CHAPITRE XXXIII

BACILLE CTYPHIOUE NB PARA TI PHIOCES BACTERIUM COLI.

A. — Bacille typhique.

CARACTÈRES BIOLOGIQUES. — Petit bâtonnet mobile, portant, à sa périphérie, de 10 à 12 cils environ, quelquefois plus, non sporulé. Se développe bien sur les milieux usuels à 37°, très lentement à 20°, plus du tout au-dessous de 9°. pH limites : 6,2-7,6. pH optimum : 6,8-7,2.

Se colore avec facilité. Ne prend pas le Gram. Trouble le bouillon. Ne liquéfie pas la gélatine (caractères communs à tous les microbes de ce groupe). Sur gélose et gélatine, colonies de forme irrégulière, aplaties, grisätres, humides, translucides, irisées lorsqu'on les regarde à lalumière incidente, et à centre proéminent. Sur pomme de terre. culture à peine visible, apparaît seulement après quelques jours comme une traînée luisante.

Ne produit pas d'indol dans les milieux peptonés.

Ne coagule pas le lait ; ne fermente ni le lactose n1 le glucose.

Ne décolore pas le rouge neutre, la safranine, le vert malachite, l’indigo, le bleu de méthylène ; décolore lentement l’orcéine.

RECHERCHE DU BACILLE TYPHIQUE DANS LE SANG DES MALADES. BILE PURE (procédé CONRADI1). — Le meilleur procédé consiste à projeter, avec une seringue, 2 ou 3 centimètres cubes de sang (prélevé par ponction dans une veine superficielle) dans un tube à essai contenant 5 centimètres cubes de bile de bœuf pure, filtrée sur ouate hydrophile et stérilisée. On porte à l'étuve à 370 pendant 48 à 72 heures, et on réensemence sur les milieux différentiels.

PROCÉDÉS de KAYSER-ZEIDLER, DEL. TRIBONDEAU ET J. DUBREUIL. — Au lieu de bile pure, on emploie la bile

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additionnée de 10 p. 100 de peptone et de 4 p. 100 de glycérine. On stérilise 2 heures à 100° (sans pression). L. Tribondeau et J. Dubreuil préconisent la bile additionnée de 1 gr. de peptone et de 1 gr. de glucose par 100 centimètres cubes. (Les paratyphiques y dégagent de petites bulles de gaz.)

ProcéDé J. COURMONT. — On ensemence 2 à 5centimètres cubes, de sang dans un grand ballon contenant 200 à 500 centimètres cubes de bouillon. On cultive 24 heures à 37° et on réensemence sur milieux différentiels.

RECHERCHE DU BACILLE DANS L'EAU ET DANS LES DÉJEC- TIONS SUSPECTES. — Suivant les circonstances, on peut choisir entre deux méthodes : l’une consiste à ensemencer 100 centimètres cubes ou 1 litre de l’eau suspecte dans un milieu d’enrichissement avant defaire les cultures sur milieux différentiels ; l’autre, en général préférable, consiste à filtrer 10 à 100 litres d’eau suspecte à travers une bougie Chamberland stérile. On recueille avec un pinceau ou un petit tampon d’ouate stérile le dépôt qui s’est accumulé à la surface de la bougie ; on le délaye dans un tube contenant 10 centimètres cubes d’eau stérile et on”ensemence cette émulsion, d’abord dans le milieu d’enrichissement ciaprès, puis, avec un autre pinceau ou tampon d’ouate stérile, à la surface de boîtes de Pétri contenant les milieux solides d'isolement.

MILIEU D'ENRICHISSEMENT DE FICKER ET HOFFMANN. —- Dans un grand ballon contenant 900 centimètres cubes de l'eau suspecte, on ajoute successivement les solutions suivantes qui ont été stérilisées séparément par chauffage discontinu à 1002.

Solution de nutrose à 10 p 100... . . . 80 cc. Soléde/eafeme àt2"pr. 0 pA1002% 02. 0x, 2UEcc. Sol. de crystall-violet à 0 gr. 1 p. 100. . 10{ce.

On porte à l’étuve à 37° pendant 12 heures et on ensemence ensuite sur les milieux d'isolement.

Pourisoler le b. typhique des déjections, on se sert avec grand avantage de ce milieu qu'on prépare alors en ajoutant, à 90 centimètres cubes d’eau stérilisée, 8 centimètres cubes de solution de nutrose, 2 centimètres cubes de solution de caféine et 1 centimètre cube de solution de crystall-

violet. Ce mélange stérile est ensemencé avec 1 gramme ou 0 gr. 50 de déjections suspectes et laissé à l’étuve pendant 12 heures. On reporte ensuite, par dilutions convenables, sur milieux d'isolement.

La recherche du bacille typhique dans les déjections est plus commodément effectuée en utilisant la technique de Biérast modifiée par Hall :

On mélange 1 ou 2grammes de déjections, dans un mortier de porcelaine stérile, avec 8 centimètres cubes de bouillon nutritif par petites portions, à la pipette. Lorsque le mélange es! bien homogène, on y ajoute 2 centimètres cubes d'éther de pétrole (P. S. 650) ; on le verse dans un flacon stérile bouché à l’émeri ou avec un très bon bouchon de liège et on le soumet à une agitation continue pendant une demi-heure (autant que possible ‘au moyen d’ur appareil donnant 150 secousses à la minute). On laisse ensuite la masse en repos pendant 2 heures, puis on fait les ensemencements sur les milieux électifs choisis.

L’agitation avec l’éther de pétrole a pour effet d'éliminer presque complètement le Bacterium coli et elle permet de retrouver le bacille typhique et aussi le paralyphique B, alors même que ceux-ci n'existent que dans la proportion de 1 p. 1 000par rapport au B. coli. C’est un procédé particulièrement recommandable pour la recherche des bacilles dans les déjections des « porteurs de germes ». Le paratyphique À est sensible à l’éther de pétrole comme le coli. Le bacille dysentérique Shiga se comporte comme le typhique.

MILIEUX D'ISOLEMENT. — Ces milieux solides servent à isoler les bacilles qui sont cultivés dans le milieu d’enrichissement ci-dessus, ou qui se trouvent dans une urine suspecte, ou dans le aile de délayage du dépôt des bougies filtrantes.

Ils peuvent servir aussi à isoler directement les bacilles des matières fécales ou de l'urine. On prépare alors une émulsion de déjections (environ 1 gramme pour 200 centimètres cubes d'eau) et avec un pinceau ou un tampon d'ouate stérile, on ensemence cette dilution, ou directement quelques gouttes d'urine, à la surface des milieux coulés en boîtes de Pétri et desséchés par 24 heures d’exposition à l'étuve à 379, le couvercle étant dirigé en bas.

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BACIELE FYPHIOQUE : 333

Les milieux de choix sont ceux de Drigalski-Conradi, d'Endo, de Chantemesse, de Conradi et surtout ceux de Lüffler-Schuster au vert malachite, de Ludwig Bitler au vert malachite-bleu de Chine et de Schmitz (gélose-sérum au rouge Congo).

19 Milieu de Drigalski Conradi :

On prépare séparément :

1. Une macération de viande (1.050 grammes de viande de bœuf ou de cheval, finement hachée, pour 2 litres d’eau). Laisser 24 heures à la glacière ; exprimer, faire bouillir 1 heure ; compléter au volume de 2litres. Ajouter:

HeptonedenWitle PM PNR CTUONERRE 20 gr.

Del RATE ENT ER AS RES QU 10 gr.

Nutrose (ou Tropon). A RE ALAN HAE 20 gr, Gélose (finement hachée). . . . . . . 60 gr

Porter à l’autoclave à 120°, 30 minutes. Filtrer à chaud sur ouate hydrophile ou sur sable.

(On peut remplacer la macération de viande par une solution à 10 p. 1.000 d'extrait Liebig).