PRÉC RE SRE AC

NO où ne Det ed 0 mb Dh pb © © © NI Où OI fa C9 NO = ©

æh æù md mx x O1 RO NO

NO = ND NN = N CO CO En NO =ù =ù =à NO bd

où D dt pee =ù NO = où

ND ONOI:=C0 x x mù NO O1 C0 O7 CD CO NO x NO

à © En

à Lo >

Ces résultats, sensiblement plus rapides que ceux que l’on oblient des méthodes d’inoculation au cobaye, ont

pu cependant paraître trop longs encore à obtenir. Divers auteurs, en particulier Saenz Costil, Maneau, Valtis et Hisendrath en France, Bonino, Bruni et Di Pierro en Italie, ont préconisé une méthode de diagnostic accélérée: c’est le râclage des milieux bien avant l'apparition des colonies, tel que le pratiquait systématiquement Lowenstein, mais ici, il s’agit d’un examen anticipé et non d’une recherche supplémentaire,

L'avantage de cette pratique est double: Mise en évidence très rapide des bacilles, la micro-culture peut être positive dès le cinquième jour (en moyenne du huitième au douzième) ; elle réalise aussi un véritable repiquage, d’où apparition de colonies longuement étalées et par conséquent beaucoup plus riches.

Pour cette recherche des micro-cultures, voici comment procéder. Toute la surface du milieu est soigneusement râclée avec une anse de platine, en évitant de faire des écorchures ou des sillons. La manipulation | aura lieu près d’un bee Bunsen allumé pour éviter que le milieu ne se contamine par des moisissures; il doit, en effet, passer encore un long séjour à l’étuve.

Le produit de râclage est ensuite étalé à la surface d’une lame de verre et coloré selon le procédé de Ziehl- Ncelsen, et examiné au microscope. Le premier examen sera assez précoce, vers le cinquième ou le sixième jour, et s’il est négatif, recommencé avec d'autres tubes. L'examen direct sera très soigneusement fait et prolongé assez longtemps. Il doit mettre en évidence des bacilles alcoolo-acido-résistants typiques, rarement ïsolés, le plus souvent groupés en petits amas, véritables débuts de colonies.

L'intérêt d’un pareil procédé est évident, mais n’estil pas exposé à de sévères critiques? Bruni, considère que les résultats sont aussi sûrs que ceux de l’énreuve biologique. Bonino trouve, dans la recherche des microcolonies, des résultats constants et rapides; il estime que l’on ne peut pas rencontrer dans les urines des

germes acido-résistants pouvant se confondre avec le hacille de la tubereulose et il conclue que pour toutes ces raisons, la méthode des micro-cultures par le diaenostie du bacille de la tuberculose, ne peut être faussé, même si l’urine n’est pas prélevée avee une sonde.

Saenz et ses collaborateurs, Costil et Eisendrath ne sont pas aussi affirmatifs ou du moins introduisent une restriction, en précisant qu'il s’agit de micro-colonies repiquables. Il existe, en effet, des micro-colonies non repiquables: de quoi s’agit-1? Nous avons déjà signalé, au sujet des causes d'erreurs de l’examen direct et de l’homogénéisation, la présence toujours possible de bäcilles acido-alcoolo-résistants non tuberculeux ou de cadavres de véritables bacilles de Koch. (‘es mêmes sermes peuvent se retrouver à la surface des milieux de cultures, soient qu'ils proviennent des produits pathologiques ensemencés, soit qu'ils proviennent du milieu lui-même où ils ont été introduits avec le lait ou les œufs. Et voilà pourquoi Saenz et ses collaborateurs précisent micro-colonies repiquables. Les bacilles morts ne se reproduisent pas et ceux que la culture recherchent, ce sont les bacilles vivants et qui se multiplient arm point de donner des colonies macroscopiquement visibles. La culture du bacille de Koch est une véritable épreuve biologique. La présence des micro-cultures à la surface des milieux ne saurait done pas autoriser le laboratoire à donner une réponse formelle, il ne s’agit pas d’une preuve scientifiquement établie. Il n’en demeure pas moins vrai qu'en s’entourant de toutes les précautions possibles, l’existence des micro-cultures constituent un renseignement précieux; la présence de bacilles acidorésistants non tuberculeux est rare, leur présentation en petits amas est exe eptionnelle ; quant aux bacilles provenant des milieux eux-mêmes, il est facile d'examiner des tubes témoins provenant du même lot que les milieux en cause, La micro-culture constitue done un renseignement remarquablement précoce, mais ne doit avoir la valeur que d’une simple orientation.

l'est bon de ne pas pratiquer la recherche des micro-