IRE

Mordancer dans le lugol 1/2 heure ; Laver à l’hyposulfite de soude à 5 % ; Laver à l’eau ;

Colorer 10 minutes environ dans :

ÉrYIDrOSine. 0... REC EU S 0 gr. 20 OranseiG 7 OP RARE INSEE Eau distilléer peer eme ere 1008CC:

Laver à l’eau distillée ; Colorer au bleu de Toluidine à 1 % pendant 2 minutes ; Laver à l’eau distillée ; Différencier à l’eau acétifiée à 1/500 ; Alcool absolu (pas d’alcool à 95°) ; Xylol-Baume.

ou avec une variante, au bleu Borrel :

Début idem.

Bleu de Borrel à l'argent ;

Décolorer au glycériné « the mishung Grubler » ; Décolorer à l’alcool absolu dilué à 5 % ;

Arrêter la décoloration quand la coupe devient violacée ; Rincer à l’eau ;

Continuer par l’alcool absolu.

Sur les pièces fixées au Bouin ou prélevées à l’autopsie, la coloration à l’éosine-bleu de méthylène nous a donné de très bons résultats :

Eosine à 1 0/00 pendant 24 heures ;

Bleu de méthylène : quelques secondes à quelques minutes ;

Agiter dans l'alcool à 95° jusqu’à différenciation ;

Alcool absolu ; xylol ;

Bleu de méthylène : solution phéniquée 1 %.

Dans cette solution phéniquée, introduire 1 gr. de bleu de méthylène pour 100 cc. de solution.

2° COLORATION DU TISSU CONJONCTIF A. —- TISSU COLLAGÈNE

Pour le mettre en évidence, nous avons eu surtout recours à l'excellente méthode de Heidenhain à l’azo-carmin : Coloration :

Après déparaffinage, laver la coupe à l’eau distillée.

pce

La mettre dans l’azo-carmin 45 à 60 minutes à une température de 56°, en vase bien fermé.

Laisser refroidir à la température de la chambre.

Eau distillée.

Différenciation dans l'alcool aniliné :

AUCOOÏA RO OR ET 1.000 cc.

ÉTÉ NUIN eee 1 cc.

Afin d'arrêter la décoloration, lavage dans l'alcool acétifié à 1 % pendant 1/2 à 1 minute.

Acide phosphotungstique à 5 % pendant 1 heure. Bleu d’aniline orange : 1 heure.

Très court lavage dans l’eau distillée.

Très pen de temps aussi dans l'alcool à 95°.

Alcool absolu.

Xylol.

Baume.

Résultats : Le tissu collagène apparaît en bleu vif.

B. — RÉTICULINE

Il faut, pour voir les fibres de réticuline, utiliser les méthodes d’imprégnation argentique.

On peut employer avec succès :

1° Soit la méthode de Bielschowsky-Maresch:

Fixateur : Formol.

Nitrate d’argent à 2 %, 24 à 28 heures. Eau distillée.

Solution d'argent ammoniacal.

Eau distillée : au moins 30 minutes.

Formol as 1/2#heéure:

Lavage rapide à l’eau courante.

Chlorure d’or è 1 %: 1 heure.

Eau de source.

Hyposulfite à 5 % : 2 minutes.

Eau courante : 6 heures.

Alcool, Xylol, Baume.

2° Soit la méthode de Foot :

Pour la mise en évidence des fibres grillagées au niveau des fragments fixés au Zenker-Heliy, etc. et inclus en paraffine. Déparaffiner.

Lugol: 5 minutes.

Hyposulfite.

Eau courante.

Permanganate de K à 0,25 % : 5 minutes.

Lavage à l’eau courante.

Acide oxalique à 5 % : 15 à 30 minutes.

Lavage en eau courante.

Rincer à fond à l’eau distillée.

Nitrate d'argent à 2 % : 48 heures à faible lumière, ou mieux dans l’obscurité.

Eau distillée à fond.

Nitrate d’Ag. ammoniacal : 1/2 heure.

Eau distillée.

Formol à 5 % (formaldéhyde à 2 %) : 1/2 heure, jusqu’à ce que les coupes soient bien foncées.

Eau courante.

Chlorure d’or à 1 Z : 1 heure.

Eau courante.

Hyposulfite de soude à 5 % : 2 minutes.

Lavage en eau courante : plusieurs heures.

Alcool, xylol, baume.

Préparation de l'argent ammontiacal :

Préparer fraichement :

Nitrate d’argent à 10 Z : 20 cc.

Soude caustique à 40 % : 20 gouttes.

Ammoniaque jusqu'à dissolution du précipité (pis d’excès d’ammoniaque !).

Ajouter eau distillée jusqu’à 80 cm.

Remarque : Autant, pour les cellules, il y a intérêt à colorer des coupes très minces, autant pour la mise en évidence des fibres réticulées il est avantageux d'utiliser des coupes d'épaisseur moyenne. Il est essentiel, en tout cas, de ne pas varier l'épaisseur des coupes, si l’on veut apprécier exactement la densité des fibres.