TABLEAU V

Série A (1/3).

| Concentrat. RE ne LÈ Me | ré Er = ue . S 2 = Le OR AE Fo RAR A GE A 1 1/2 41/2 0.00033 0.0000165 10 8.5 2 |: 4 0.00066 | 0.000033 | 20 | 17.5 | 3 11/2 81/2 0.00099 0.C000495 30 26 4 2 3 0.00132 0 000066 40 34.9 5 | 2 | 21} | 0.00165 | 0.0000825 | 50 [43 | 6 | 3 2 | 0.00198 | 0.000099 | 58 BE 7 | 31/2 11/2 1).00231 O0 000115 66 8 4 ] 0 00264 0.000132 9 41/2 1/2 0 00297 0.000148 10 5 (0) 0.0033 0.000169

Série B (1/4).

| Concentrat. . = LE :

js CNE ne a « . = = ‘ Éne 1 if> | 41 | 0 00025 | O0 0000195 | 8 6.5 2 4 0.0005 0.600025 |15 | 13 | 8 | 1%] 3%] 0.00075 | 0.0000375 | 23 |19.5) 1m 3 0.001 0.00005 | 30.5 | 26 AE | 217 | 0.00125 | 0.0000625 | 37.5 | 32 5 6 | 3 2 0.001 0.000075 | 45.5 | 38.5 7 | 31/2 | 11 | O.00175 | 0 0000875 | 52.5 ! 46 Co 1 0 002 0 0001 9 | 412 | 12 | 0.00228 | 0.0001125 10 | 5 0 0.0025 0.000125 |

Le tableau 5 rassemble les valeurs numériques de cette expérience.

Par exemple: Le tube 4 de la série À du Rubiazol-C contient une concentration de 0,00132 gr°/, la valeur photocolorimétrique qui y correspond est de 20. Après scission par réduction cette solution donne une solution de p-aminophénylsulfamide de 0,00066 gr°/o ce qui correspond au tube 2 de la série À du paminophénylsulfamide. Or avec ce tube nous trouvons également 20.

Ce calcul peut être effectué sur chacun des tubes avec le même résultat, ainsi que tous les points trouvés avec la solution de paminophénylsulfamide s'inscrivent sur la même ligne que les points trouvés avec la solution de Rubiazol-C réduite. (voir fig. I.)

À notre avis, ceci nous fournit la preuve manifeste que le Rubiazol-C est réduit en p-aminophénylsulfamide et qu'il l’est quantitativement, et que d’autre part l’acide triaminobenzoique est ou bien détruit, ou bien insolubilisé sur le filtre en alcalinisant. Quoique dès maintenant la question de l’acide triaminobenzoique ne saurait plus brouiller la suite de nos expériences, nous nous sommes efforcés de rechercher sa présence sur l’insoluble du filtre.

À cet effet nous lavons le filtre avec une solution de soude de même force que celle du liquide filtré, (0,5 NaOH N + 7 cc. H:0) jusqu'à ce que le filtrat ne donne plus rien par diazotation, ce qui est vite atteint. Puis nous prélevons une partie du filtre qui ne contient pas de poudre de nickel, nous la dissolvons dans des solutions d’a-

cide trichloracétique de différentes forces et nous cherchons la coloration par diazotation.

Nous n'avons jamais obtenu la moindre teinte, ni par diazotation et copulation au KR. IV., ni par action du nitrite de sodium seul, aui avec le triaminobenzène, copule du prontosil, donne un dérivé de condensation du genre Brun Bismark.

Nous avons donc abandonné la question de l’acide triaminoben- Zoique qui pour nous ne présentait au’un intérêt purement subsidiaire.

Les dérivés acétylés,

Pour le dosage des dérivés acéto-conjugués nous nous sommes adressés à la même technique, parce qu'il nous a paru probable que le Rubiazol-C ainsi que ses dérivés d’hydrogénation et de scission sont l’obiet d’une acétylation dans l'organisme.

Il à fallu toutefois completer la technique par une hydrolyse sez poussée. Après plusieurs tâtonnements nous nous sommes décis pour plus de sécurité, pour la modalité suivante:

Des tubes dorénavant toujours utilisés à ce dessein furent puurvus d’un trait de jauge à 6 cc. Dans ces tubes nous introdluisons 5 cc de la solution à doser, une toute petite pincée de nickelpoudre et 1 cc. d’acide chlorhydrique 2N. La pincée de nickel doit être assez petite, pour que le liquide apparaisse tout juste grisâtre après agitation du tube, ainsi nous évitons qu'après alcalinisation plus tard, le conteru du tube se gélifie par précipitation de l’hydrate présent en trop grande abondance, ou bien que le filtre soit comblé du même hydrate qui retiendrait trop de liquide.

Les tubes sont placés au B-M bouillant pendant une demi-heure.

Après ce temps et sous l’action de l’acide chlorhydrique 2N

l’hydrolyse est totale. On complète au trait de jauge avec de

l’eau et on ajoute 1,5 cc. de soude 2N. On agite bien et on filtre.

Le tube et le filtre sont lavés avec 2,5 ec. d’eau. On attend le

refroidissement total, puis on ajoute dans l’ordre suivant et en

respectant les temps de repos, 2 cc. d’acide trichloracétique, 1

ec. de nitrite de sodium, 1 cc. de sulfamate d’ammonium, 1 cc. de

R. IV. On mesure au photocolorimètre après 10 minutes.

as dé

Nous avons vérifié le bon fonctionnement de ce mode opératoire sur une solution d’acétyl-p-aminophénylsulfamide pur à 0,01°/ dans l'urine au dixième. Pour la préparation des dilutions nous avons procédé exactement de la même manière que pour les solutions de Rubiazol-C et de sulfanilamide.

Le poids moléculaire de l’acétyl p-aminophénylsulfamide est de

Donc un gramme de cette substance contient:

Pour ros calculs nous avons utilisé la valeur 0,80.

Les valeurs photocolorimétriques que nous fournit cette expérience se rangent encore très bien parmi les valeurs trouvées sur le Rubiazol-C réduit et la sulfanilamide, (voir tableau VI) ce qui nous a décidé d'employer définitivement ce mode opératoire.