MENSURATION DES GLOBULES 1° GLOBULES CIRCULAIRES

C'est de la mensuration des globules que l'expert trera dans l’état actuel de la science, la preuve la plus sérieuse, la moins discutée de l'espèce du sang. C'est la seule qui, en dehors de conditions exeptionnellement heureuses, permet d'arriver à une grande probabilité, quelquefois même à la certitude. Les premiers observateurs qui étudièrent le sang au microscope dûrent être frappés de la remarquable différence qui existe entre les globules des mammifères et ceux des autres vertébrés. Les hématies des premiers (les caméléens exceptés) sont parfaitement circulaires, sans noyau, légèrement déprimés au centre; ceux des ovipares sont elliptiques et caractérisés par un noyau évident. Et cependant ce n’est que très près de nous, en 1842, que Mandl soutint qu'on peut distinguer en medecine légale, à ce caractère, le sang des mammifères de celui des ovipares, et Orfila lui-même, s’inscrivit contre cette assertion. Ceux qui ont cherché à extraire, des taches de sang, des globu-

les intacts, excusent facilement le grand maître de son erreur.Mais,dès 1857,M. Robin, à qui lamicrographie est redevable de tant de remarquablestravaux,prouve que le microscope peut non seulement faire distinguer les hématies circulaires des hématies elliptiques, mais il n'hésite pas à conclure dans une expertise que le

sang examiné devait être du sang humain. Puis Richardson, Culliver, et plus près de nous les: médecins experts des tribunaux de St-Pétersbourg, Cornil, Malassez, Lacassagne, Tourdes, Vibert, Cauvet, Morache, Dragendorff, etc., affirmèérent, après Robin, tant par leurs enseignements que par leurs rapports, que la mensuration des globules peut, en médecine légale, permettre de distingner entre eux les diverses espèces de sang. Nous devons ajouter, cependant, que de grandes autorités scientifiques dans un esprit de sage prudence, qui les honore, ont nié que ce fut possible ; nous estimons qu’ils ont été malheureux en cela, car il est certain que si, découragé, on ne s'était pas acharné à ces laborieuses recherches, dans bien des cas des Imnocents eussent été condamnés ; nous en avons cité plusieurs exemples déjà et nous pourrions en citer d’autres encore. Tandis qu'il n'est pas en notre connaissance que, dans les cas où les experts ont conclu affirmativement à la présence des globules humains, les faits soient venus les contredire.

D'ailleurs quelque précises que puissent être nos méthodes de recherches, jamais nous ne pourrons conclure que les globules trouvés proviennent nécessarement du sang humain; cela est impossible ; mais à tout instant nous trouvons des rapports, où . des experts ont pu, en toute certitude, affirmer que le sang examiné ne pouvait être du sang humain et faire rendre la liberté à des innocents. Que ces résultats si consolants pour l'expert, l’engagent à se rompre aux difficultés sans nombre, qui se dressent

sans cesse devant lui pendant ces délicates recherches. |

Parmi ces difficultés les plus arides proviennent des globules eux-mêmes ; nous avons vu déjà les diverses altérations qu'ils subissent et quelles peines l’on a pour les trouver dans la tache.

La dessiccation les a nécessairement ratatinés, déformés, et si nous arrivons à rendre à ces globules quelque chose de leur aspect primitif, saurons-nous s'ils sont revenus à leur diamètre normal : sont-ils plus grands, sont-ils plus petits? Et quelle est sur eux l'influence du support ? de l’âge? des saisons? L'expérience prouve contre toute attente, que d’un grand nombre de taches on peut extraire des globules assez intacts, pour que des mensurations satisfaisantes puissent en être faites. Une écaille de sang d’un millimètre de côté, contient plusieurs nuilhons de globules; quoi d'étonnant à ce que souvent il en reste deux cents intacts. C’est tout ce qu’il nous faut pour nous prononcer.

Nous aurons à étudier successivement les instrument nécessaires, les liquides conservateurs, le choix de la tache et enfin le manuel opératoire.

1° Instruments. — L'expert qui veut se faire une idée exacte du diamètre des globules, doit de toute nécessité posséder un microscope muni de puissants grossissements, etde deux micromètres, l'un oculaire, l’autre objectif. Un grossissement de mille diamétres (Vibert) est des plus convenables, mais on arrive à de très bons résultats avec des grossissements moin-

dres, tels que 700 à 800 diamètres, d’un maniement plus commode. Lorsque le pouvoir amplifiant du microscope estexactement connu, l'oculaire micrométrique suffit. Ces oculaires renferment une plaque de verre graduée en 1/10 de millim. et placée au foyer du verre supérieur. Le grossissement de cette lentille est de 10 diamètres. En sorte que l’on a sous les yeux une échelle dont chaque division répond à un millim. Supposons qu’on observe un globule dont l'image recouverte par l'échelle de l’oculaire occupe 6 divisions de celle-ci, soit donc 6 millim. Admettons que le pouvoir amplifiant du microscope soit de 800 diam., par exemple, le globule sera vu sous un diamètre 800 fois trop fort, son diamètre sera $5+ — 0,0075. Si le pouvoir amplifiant n’est pas connu, 1l est établi au moyen du micromètre objectif. Gelui-c1 consiste en une lame de verre montée sur cuivre et portant une échelle représentant un millim. divisé rigoureusement en centièmes.

De même que toute échelle, chaque dixième division est marquée par une ligne plus longue, et chaque cinquième par une ligne d'une longueur intermédiaire. On place ce micromêtre objectif sur la platne du microscope et on met au point, opération délicate, facilitée si l'onse guide sur les fines poussières qui souillent le micromètre non essuyé. Supposons que chaque division de ce micromètre soit couverte exactement par une division de l’oculaire micrométrique, le microscope grossira cent fois, puisque chaque centième de millimêtre est vu sous une amplitude répondant à un millimètre. S'il faut huit di-

visions de l’oculaire pour couvrir une seule division du micromètre objectif, le microscope grossira 800 fois. Ce procédé est le plus simple et aussi le plus rigoureux de tous.

Le micromètre objectif est coûteux et l’on peut s’en passer, si l’on possède une chambre claire ; voici comment nous procédons : nous dévissons le micromètre oculaire et nous en sortons la lame divisée ; celle-ci est placée sur la platine du microscope et mise au point. On adapte la chambre claire, et l'œil voit alors nettement les divisions du micromèêtre considérablement amplifiées, projetées sur une feuille de papier que l’on a placée à la distance de la vue distincte, comme toutes les fois que l’on se sert de la chambre claire. On a tracé préalablement sur le papier une échelle en millimètres ; on amène l’image projetée sur l’échelle tracée sur le papier : supposons ici encore que les divisions coïncident et se superposent exactement, l'échelle du micromètre répond à 1/10 de millimètre, le grossissement sera égal à 10, puisque le dixième de millimètre répond à un millimètre de notre échelle.

Sile microscope grossit 200 fois, 20 divisions de l'échelle tracée sur papier seront nécessaires pour couvrir une seule division de la glace micrométrique observée. Pour plus de détails, on devra s'adresser aux auteurs classiques (Monoyer, Physique méd.; Buignet, Manipulations dephysique). En ce quinous concerne, uous n'avons pas besoin de connaitre le grossissement réel du microscope, ce grossissement

tombe, le plus souvent, sur des fractions qui compliquent les mensurations, ce qu'il faut éviter.

Voici comment on tourne cette difficulté : le micromèêtre objectif est placé sur la platine, et on observe avec objectif puissant et l’oculaire micrométrique, on met au point: les divisions ne coïncident pas, mais en tirant ou en enfonçant le tube portant l’objectif (tube de tirage) on amène, à volonté, les lignes exactement en coïncidence : supposons que chaque division du micromètre objectif soit recouverte par 5 divisions de l'oculaire micrométrique, on saura que 5 divisions de celui-ci répondent à 1/100 de millimètres. Donc chaque division de l’oculaire est égale à 1/100 de millimètre, divisé par 5 — 0""002. II suffit mamtenant de tracer au moyen d’une pointe fine, une ligne circulaire sur le tube de tirage, pour avoir une ligne de repère qui servira à amener toujours le microscope au grossissement.

Tel est le procédé que nous suivons et que nous conseillons de préférence aux autres. On sait une fois pour toutes combien vaut chaque division du micromèêtre oculaire. Si un globule est recouvert exactement par quatre divisions, il aura pour diamètre, 4 X 0"”"002 —0,008; on voit par cet exemple combien sont facilités les calculs.

Quand on dispose d’une chambre claire, on peut dessiner les globules et mesurer l’image obtenue : qu'on emploie un grossissement de mille diam., chaque mill. de l’image obtenue correspondra à 1/1000 de mull. de l’objet observé.

I suffit done de mesurer les images pour avoir le

rte

diamètre réel de l’objet. Ge procédé est très long, moins rigoureux qu'il ne semble et exige une très grande habitude. La feuille de papier doit être inclinée suivant une ligne parallèle à l'angle du prisme, sinon un globule rond donne un dessin ovale, et deux lignes parallèles de l’objet divergent sur l'image à mesure qu'elle s'éloigne du microscope. Quel que soit le procédé admis, on vérifie le diamètre des globules sanguins de l’homme et des principaux animaux, afin de se familiariser avec les mensurations ct acquérir une habitude indispensable à la bonne réussite des opérations. On ne sera pas absolument certain d'arriver à trouver pour le globule de l’homme, par exemple, O mill. 0077. Une moyenne de cent mensurations pourra donner un peu plus ou un peu moins, mais en opérant rigoureusement, on aura toujours une erreur dans le même sens, erreur pouvant tenir à une faiblesse ou à un excès de grossissement (1” procédé); à une imperfection du micromètre objectif, à un petit défaut des opérations préliminaires ; cette chance d'erreurs se répétant dans le même sens et sur toutes les espèces de globules n’entachera pas les résultats définitifs, si des essais nombreux et multipliés sur les globules d'un grandnombre d'animaux ont édifié l'expérimentateur.

On arrivera toujours à avoir exactement les lonoueurs relatives des globules, à défaut de leur lonoueur absolue, et c'est là le point important.

Le diamètre absolu moyen, d’ailleurs, des divers globules n’est pas exactement connu. Voici un tableau où nous avons réuni les chiffres trouvés par différents auteurs.

LAINHIS