osmique au centième.

On peut obtenir aussi la fixation des hématies par l'action prolongée de la chaleur (ctuve sèche, température de 100 degrés pendant 15 à 30 minutes), ou par les solutions des acides picrique ou chromiquc (acide picrique en solution concentrée, acide chromique en solution au lOOO*-').

Réactifs colorants. — Lorsqu'on veut colorer les éléments du sang frais, il faut avoir soin d'employer des réactifs colorants qui ne déterminent pas la coagulation du sang et qui n'altèrent pas les hématies. Les matières colorantes seront dissoutes dans du sérum naturel ou artificiel ou bien introduites directement dans le sang.

Le procédé suivant a élé recommandé par Soulié : on dépose une goutte de la Solution alcoolique de bleu de méthylène sur une lame porte-objet et on laisse évaporer; la goutte de sang est déposée au niveau de la tache formée par le bleu de méthylène et recouverte avec une lamelle, le bleu se dissout dans le sérum {Bulletin méd. de l'Algérie, 1890, p. 250).

En général il est préférable de faire agir les matières colorantes sur le sang desséché et fixé par un des procédés indiqués plus haut; on obtient des préparations persistantes.

Les procédés de coloration du sang et des hématozoaires sont aujourd'hui très nombreux; nous aurons à y revenir à propos de chaque hématozoaire en particuHer; nous ne pouvons indiquer pour le moment que les réactifs colorants les plus employés pour l'étude du sang.

L'éosine en solution aqueuse colore rapidement les hématies en rose ; elle a une grande affinité pour l'hémoglobine et par suite elle constitue un précieux réactif pour l'observateur qui étudie le sang et ses parasites.

L'éosine a aussi une grande affinité pour les granulations de certains leucocytes qui ont reçu à cause de cela le nom d'éosinophiles. On emploie la solution aqueuse d'éosine à 1 pour 100; il suffit de placer les lamelles de sang desséché pendant 20 à 50 secondes dans cette solution pour obtenir une belle coloration rose des hématies.

Le bleu de méthylène est également un réactif très précieux ; il se fixe sur les noyaux des leucocytes et sur les noyaux des hématies (sang des oiseaux, des reptiles et des batraciens), sans colorer les hématies.

En faisant agir sur le sang d'abord la solution aqueuse d'éosine et ensuite une solution concentrée de bleu de méthylène on obtient une double coloration très belle et qui rend de grands services dans l'étude du sang.

La lamelle colorée à l'éosine est portée dans la

solution aqueuse concentrée de bleu de méthylène pendant 50 secondes environ, lavée de nouveau et séchée ; on monte dans le baume.

L'hématoxyline préparée par le procédé de Latteux donne d'assez bons résultats ; elle se fixe sur les noyaux des leucocytes et des hématies nucléées et elle s'associe bien comme le bleu de méthylène à l'éosine.

Le violet de gentiane et le violet dahlia sont utiles dans quelques cas particuliers.

BIBLIOGRAPHIE

Welcker, Zeitschr. f. ration. Med. T. XX, p. 261. — ScHULTZE. Archiv. f. mikroscop. Anat. T. I, p. 1. — Ranvier. Traité technique cf histologie. — A. Gubler et Renaut. Art. Sang in Diction, encyclop. des se. méd. — Renaut. Art. Hématie. Même Diction. — Mosso. Arch. de Virchow, 1887, p. 205, et Rend, délia Accad. dei Lincei. T. III, fasc. 7 et 8. — Maragliano. Reale Accad. med. di Genova, 27 juin 1887. — Gattaneo et A. Monti. Altér. dégéner. des globules rouges. Arch. per le se. med. T. XII, n° G. — Hayem. Du sang et de ses altér. anat. Paris, 1889.— Du même. De la contractilité des globules rouges et des pseudo-parasites du sang dans l'anémie extrême. Soc. méd. des hûp., 21 février 1890. — Talamon. Soc. méd. des hôp., 26 février 1890, et Médecine moderne, 6 mars 1890. — A. Edington. Report on the morphology and development of the Blood. Brit. med. Journ., 51 mai 1890. — Browicz. Mouvements des globules rouges dans les anémies graves. 9" Congj-ès de méd. int., Vienne, 1890. — Kollmann. Sur les pseudo-microbes

du sang humain normal. Congrès de Berlin, 1890. — Ehrlicu. Farbenanalylischc Unlersuch. zur Histologie und Klinik des Blutes. Berlin, J891. — R. R. v. Limdeck. Grundriss einer klinischcn PaLhologic des Blules. Icna, 189'2. — Gilbert. Palhol. du sang in Traité de méd. de Charcot et Bouchard. T. II, p. 457. — E. Maragliano et Castellino. Sur la nécrobiose lente des globules rouges. Archiv. ital. di clin, med., 1891. — Metchnikoff. Leçons sur la pathologie comparée de V inflammation. Paris, 1892.