RE ONE

coup plus net après une différenciation au perchlorure de fer. Des recherches précises sur les facteurs pouvant influer les résultats, nous ont montré que toutes choses

élant égales d’ailleurs :

1° Les résultats les meilleurs sont obtenus lorsque les deux ions mordanceux opposés sont en quantité équivalentielle.

2° L'acide phosphomolybdique agissant seul comme: mordant, donne une mauvaise différenciation, un métal agissant seul ne montre pas le chondriome. Le mélange des deux agissant d'autant mieux que l'on se rapproche de la proportion définie ci-dessus.

3° L'hématéine est un meilleur agent colorant que l'hématoxyline. Les solutions fraiches à l'hématéine sont meilleures que les vieilles.

4° Les métaux bivalents, à part l'argent, sont seuls actifs ; par ordre d’acüvité on classe lom en tête le nickel, puis le Cobalt, le mercure, le cuivre, le zinc, le baryum. Les métaux trivalents sont inactifs, le fer bivalent est oxydé par l’acide phosphomolybdique en fer trivalent et ne donne, par conséquent, aucun résultat. |

5° La solution colorante doit être neutre. Les moindres traces d’acidité ou d'’alcalinité dans la solution fraîche d'hématéine diminuent considérablement l'intensité et l'élection de la coloration.

6° Le formol salé neutre est le meilleur fixateur, le plus fidèle au point de vue morphologique.

7° La concentration optimum du formol dans le fixateur est de 10 % avec une durée de fixation de 15 jours à 3 semaines.

Out

Ceci posé, il devient facile de définir Dis NRRenE la technique de coloration.

Fixalion. — Formol salé isotomique, à 10 % de formol neutralisé, pendant 15 jours à 3 semaines.

Inclusion. — Par la technique au polyvinyle. Les coupes collées sur lames et débarrassées de la masse d'inclusion sont lavées à l’eau ordinaire, puis distillée.

Mordançage. — 15 minutes dans la solution :

Acide phosphomolybdique à 1 % .... 20 cc.

mi Sea OS ee VONT ANR NES 15 6700.

qui se conserve longtemps.

Lavage à l’eau ordinaire, puis à l'eau distillée. Pendant le temps de mordançage on préparera dans un tube à essai de petite taille la solution colorante avec : DHÉMARMÉND EME Tee 2 mm.

NÉOOERSOMA RER ee 5 gouttes Chauffer quelques secondes pour dissoudre {la dissoluton n'est d’ailleurs jamais complète) et ajouter :

FH OADIUSAIÉenMO EEE MESA 20 gouttes

Coloration. — Verser le contenu du tube sur la lame et colorer en agitant à chaud jusqu'à émission de vapeurs. Un bec Bunsen, réglé bas, ou mieux la plate chauffante électrique du Prof. Poricarp, seront utilisés

(1) Pratiquement une pointe d’aiguille lancéolée. (2) L'alcool ordinaire est fréquemment un peu acide. (83) A défaut, on utilisera l’eau distillée ordinaire.

pour le chauffage. En 2 à 3 minutes, la coloration est devenue intense, noir bleuté. | Lavage à l'eau ordinaire jusqu'à virage au bleu franc.

Différencialion. — Agiter la lame dans du perchlorure de fer official ; interrompre de temps à autre pour contrôler au microscope le résultat de l'opération, généralément assez rapide (3 à 4 minutes au plus, mais souvent 30 à 40 secondes). Pratiquement l'expérience apprendra la pratique de la différenciation selon l'élément où l’on désire mettre en évidence le chondriome.

Lavage 15 minutes à l'eau ordinaire. Montage selon les procédés habituels, après avoir fait si on le juge utile, une coloration de fond à l’érythrosine ou par tout autre colorant d’aniline.

Résultats de la coloration. — Le chondriome est bleu foncé sur le fond bleu clair du cytoplasme. Le noyau est bleu violacé, la nucléole rouge brique. Les grains de sécrétion séreuse prennent la coloration brique analogue à celle du nucléole, mais plus intense, alors que les myofibrilles lisses et les disques sombres des fibrilles striées se colorent comme le chondriome.

Les hématies en violet clair ne sont pas gênantes comme par les techniques de Regaud par l'intensité de leur coloration.

Les résultats sont très constants ; toutes les opérations de coloration étant faites sur coupes. On peut toujours arriver à colorer correctement le chondriome, après quelques essais, en agissant sur le mordançage, la coloration, la différenciation. La planche III montre le chondriome intestinal coloré par cette technique.