SYPHILIS
cèdre, avec un objectif à immersion homogène, et ce procédé simple permet d'éviter l'emploi d'un ultra-microscope.
L’encre forme une nappe noire, plus ou moins transparente et uniforme, sur laquelle se détachent avec uneremarquable netteté tous les corps étrangers (globules sanguins, microbes, tréponèmes, etc...) apportés par la goutte de sérosité.
Les tréponèmes pâles, en particulier, apparaissent avec tous les caractères fondamentaux qui les font différencier des autres spirochètes non spécifiques.
Coloration des tréponèmes.— a) Procédé de Giemsa. — Fixer sur lames par immersion 30 minutes dans alcool absolu. Colorer pendant 2 à 4 heures (à l’étuve à 37°) dans :
Liquide de Giemsa. . 17: X gouttes Sol. carbonate de soude àa1 p 100 X gtt.
Eau distillée. . . LE 10 cc.
Laver à l’eau, sécher.
Les coupes provenant de tissus fixés dans le formol à 4 p. 100 et lavées à l'eau, sont colorées, d’abord dans un premier bain pendant 1 heure par le Giemsa, puis pendant 12 à 24 heures dans un second bain frais. On lave ensuite rapidement à l’eau distillée, puis pendant quelques secondes (2 à 4) dans une solution concentrée d’alun de potasse, puis dans l’eau distillée. On sèche enfin à l’étuve et on monte dans le baume ou dans la gélatine glycérinée.
b) Procédé de Borrel et Burnet. — Exciser un petit fragment de tissu pathologique(chancre, papule, etc.). Le porter successivement sur plusieurs lames où l’on a déposé une goutte d’eau distillée. Gratter et dissocier le tissu avec la pointe d’un bistouri ou d’une aiguille ; le produit de grattage se répand dans la goutte. Sécher à l’étuve. Mordancer en versant sur la lame quelques gouttes de mordant de fuchsine de Lôffler (tanin, sulfate ferreux, fuchsine) utilisé pour la coloration des cils.
On répète le mordançage 3 ou 4 fois, en chauffant jusqu'à émission de vapeurs.
On verse ensuite (sans laver) sur la lame quelques gouttes de fuchsine de Ziehl et on chauffe de nouveau jusqu'à émission de vapeurs. |
On rince à l’eau, on sèche, éclaircit au xylol et on examine dans une goutte d'huile à immersion.
c) Procédé de Ravault à l’albuminate d'argent. — Etaler le produit sur lame dégraissée à l’éther. Fixer par alcool-éther. Verser sur le frottis 5 à 10 gouttes de solution d’albuminate :
Albuminate d'argent ee tt 7 2 gr.
Eau distillée VS TR 0. RU eMRIDOICC
Chauffer la lame sur veilleuse de Bunsen ou sur platine chauffante jusqu'à émission de vapeurs ; égoutter l'excès d'albuminate. Ne pas laver. Déposer sur le frottis 5 à 10 gouttes de solution d'acide pyrogallique, laver abondamment.
Recommencer cette série de manipulations 3 ou 4 fois. Après le dernier lavage, sécher et examiner.
Les spirilles apparaissent en noir foncé et on constate qu'ils sont presque tous finement spiralés,
d) Procédé Levaditi (coupes). — 1° Fixation des fragments d'organes au formol à 10 p. 100, 24 heures ;
2° Durcissement par alcool à 95° pendant 24 heures ;
3° Lavage à l’eau distillée, quelques minutes ;
40 Imprégnation au nitrate d'argent, solution aqueuse à 1,5 p. 100, pendant 3 à 5 jours à 38° ;
5° Lavage à l’eau distillée pendant quelques minutes, puis :
6° Réduction, pendant 24 à 48 heures, par :
Acide pyrogallique. . ee 4 gr.
Formol (sol. commerciale à 40 p. 100). . a cc, Hat PS ONE EE RNERNE NE RRE R LUNeeT
7° Lavage à l’eau distillée. Déshydrater à l'alcool. Xylol. Paraffine. Faire les coupes.
8° Colorer les coupes par le Giemsa dilué au 1/20°, 3 à 4 minutes. Différencier à l’alcool, essence de girofle, xylol, baume,
Méthode de Fontana-Tribondeau (recommandée pour la recherche des tréponèmes dans le cerveau des paralytiques généraux).
Etaler sur lame une goutte d’émulsion d’écorce cérébrale faite en dissociant 2 à 3 millimètres cubes de tissu dans
