IL. Milieu ras — (Centr. sos Bakt. Orig. Bd
A 509 grammes de viande de bœuf hachée, on ue 1 litre d’eau ; 10 grammes de peptone ;
5 grammes de sel; 30 grammes d’agar.
On cuit bien, on filtre, on neutralise, et après neutralisation, on ajoute 10 c. c. d’une solution de soude à 10 p. 100.
On ajoute 10 grammes de lactose et 5 c. c. d’une solution alcoolique de fuchsine.
Le milieu est rouge.
On ajoute 25 c. c. d’une solution à 10 p. 100 de sulfite de soude, Quand le milieu est refroidi, il est décoloré.
Il subit une stérilisation définitive.
SNL 1; ras
NoTE. — Le lactose doit être chimiquement pur.
La solution de sulfite de soude doit être fraîchement préparée.
Le milieu doit être conservé à l’obscurité. La solution de fuchsine est la suivante : à 100 c. c. d’alcool à 96°, on ajoute 10 grammes de fuchsine cristallisée, on laisse reposer vingt heures, et on décante.
Sur ce milieu, les colonies d’Eberth sont absolument transparentes et incolores. Les colonies de coli sont rouges, mordorées.
III. Milieu de Lœf fler : agar ou vert malachite. (Deutsche Med. Wochen., 1907, 26 sept., n° 39).
À 5 litres de bouillon (1 livre de viande de bœuf ou de cheval pour 2 litres d’eau) on ajoute 150 gr. de Stangenagar et on cuit une demi-heure. Si l’agar se dissout mal, on ajoute 35 c. c. d’une solution normale de potasse caustique. Puis, on neutralise exactement au papier avec du carbonate de soude.
Après neutralisation on ajoute 25 c. c. d’une solution normale de soude et on cuit le milieu qui est faiblement alcalin.
Au milieu chaud on ajoute 500 c. c. d’une solution aqueuse à 10 p. 100 de nutrose.
On cuit à nouveau et on répartit le milieu dans des boutgilles d’un demi-litre que l’on porte à deux jours d'intervalle deux heures dans la marmite de Koch. Il se fait dans les flacons un dépôt, on décante l’agar clair qui surnage.
A 100 c. c. de cet agar liquifié à 50° on ajoute
APCE
1c.c., 5 d’une solution à 0,2 p. 100 de « Malachitgrûn chemisch. rein. »
Avant de verser le miliew dans les boîtes de Petri, on y ajoute encore 3 p. 100 de bile de bœuf stérilisée.
Comparaison des différents milieux :
Ces différents milieux ne présentent aucune difficulté de préparation, cependant il résulte des recherches comparatives faites au laboratoire de l'Ecole du Service de santé, par M. le médecinmajor Braun que le milieu d’Endo (gélose fuchsinée lactosée, décolorée par le bisulfite de soude) est le plus simple et le moins coûteux.
Le litre de milieu Drigalski-Conradi, coûte 5 fr.
Le litre de milieu d’'Endo ne coûte que 2 fr. 50.
Nous recommandons d’une façon toute spéciale le milieu d’'Endo qui est d'emploi courant au laboratoire d’expertises bactériologiques de l'Ecole du Service de santé militaire.
Klinger qui, dans sa thèse inaugurale, a étudié la valeur comparative de ces différents milieux pour la recherche du bacille d’Eberth dans le sang, dans les urines ou dans les selles a obtenu les résultats suivants :
Milieu Drigalski, 35 p. 100 de recherches positives. Milieu d'Endo, 55 p. 100 de recherches positives. Milieu de Lœæffler ou vert malachite, 68 p. 100. Le milieu de Lœæffler paraît, quant à présent, le plus parfait pour la recherche du bacille d’Eberth.
