SALI M BENI. — VACCINATION ANTICHOLÉRIQUE
trente passages au plus, la virulence maxima qu’il n’est guère possible de dépasser.
On peut, par ce procédé, arriver à réduire la dose mortelle, en injection péritonéale, de cinquante fois environ; et, d’autre part, 1 injection intramusculaire de ce virus au cobaye est invariablement fatale. En inoculation sous-cutanée au contraire, il ne tue pas le cobaye, mais il provoque une mortification des tissus et la formation d’une escarre.
Une fois en possession d’un virus exalté et fixe , Jlaffkine s’appliqua à en obtenir un dérivé aussi atténué que possible.
Pour cela, il cultiva le virus fixe dans du bouillon à la température de 39° et dans une atmosphère constamment aérée, en utilisant le dispositif employé par Roux et Yersin pour la préparation de la toxine diphtérique.
Ainsi cultivé, le vibrion cholérique périt en peu de jours. 11 faut donc, pour prolonger en série cette expérience, de façon à arriver à l’atténuation désirée, ensemencer journellement sur gélose une prise de cette culture. Lorsque l’ensemencement reste stérile, c’est avec les germes sur gélose de la dernière prise fertile qu'on ensemence le bouillon de la deuxième culture aérée, et ainsi de suite jusqua arriver, après plusieurs générations, au degré d'atténuation désiré.
Inoculé sous la peau des cobayes, le virus atténué ne doit pas produire de phénomène de nécrose : il doit, en plus, protéger le cobaye contre une dose mortelle de virus fixe injecté quelques jours après, et empêcher la nécrose des tissus lorsque l’injection de ce virus est pratiquée sous la peau.
Pour la vaccination de l’homme, Haffkine conseillait une première injection sous-cutanée de t/10 ou t/20 de culture sur gélose de virus atténué , suivie trois à huit jours après d’une injection de la même dose de virus fixe exalté. Plus tard, ayant constaté sur lui-même que le virus fixe exalté, injecté d’emblée, est très bien supporté par l’homme, Haffkine abandonna sa méthode originale qui comportait une première injection de virus atténué, pour ne plus se servir, comme matériel vaccinant, que des vibrions virulents. De toute façon, pour Haffkine, chaque culture sur gélose de vaccin peut servir à vacciner dix ou vingt personnes. Il suffira pour cela d'introduire dans le tube de vaccin 10 ou 20 centimètres cubes de bouillon stérile, de frotter àl’aided’un tube effilé fermé à son extrémité pour détacher la couche microbienne, et de bien agiter pour avoir une suspension aussi homogène que possible. Powel a obtenu de bons résultats en pratiquant une seule injection de t/6 de culture sur