COLORATIONS DE LA NÉVROGLIE

3° Procédé de Schmaüs (4 891).

1° Fixation et durcissement dans le liquide de Müller. Inclusion celloïdinée. Coupes. Laver à l’eau distillée.

2° Coloration pendant quinze à vingt minutes dans la solution ainsi préparée :

Carminate de soude . \ gramme.

Nitrate d’urane . 0gr g.

(A broyer ensemble.)

Eau distillée . 100 grammes.

(A faire bouillir demi-heure; filtrer après refroidissement.)

3° Laver à l’eau distillée. Déshydratation. Montage.

E. — Colorations électives de la névroglie.

A. — Méthode primitive de C. Weigert ( Glia-Methode , 1895).

1° Fixation : Solution de formol à 10 pour 100, à changer le deuxième jour. Les pièces doivent être recueillies le plus tôt possible; chaque morceau ne doit pas dépasser en épaisseur un demi-centimètre.

2° Mordançage : pendant quatre à huit jours au moins (étuve à 37°) dans la solution :

Alun de chrome . 25 grammes.

Acide acétique ordinaire . 50 —

Acétate de cuivre . 50 —

Eau distillée . 1000 —

(On fait tout d’abord la solution d’alun de chrome à chaud; en pleine ébullition, on ajoute l’acide acétique, puis l’acétate de cuivre finement pulvérisé; on laisse refroidir et on filtre.)

Si les morceaux doivent être traités seulement par la méthode de Weigert, ils peuvent être fixés et mordancés en même temps; dans ce cas, on ajoutera le formol à la solution de mordançage proprement dite.

3° Lavage rapide, déshydratation, inclusion celloïdinéej coupes minces.

4 ,o Réduction : Les coupes sont mises dix minutes dans une solution de permanganate dépotasse (0,35 pour 100), puis lavées soigneusement; elles deviennent brunes. Elles sont alors placées, pendant deux à quatre heures au moins, dans le liquide réducteur, préparé en mélangeant 90 centimètres cubes de la solution 1 à 10 centimètres cubes de la solution II.

Solution I ( à filtrer) :

Chromogène (1).... . 5 grammes.

Acide formique. . . . 5

Eau distillée . 100 — *

Solution II :

Hyposulfite de soude Eau distillée .

Les coupes peuvent être colorées dès maintenant. Mais, si l’on veut obtenir une coloration, plus intense, des fibrilles névrogliques les plus fines et la teinte jaune clair des cellules nerveuses, cellules épendymaires et gros cylindraxes, on procédera de la façon suivante : les coupes, après avoir

(1) Le. chromogène est un composé de naphtaline.

10 grammes.

été lavées deux fois, sont placées, au moins pendant toute une nuit, dans une solution aqueuse (à 5 pour 100) de chromogène, préalablement filtrée avec soin. Elles sont lavées à deux reprises et peuvent être colorées de suite. Il faut remarquer que les coupes perdent facilement leur colorabilité, si elles sont conservées dans l’alcool ou dans l’eau ; mais elles peuvent rester, sans inconvénient, pendant des journées, dans un liquide ainsi composé :

Alcool à 80° . 1*0 centim. cubes.

Solution d’acide oxalique à 5 pour 100 . 10 — —

5° Coloration (d’après l’ancien procédé de Weigert pour la fibrine). La solution colorante est une solution alcoolique saturée de violet de méthyle (alcool à 70-80°, solution saturée faite à chaud, refroidie et décantée). Cette solution peut être additionnée de 5 pour 100 d’uue solution à 5 pour 100 d’acide oxalique, dans le but de rendre la coloration plus stable.

Chaque coupe, convenablement étalée sur une lame porte-objet et séchée avec du papier Weigert, est colorée, demi-minute, avec une goutte de la solution précédente; on sèche avec le papier; on met une goutte de la solution iodo-iodurée saturée de Lugol; on sèche.

6° Différenciation : La différenciation de la névroglie est faite sur la lame directement, avec un mélange à parties égales de xylol et d’huile d’aniline.

7° Laver avec le xylol pur, pour éviter la décoloration. Monter dans le baume de Canada ou dans la Bernsteinlaque.

Les coupes peuvent rester exposées à la lumière du jour, dans le but de renforcer leur coloration. Les noyaux et les fibrilles névrogliques apparaissent en bleu plus ou moins foncé; les cellules nerveuses, les cellules épendymaires, la plupart des cylindraxes sont jaune clair. Mais celte méthode, qui serait si précieuse pour l’étude fine des scléroses cérébrospinales, n’est pas d’un emploi facile; de l’aveu de Weigert lui-même, elle peut ne pas réussir, bien qu’exécutée d'après toutes les règles prescrites. De plus, elle échoue complètement sur les moelles d’animaux.

B. — Procédé d'Anglade (1901). j]

Le procédé proposé tout récemment par Anglade a le mérite d’être très üVrr •?’ ^°ut en donnant une coloration suffisamment élective. Le temps diffimle paraît être celui de la fixation et du mordançage, variable vraisemblablement suivant les pièces et l’époque de l’autopsie!

1° Fixation et mordançage : pendant 4 jours à la température de la chambre; ou mieux, pendant 48 heures à l’étuve à 37° •

Solution :

Liquide de Fol (1) .

Solution de sublimé à 7 pour 100 !].!.! . . .

(1) Liquide de Fol ;

Tétraoxyde d’osmium à 1 pour 100 . 2

Acide chromique à 1 pour 100 . . 25

Acide acétique à 2 pour 100. . o

Eau . . “

(Solution à renouveler dès*qû;eliê dévient trouble.) .

C eût une modification du liquide de Flemming :

Liquide de Flemming : ®

Solution d’acide osmique à 2 pour 100 . a

ssnasrœ * * r **•" 15

3 parties.

1 partie.

grammes.

gramme.

COLORATIONS DE LA NÉVROGLIEj . 753

(Les pièces sont recueillies aussi tôt que possible, pas plus de vingt-quatre heures après la mort. Coupées très minces, elles peuvent être déposées utilement, pendant 5 heures, dans la solution de sublimé seule; puis, taillées convenablement et mises dans la solution définitive. Liquide à changer deux à trois fois.)

2° Lavage. Déshydratation ;

3° Inclusion à la paraffine (acétone, 24 heures; paraffine, 3 heures);

4° Coloration : les coupes, très minces, sont colorées à chaud à l’aide d’une solution aqueuse saturée de Victoriablau (Grübler), jusqu’à dégagement de vapeurs ;

(Coloration lente, demi-heure à une heure.)

5° Solution de Gram (solution iodo-iodurée de Lugol) ;

6° Différenciation : à l’aide du mélange suivant :

Xylol . . . 1 partie.

Huile d’aniline . . 2 parties.

7° Monter au baume, ou mieux au vernis de succin.

Les fibrilles et noyaux névrogliques apparaissent colorés en bleu, comme dans la méthode primitive de Weigert.

On peut se servir d’une coloration de contraste, de la façon suivante : avant de monter.au baume, laver à l’alcool absolu; puis, faire agir très rapidement une solution d’érythrosine dans l’alcool absolu (coloration en rouge du tissu conjonctif, des cellules nerveuses et des cylindraxes).

G. -- Procédé ancien de Malassez.

1° Coupes placées avant toute coloration, pendant dix à vingt minutes, dans :

Solution de polasse à 40 pour 100.

2° Lavage soigné à l’eau distillée ;

3° Coloration à l’aide du carmin ou du picro-carmin ;

4° Acide acétique concentré; puis, lavage soigné à l’eau distillée.

5° Montage direct dans la glycérine ou dans le baume de Canada, après déshydratation et éclaircissement.

Le tissu conjonctif est gonflé et décoloré. Les fibrilles névrogliques sont rouges et se détachent nettement. - ■

pathologique du système nerveux central

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