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Versle onzième jour, les mycéliums des milieux acides étaient légèrement verts et celui du milieu glucosé, au neuvième.
Les poids secs maxima coïncident, ici encore, avec le début de la sporulation qui, elle-même, précède un peu l’assimilation totale des composés carbonés. Cette dernière particularité à été signalée pour l'Aspergillus niger, en présence du glucose, par Fernbach. Quant au rendement le plus élevé d’une culture, sauf pour l'acide succinique, il a lieu dans les premiers jours du développement du Champignon : du quatrième au seplième Jour.
Le classement des acides organiques d'après leur action favorable décroissante, en se basant sur les poids secs, qu'il se fasse au moment où ces poids sont maxima ou bien à l’époque où tous les aliments sont complètement utilisés, est absolument le même et semblable à celui déjà donné. Par conséquent, si les valeurs absolues des poids secs obtenus avec un acide, et à ces deux stades, sont très différents, ainsi d’ailleurs que le rendement, ces valeurs, dis-je, gardent toujours, vis-à-vis de celles des cultures avec les autres acides, les mêmes rapports.
Voici pour l’un d'eux, l’acide malique, des courbes qui ren-
FSU PERD ICS ANNE DORE DRE PDO Me SALE RÉEL En pou Jde 4 Le 0 ; è Le ç 8 to 12% 14 16 A8 20 22 #4 26 Courbes L. — Varialions du poids see mycélien, du rendement et de la consommation de l'acide malique. (Le développement du Penicillium s'est effectué lentement.)
dent bien compte de la dissociation, dans le temps, des maxima des phénomènes dont il est question (rendement, poids sec et acide consommé), qui s'effectue dans le cours d’un développement mycélien moyennement lent.
La durée de chaque culture, exprimée en jours, est portée en abscisses. En ordonnées sont représentés les poids d'acide utilisé, en décigrammes ; Les poids secs, en centigrammes et les rendements p. 100, en unités.
Je vais encore exposer les résultats trouvés avec des cultures faites dans des boîtes de Roux, à la température de 20-220, Ces cullures m'ont servi à doser également, à chaque prélèvement de mycélium, l’ammoniaque restant et les acidités fixe et volatile dont je parlerai dans les autres paragraphes.
Les cultures en milieux acides ont sporulé le septième jour et en milieu glucosé, vers le cinquième. Le développement s’est effectué beaucoup plus rapidement que dans les matras, en raison de la plus grande surface des liquides de culture et de la température optima. Aussi, pour la plupart des acides, le maximum du poids sec mycélien correspond-il avec leur complète utilisation et le début de la sporulation. Mais le rendement maximum reste toujours indépendant et précède les deux phénomènes précédents de quelques jours. Pour obtenir leur séparalion qui, de toute facon, ne pourrait être aussi marquée que dans les expériences avec matras, il serait indispensable de récoller les mycéliums toutes les douze heures, entre le cinquième el septième jour.
On constate également que les rendements et les poids secs, partant d’une valeur quelconque, passent par un maximum vers le cinquième jour et diminuent ensuite pour arriver, au trentième jour, à des valeurs assez basses.
Les cultures, dont la durée était de deux jours, commencaient seulement à se développer dans les milieux renfermant les acides malique, tartrique, citrique, tandis que, dans les milieux constitués avec l'acide succinique et le glucose, elles étaient déjà appréciables. C’est pourquoi j'ai pu, pour ces dernières cullures, procéder à la détermination de leurs poids secs ainsi que de l'acide utilisé et du rendement p. 100 d'aliment consommé.
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Voici d’ailleurs, pour aite composé ternaire, les de courbes que les PTE du tableau IV permettent sh construire et dont l'allure générale intéressante est bien semblable.
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Courbes 2. — Variations du poids sec mycélien, du rendement et de la consommation de l'acide malique.
Les courbes 2 et 1 concernent les cultures produites par des milieux préparés avec la même dose d'acide malique, mais dont les vitesses de développement sont différentes. Aussi, leur comparaison montre-t-elle que dans le cas où le développement est assez lent (courbes 1), les points fixant les maxima du rendement, du poids sec et de l'acide utilisé sont, sur la ligne des abscisses, beaucoup plus espacés les uns des autres que dans le cas (courbes 2) où la végétation est plus accélérée.
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Courbes 3. — Variations du poids sec mycélien, du rendement et de la consommation de l'acide tartrique.
Courbes 4. — Variations du poids see mycélien, du rendement et de la consommation de l'acide succinique.
Courbes 5. — Variations du poids sec mycélien, du rendement et de la consommation de l'acide citrique.
Rendement
AU net ie NS trs 00e Courbes 6. — Variations du poids sec mycélien, du rendement et de la consommation du glucose.
Conclusions du premier paragraphe. — Des recherches précédentes je puis conclure que :
1° Les doses croissantes d’acides organiques;f fixées par} les 1/100€, 1/50, 1/25€ de leurs poids moléculaires p. 100, diminuent de plus en plus le rendement p. 400 du Penicilluum qjlaucum, contrairement au glucose.
20 Ces acides peuvent se classer ainsi, d’après leur action nutritive décroissante : acides succinique, malique, citrique, tartrique et bien loin derrière, puisqu'il est mortel pour le Champignon, l'acide oxalique. C'est-à-dire que, comme cela se passe chez les Phanérogames, aux doses ainsi employées renfermant la même quantité de carbone et la même acidité, moins ces composés sont oxygénés plus ils sont alibiles. Autrement dit, ces corps ternaires, dans ces conditions, sont d'autant plus favorables à la nutrition du Penicillium, qu'ils contiennent moins de radicaux alcooliques et plus de radicaux carbures.
3° Les maxima du rendement et du poids sec ne coïncident pas avec la consommation totale de l'acide, comme on pourrait le croire & priori : le premier se produit quelques jours après l'ensemencement des milieux; le second a lieu un peu avant celte utilisation complète, comme, en général, la sporulation du Penicillium. EL ceci est surlout nettement accentué avec les cultures dont le développement est assez lent.
4° Les rendements fournis par les divers acides organiques, qu'ils soient déterminés aussitôt après la disparition de ces aliments dans les milieux de culture ou bien au moment où les poids secs sont maxima, gardent entre eux les mêmes rapports, bien que leurs valeurs absolues, pour le même acide, soient très différentes.
$ IL — VARIATIONS DES ACIDITÉS TOTALE, FIXE ET VOLATILE DES MILIEUX DE CULTURE PENDANT LE DEVELOPPEMENT DU PENICILLIUM.
1° Variations des acidités totales. — J'ai d'abord déterminé les variations de l'acidité totale du milieu d'une même culture, et pour tous lesacides, pendant le développement du Champignon que j'ai suivi jusqu'à complète assimilation de l’aliment carboné. A cel effet, J'ai prélevé quotidiennement et aseptiquement un centimètre cube de chaque liquide dans lequel l'acidité totale a été dosée, après avoir, au préalable, chassé l'acide carbonique. Et, avec les chiffres ainsi obtenus pour chaque milieu de culture, j'ai construit les courbes suivantes qui permettent aisément de suivre l’utilisation des acides en rapport avec le temps et d'en comparer la vitesse.
En abscisses, sont portés les Jours et, en ordonnées, l'acidité exprimée en 1/10€ de centimètre cube de solution décinormale de soude, pour un centimètre cube de liquide prélevé.
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L 1 è 3 L 5 ç m4 8 9 lo A1 12 13 t 4 15
Courbes 7. — Variations de l'acidité totale des milieux de culture renfermant les acides organiques et le glucose.
L'examen de ces courbes démontre que l'acide succinique, est le plus vite assimilé et l'acide tartrique le moins. Or, le premier est le meilleur aliment carboné parmi les acides éludiés et le dernier, le moins favorable : il y a donc bien un
rapport direct entre la vitesse d'utilisation d’un aliment et sa valeur nutritive.
On peut encore remarquer que le milieu glucosé, comme cela à déjà été signalé par divers auteurs, présente un maximum d’acidité qui se produit tout au début de la culture.
Au contraire, dans les milieux acides, l'acidité totale baisse continuellement jusqu'à épuisement complet de ces corps. Ce fait tient simplement à ce que ces acides, très assimilables et offerts comme seul aliment carboné au Penicillitm, sont brûlés dans de telles proportions que l'augmentation de l'acidité minérale, relativement infime, passe inaperçue; les courbes 9 et suivantes sont très démonstratives à cet égard.
2° Variations desacidilés fire el volatile. — On peutse demander si, en procédant comme je viens de le faire, l’utilisation des acides est bien rendue avec une exactitude suffisante. Pour vérifier ce point douteux, jai tracé de nouvelles courbes mais à l'aide des acidités fixes des milieux de culture, c’est-à-dire des acidités presque uniquement dues aux acides organiques et indiquées dans le tableau V.
En abscisses, sont toujours portés les jours et, en ordonnées, les acidités fixes exprimées en centimètres cubes de solution normale alcaline pour le milieu Lotal (100 centimètres cubes).
La lecture de ces courbes permet de se rendre compte facilement de l’utilisation comparée des acides organiques par le Champignon. C'est ainsi que durant les quatre premiers jours du développement du mycélium, ces composés ne sont brûlés qu'en pelites quantités. Du quatrième au cinquième jour, la teneur en acide tartrique des milieux continue à descendre lentement, mais celle des autres milieux, surtout citrique et succinique, diminue très rapidement. Du cinquième au septième, l'acide tartrique disparaît plus vite et les autres continuent à être aussi rapidement consommés : les acides succinique et citrique sont même complètement épuisés le septième: jour. L'acide malique disparaît ensuite à son tour le huitième jour, et il ne reste plus que l'acide tartrique dont l'utilisation s'effectue de la même façon jusqu'au treizième Jour. À partir de ce moment, les dernières traces sont brülées en quatre Jours.
OA o Courbes 8. — Variations de l'acidité fixe des milieux de culture renfermantles acide organiques et le glucose.
Si l'on compare ces courbes avec les précédentes, on peut se rendre compte qu’elles sont, dans leur allure générale, absolument identiques.
Voici maintenant, condensées en un tableau, les acidités fixe et volalile des mêmes cultures pour lesquelles j'ai donné, dans ke tableau IV, les poids secs etles rendements.
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