‹ Manual technique de microbiologie et sérologieChapitre 111 sur 241 · GLOBULAIRE · texte numérisé non relu

GLOBULAIRE

À. — Solutions conservatrices des hématies.

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(de Hayem). ( lode en paillettes à saturation.

Le nombre moyen des hématies chez l'homme adulte est de 5 millions par millimètre cube, de 4.500.000 chez la femme et de 6.900 000 chez le nouveau-né. |

B. — Emploi de l'hématimètre 1.

Cet appareil se compose :

1° D'un tube mélangeur-aspirateur gradué (de Polain) pourvu d'un ajutage en caoutchouc, avec lequel on recueille, par piqûre au lobule de l'oreille ou au doigt, une goutte de sang qu'on aspire jusqu'à la division 1. On essuie la pointe du mélangeur avec un papier buvard et,

“hr Compte-globules de Malassez, construit par Stiassnie, 204, boulevard Raspail, aris.

262 RÉACTIONS HUMORALES ET HÉMATIMÉTRIE

aussitôt, on aspire le liquide conservateur jusqu’à ce que le mélange de sang et deliquide, remplissant la petite ampoule qui contient une perle de verre,,arrive au trait 101. On agite pour que la masse de liquide soit bien homogène ; on expulse, en soufflant doucement par l’ajutage de caoutchouc, ce qui restait dans la partie capillaire du mélangeur et on verse une goutte du liquide de l'ampoule sur la partie centrale du porte-objet quadrillé formant chambre humide ;

2° D'un porte-objet chambre humide constitué par une cellule creuse à rigole et portant une lamelle couvreobjet à ressort. La goutte de sang dilué au 1/100 à examiner se trouve ainsi très également étalée entre la partie centrale du porte-objet et la lamelle couvreobjet.

La partie centrale du porte-objet présente un quadrillage

gradué à à Chaque rectangle de ce quadrillage représente

un dix-millième de millimètre cube de sang. On compte les hématies contenues dans un nombre æ de carrés, 20 par exemple. On additionne les chiffres ainsi obtenus, en comptant pour 1/2 les hématies qui sont à cheval sur les traits limites. On multiplie ensuite ce chiffre n par 10.000 et on divise par le nombre x de carrésexaminés. Le nombre n d’hématies par millimètre cube de sang est alors fourni par la formule :

A Use x carrés

Si, au lieu de diluer le sang au 1/100, on veut le diluer au 1/200, ou au 1/300, ou au 1/500, on aspire seulement jusqu’à la graduation 2, 3 ou5 dans la pipette capillaire avant d’aspirer le liquide dilueur jusqu'au trait 101.

Pour la dilution au 1/200 ou 1/300, la formule devient alors :

n x 20 000 n x 30.000 NE — UN = ————, etc.

xæ (carrés) x (carrés)

Avec l’hématimètre de Thomas-Zeiss, chaque carré de quadrillage, recouvert de la lamelle, correspond à 1/4000° de millimètre cube.

Sinreprésente le nombre d'hématies comptées etx le nombre de carrés, la formule est alors :

C. — Numération et détermination des leucocytes. — Cytodiagnostic.

Pour l'étude des leucocytes vivants provenant d’exsudats, par exemple pour les recherches relatives au pouvoir phagocytaire, il est avantageux, pour éviter la coagulation de la fibrine, de mettre ces éléments en suspension dans le liquide suivant, préalablement stérilisé par la chaleur :

Ghlorure de sodium our 0. 2, 0 gr. 63 Gitrate dersonde RP POST RUN, gr.

Fatdistitée ne LP D. : 100 ce:

Pour la numération des globules blancs, au lieu du liquide de Hayem on emploie :

Acideracelique 2 NS Ai. in. 27gr.

Eau distillée. . . RICO Ce Sol. alc. saturée de bleu de méthylène. . irèc:

L'acide acétique détruit les hématies et le bleu colore les noyaux des leucocytes, de sorte que ces derniers sont bien visibles.

On peut également employer le liquide de Toisson :

Eau distillée. . Re. 26.

Glycérine pure à ‘30° Be. ND “Rae 30 gr.

Sulfate de soude. . . PRET, FOR 6 gr.

Chlorure de sodium. RARE Ti 1 gr.

Violet de méthyle 5 ou GIP PORTE 0 gr. 025

La proportion normale des leucocytes aux hématies dans le sang humain est de 1 p. 850 ; soit :

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