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alcools {un seul, si le dissolvant est de l'alcool ou du dioxane) pour éliminer le dissolvant avant de passer dans l’eau. |

La suite des opérations de coloration et de montage s’effectueront comme sur des coupes à la paraïfine.

Les principaux insuccès et leurs causes.

Il arrivera parfois que les coupes se feront mal. Voici donc exposés les principaux incidents que nous avons pu constater et auxquels nous pouvons rémédier facilement dans la plupart des cas.

1° La coupe est partielle, elle n’intéresse pas toute la surface du bloc dont elle ne constitue qu'un copeau. Il y a à cela deux causes essentielles : on ne fait pas agir assez l'haleme, ou le rasoir n’attaque pas le bloc par sa tranche mais tangentiellement par surface ; dans ce dernier cas, on continuera de couper jusqu’au moment où le rasoir entamera par la tranche. Les coupes alors, se feront normalement.

2° La coupe se plisse exagéremment, les plis se collent entre eux, on ne peul l’étaler sans la briser.

Causes : a) On fait trop agir l'haleine. La couche su-

perficielle est alors trop molle et les bords des plis se collent.

b) Le bloc n'est pas assez polymérisé ; le séjour à 56° a été insuflisant où bien des impuretés, introduites accidentellement, ont troublé la marche de la polymérisation. Dans ce cas, on pourra essayer de refroidir le bloc à la

0e pu

glacière, 24 heures, dans un flacon bien bouché renfermant quelques morceaux de chlorure de calcium.

c) Le rasoir ne coupe plus.

3° On entend un bruit de raclage ; la coupe présente des zones alternativement épaisses et minces correspondant aux vibrations du rasoir, ou même se rompt suivant des lignes correspondant aux zones minces lorsqu'on cherche à l'étaler.

Causes : a) On ne fait pas agir assez l'haleine.

b) Le rasoir est trop incliné.

c) Le bloc est trop dur, la polymérisation a été trop poussée. Il n'y a alors rien à faire.

4° Il ne se fait qu'une coupe sur deux ou'trois ou bien il y a alternance d’une coupe épaisse et d'une coupe mince.

Causes : a) Le bloc n’est pas assez polymérisé ; 1l esl élastique el se laisse refouler par le rasoir.

b) Le rasoir n’est pas assez incliné.

c) Les glissières du microtome ou bien sa vis micrométrique ont du jeu. |

5° La coupe présente des stries ou des déchirures longitudinales.

Causes : Le rasoir est ébréché: On remarquera que les plis se collent souvent au niveau des stries et que l'étalement peut être, dans ce cas, très laborieux, ou même

impossible.

6° La pièce se sépare de la masse au moment où se

fait l'étalement, la pièce se déchire.

Cause : Déshydratation insuffisante ; la masse d'inclusion pénètre mal. Ne pas raccourcir les temps indiqués ; vérifier que le dernier dioxane est bien anhydre.

Tels sont les quelques incidents qui peuvent interrompre la confection des coupes. Il sera souvent facile d'y remédier. C’est généralement une question de réglage de l'inclinaison du rasoir et d'intensité dans l'action de l'haleine sur le bloc avant la confection de la coupe. Normalement, on doit toujours arriver, en combinant ces deux facteurs, à couper un bloc correctement fait selon les indications que nous avons données.

Lorsqu'on sera parvenu à faire des coupes régulières de 5 », on essayera de diminuer progressivement l’épaisseur et, dans les cas favorables, on pourra descendre ainsi jusqu’à 2 pu.

Telle est la réalisation pratique que nous avons mise au point d'un procédé d'inclusion histologique dans l’acéiate de vinyle polymérisé. Cette technique est, assurément, plus longue et plus complexe à mettre en œuvre qu'une simple inclusion à la paraffine, Mais, dans un certain nombre de cas, elle présente sur celte dernière méthode des avantages considérables qui, dans ces cas, justifieront amplement son usage.

[nous reste donc à exposer ces avantages en essayant

de les expliquer et ce faisant à dégager les indications à l'emploi de cette méthode.

Mais auparavant, nous résumerons ici rapidement l'ensemble des opérations :

1° Déshydrater par 4 bains de dioxane d’une durée totale de 48 heures.

2° Imprégner par 2 bains d’acétate de vinyle d'une durée totale de 24 heures.

3° Préparer la masse d'inclusion en faisant bouillir jusqu'à consistance sirupeuse, sous réfrigérant ascendant, une solution à 3 % de peroxyde de benzoyle dans l’acétate de vinyle.

4° Déposer avec cette masse la pièce dans un moule hermétique de gomme et de cellophane : chauffage à 37° 48 heures, à 56° 48 heures également.

5° Démouler, coller sur un socle avec de la colophane. Couper au microtome Minot,.

6° Elaler les coupes en les faisant flotter sur de l’eau ; les recueillir sur lames albuminées, sécher sur la platine chauffante.

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