ENCASTREMENT

peut mélanger à la gélatioe une faible proportion de glycérine, qui 1 empêche de sécher trop et de devenir cassante. On emploierait de mi^me la gomme laque dissoute dans Falcool, ou la stéarine, mais pour des pièces préalablement traitées par l'essence de térébenthine. Il est ioiijours important, quand on veut pratiquer des coupes utiles, de se bien assurer de la direction suivie par le rasoir; pour cela il est nécessîiire, quand l'encollage n'est pas transparent, de mettre des points de repère.

V encastrement consiste à fixer au milieu d'un corps suffisamment dur un organe trop ténu ou trop mou pour être coupé sans cet artifice.

La moelle de sureau est la substance dont on se sert généralement. Elle trouve surtout une application dans les coupes faites au microtome. On remplit de moelle les vides laissés par l'objet à couper ou bien on encastre directement celui-ci dans un fragment de moelle. Quand 1» pièce est ainsi bien fixée, on plonge le tout dans l'alcool. La moelle de sureau se gonfle, se moule sur le tissu, et le retient en le pressant de tous côtés également. Nous répéterons encore ici ce que nous avons déjà dit: que nous ne pouvons entrer dans tous les détails de ces manipulations, qui ne peuvent s'apprendre que par la fréquentation des laboratoires. Chacun reste d'ailleurs en ces sortes de choses son grand maître ; chacun invente pour soi des procédés plus ou moins ingénieux, et desquels, en tous cas, il se sert toujours mieux que tout autre.

La cire, la paraffine, etc., servent comme la moelle de sureau à encastrer les pièces dans beaucoup de circonstances. On fait fondre la paraffine et aussitôt qu'elle est fondue on la verse dans de petites caisses en papier de la grandeur voulue. On y plonge l'objet en ayant soin, si cela est nécessaire, d'observer l'orientation qu'on lui donne, afin de pratiquer ensuite les coupes dans le sens le plus favorable. On laisse refroidir. Alors on attaque la paraffine avec un instrument tranchant par un des côtés du bloc, de manière à atteindre la pièce, et on plonge le tout dans l'alcool, où on peut le conserver jusqu'au moment de s'en ser\ir. Avant de faire subir aux pièces ce traitement, et afin que la paraffine englobe bien le fragment à couper, on devra toujours l'avoir laissé séjourner au préalable quelque temps dans, falcool ; on l'essuie avec du papier buvard de manière à le sécher \ia peu, avant de le plonger dans la paraffine.

Le mélange cï huile et de cire s'emploie comme la panifiiDe.

Flemming a propose l'usage du savon transparent brut (préférable à celui à la glycérine) que l'on fait dissoudre avec le tiers ou la moitié de son volume d'alcool, à la chaleur. On coule dans des caisses de papier. Quand la masse est solide, on dégage la pièce qu'on laisse sécher im ou deux jours. On peut alors pratiquer à sec avec le rasoir les coupes les plus iines, qu'on lave ensuite à l'eau et qu'on conserve dans la glycérine. Dans cette pratique l'alcalinité du savon est un grave inconvénient que l'on arrive toutefois à prévenir par quelques tours de main et spécialement en employant l'eau de seltz au lieu d'eau ordinaire pour dégager les coupes. On devra aussi s'assurer que le savon ne contient point d'alcali libre.

Pour pratiquer des coupes sur des membranes minces peu épaisses on a recours à divers tours de main dans lesquels on acquiert vite une très-grande habileté.

Le procédé le plus simple et qui donne presque toujours d'excellents résultats est celui de la planchette. Celle-ci est communément en caoutchouc durci, mais on peut également se servir de bois, et on prendra dans ce cas un morceau de buis poli pour la gravure. On étale la membrane sur la planchette et on en provoque l'adhérence en la laissant se dessécher très-légèrement. Parfois on l'a humectée avec un peu d'eau gommée, afin que cette adhérence se fasse mieux. Quand elle est suffisante on prend un rasoir à lame un peu courbe et on pratique rapidement et sans désemparer un^ série de coupes en avançant d'une extrémité à l'autre du fragment à couper. On procède en somme comme avec un hachoir à deux mains. Pour enlever ensuite les coupes on verse sur elles une ou deux gouttes d'eau, après quoi on les fait glisser sans difficulté sur le plat d'un bistouri. On peut au besoin les prendre une à une dans leur ordre avec des pinces. 11 est bien clair qu'on n obtient jamais par ce procédé des coupes aussi régulières qu'en saisissant la membrane dans un encollage quelconque. Mais on y trouve d'autres avantages : en particulier celui de ne faire subir cl la préparation aucune déformation au cours de la recherche. Dans le nombre des coupes ainsi faites il s'en trouve de trop épaiss<îs cl de trop niinces, mais il y en a toujours un certain nombre qui sont excellentes. Et il n'y a pas en somme de meilleur procédé pour l'étude de la rétine, des feuillets du blastoderme, etc.

ÊGLAIRGISSAMTS. 61

Si on ne redoute pas d'avoir recours à Tencollage, on se trouvera bien d'appliquer la membrane que Ton met dans la gomme, puis l'alrool, sur une feuille de papier à filtre, avec lequel elle conserve dos adhérences et avec lequel on la coupe. Les coupes se manient f-nsuile plus aisément, grâce à ce lambeau de papier qui les soutient cl (|ui a de plus l'avantage de jouer le rôle de tasseau sous le verre mince.

Si la membrane est solide et résistante, on peut la rouler sur elleiiirine et en faire une sorte de petit cylindre qui se prête facilement à la coupe; on peut encore en saisir un fragment entre deux morceaux «lo sureau et le couper ainsi. Un autre procédé consiste à placer la monibmne entre deux fragments d'un tissu mou, du foie par exemple, ri à durcir le tout par la gomme et l'alcool. Dans l'eau les coupes de la membrane s'isolent du tissu protecteur. Il est bien entendu que ces roupes de membranes minces doivent être pratiquées comme toujours <ur des parties dont les éléments ont été fixés au préalable par les réarlifs convenables.

§ 43. — ÉelaIrelmHiHtfi. ,

L(*s coupes ne peuvent pas en général être observées dans les li(Hiides qui servent de véhicules ordinaires ; elles ont une épaisseur (|ui exige qu'on les rende transparentes ou, comme on dit, qu'on les •Vlaircisse. D'autres fois on veut aussi les colorer. Nous prendrons ce ilernier cas et nous indiquerons les diverses opérations par lesquelles il faut alors faire passer la coupe. Après l'avoir laissée séjourner dans IVau le temps convenable pour la débarrasser de l'alcool (où le carmin «si insoluble) et de la gomme qui a ser\'i à la durcir, on la colore ; quand on juge qu'elle est arrivée au point de coloration convenable, on la retire. Elle est opaque, mais comme les corps qui la rendront transparente, la benzine, la térébenthine, la créosote, l'essence de •îirolle, etc., ne sont point miscibles à l'eau, ou du moins ne le sont i|ircn proportion très-faiblcî, il devient nécessaire, avant d'avoir recours à TPS agents, de déshydrater la préparation. Cela se fait en la plongeant dans l'alcool absolu (celui du commerce peut suffire) qui enlève toute ïnm et permet dès lors l'action des liquides éclaircissants. Pour rendre la manipulation plus rapide, on peut étancher légèrement les eoupes sur du papier buvard, ou du papier à cigarettes qui est excellent pour cela, avant de les faire passer d'un liquide dans l'autre.

(Juand la coupe est transparente, il ne reste plus qu'à la transporter aj^vs l'avoir encore une fois légèrement étimchée, dans un corps

résineux qui la conserve. Celui qu'on emploie actuellement est le baume de Damar. On emploie également le baume du Canada rendu liquide soit par une faible chaleur, soit par l'addition de chloroforme. Dans ce dernier cas le baume diminue toujours entre les deux lames de verre. Il se fait dès le premier jour des vides. On les comble en ajoutant une nouvelle goutte de la solution sous le bord du verre mince. Les coupes ainsi obtenues sont bonnes pour les vues d'ensemble ; ce ne sont pas toujours, ce sont même rai^ement les meilleures pour l'étude intime des éléments. Cette série de manipulations et de réactions par laquelle passe la préparation n'est pas sans nuire un peu à sa perfection. Quand on a des coupes très-minces, il est toujoui*s préférable de les placer directement et de les conserver dans la glycérine. Il faut au reste bien distinguer ce que l'on pourrait appeler les préparations de collection, qui comportent une certaine élégjmce, ceilaios soins de détail, des préparations d'étude auxquelles on demande avant tout d'être démonstratives d'un fait ou d'une particularité donnés. Ace point de vue, on ne devra jamais négliger d'observer lés coupes incomplètes. Il arrive souvent que ces coupes taillées en biseau sur un de leurs bords laissent voir des détails de structure qu'on n'aperçoit pas sur des préparations dites vulgairement : mieux réussies.

§ 4i. — Colorante. Coi

On tire un grand parti en histologie de la coloration partielle ou totale des fragments de tissu que l'on soumet à l'examen du microsco[)e. De tous les procédés employés pour les colorer, le plus pratique est l'usage du carmin. On emploie aujourd'hui de préférence le picro- ^^arminate d'ammoniaque, qui a l'avantage de colorer certains éléments ou certaines parties des éléments en rouge, tandis que l'acide picrique se portant sur d'autres parties les colore en jaune. Nous n'avons pas besoin de rappeler que les colorants ne doivent jamais être employés que pour rendre plus visibles, ou mieux, plus distinctes des parties qui le seraient moins sans cela.

Pour préparer cette solution, on imbibe d'eau un fragment de carmin de première qualité, puis on le place au fond d'un tube en vei-sant sur lui quelques gouttes d'ammoniaque. Le lendemain le carmin «est entièrement dissous ; on ajoute de l'eau distillée, puis on neuti'alise l'ammoniaque au moyen d'une solution concentrée d'acide picrique. Le mélange doit avoir une couleur rouge orangée. Le picrocarminate sera d'autant meilleur qu'on se sera plus approché sans l'atteindre

du point de saturation de l'ammoniaque. On peut employer de même Taride acétique, et cette solution offre dans certains cas des avantages marqués sur la précédente. L'important est que le carmin, par suite du faible excès d'ammoniaque qui tend lui-même à s'évaporer , soit pour ainsi dire en état de combinaison instable. Aussitôt que le carmin dans cet état se trouve en présence de corps qui en sont avides, il se précipite sur eux. Nous avons dit que le nucléole, le noyau, le corps des 1 ellules avaient, dans l'ordre même où nous les désignons, une affinité de moins en moins grande pour le carmin. Si la solution par laquelle on a traité la substance est très-faible, le novau seul est coloré et non le (orps des cellules que le carmin traverse sans s'y fixer. Nous avons dit précédemment que les substances organiques encore vivantes n'étaient pas en général teintes par le carmin. On n'obtient d'autre part que de mauvaises imbibitions quand la préparation que l'on veut carminer est 4'ncore imprégnée de liquides acides ou alcooliques : l'acide s'emparant de Fammoniaque précipite sur place le carmin, en dehors des lieux d'élection où il se serait déposé sur une pièce imbibée d'un liquide neutre.

Certaines solutions do carmin dans lesquelles la matière colorante .'ie précipite lentement, et qui sont à cause de cela loiiclies, sont souvent les meilleures ; il suffira dans ce cas de filtrer pour l'usage de chaque jour quelques gouttes de cette solution sur un très-petit filtre de papier.

§ 45. — Fermeiare de« préparatloBii.

La fermeture des préparations est un des côtés les plus grossiei's de la technique microscopique. Nous ne nous y arrêterons point, nous bornant à énumérer les substances employées dans ce cas : le bitume de Judée, le baume de Damar, la cire, la gomme laque en dissolution dans Falcool, la paraffine, etc. Celle-ci s'applique généralement au moyen d'une tige de fer creuse que l'on chauffe à la lampe. On peut rappliquer tout aussi bien en faisant fondre la paraffine et en la portant >ur les bords du verre mince au moyen d'un pinceau que l'on a soin de couper caiTément à un millimètre environ de la pointe.

§ 46. — WLémmiAU utmetm.

Nous nous étendrons un peu plus sur l'action d'une série de réactifs que nous allons passer en revue et qui sont mis à profit pour les études histologiques. La connaissance de ceux-ci n'a plus trait simplement à la technique ; elle importe à la science des éléments et des

tissus eux-mêmes, puisqu'elle n'est que l'expression des modifications qu'ils offrent en présence de ces divers agents. On ne devra pas oublier que ces réactions sont rapportées en général à la substance organique telle qu'on la trouve sur l'animal vivant ou le cadavre. Elles changent si on lait agir les mêmes réactifs sur des tissus ayant macéré dans desi solutions spéciales. C'est ainsi que l'acide acétique ne gonflera plus les fibres lamineuses d'un tissu durci par l'acide chromique : de même des autres réactions. Ce point ne doit jamais être perdu de vue par l'élève iqui débute.

Nous suivrons un ordre absolument artificiel, le même à peu près qu'a adopté M. Ch. Robin dans son traité Du microscope.

Eau. — L'eau, avons-nous dit, altère très-rapidement un grancf nombre d'éléments anatomiques, par exemple les globules du sang et du pus ; l'eau gonlle le tissu cellulaire, lui donne une apparence gelatineuse, et le rend légèrement transparent, condition qui pourra èlre^ utile, mais qu'on obtiendra beaucoup mieux avec les solutions étendues d'acide acétique, azotique, etc.

L'eau à une certaine température devient un durcissant ; on peut l'employer pour les muscles dont les stries se voient très-bien sur l;t viande bouillie.

tille devient aussi un dissociant si l'on ne fait qu'y plonger certains tissus. C'est ainsi qu'on observera très-bien les fibres cellules des (\slomacs du bœuf sur le gras double acheté chez les marchands tripiers. On dissocie, en les plongeant dans l'eau à 55 degrés, les fibres d'un muscle de grenouille (1).

Eau oxygénée. — L'eau oxygénée peut rendre parfois de grands services comme décolorant. En laissant tremper des coupes faites suides tumeurs mélaniques dans un mélange à parties égales d'eau oxygénée et de glycérine, on détruit en partie la couleur noire du pigment et la préparation se trouve sensiblement éclaircie (voy. § :2()). L'eau oxygénée détruit également la matière colorante des cheveux et relie du test de certains insectes avant une couleur foncée, comme les dytiques, les hydrophiles, etc.

Glycérine. — La glycérine est d'un usage constant pour conserver les préparations microscopiques délicates. Elle altère profondément h's éléments et les tissus frais qu'on y plonge. Pour consener les

'W II ne semble point qiron ait fait jusqu'ici des recherches hislologiques au mo^cn dc^ la niarmile de Papin, qui donneraient sans doute d'intéressants résultats.

HKACTIFS i:SUELS. 65

préparations faites sur des tissus macérés, il importe qu'elle soit légèrnmeiit aeide. Il est d'habitude de la rendre acide avecime très-petite quantité d'acide formique ou d'acide oxalique.

Quand on a sous le microscope une préparation heureuse que Ton désire conserver, il suffira d'ajouter sur le bord du verre mince une goutte de glycérine. Celle-ci pénétre peu à peu sous la plaque en se mêlant au liquide qui sert de véhicule. Ce mélange est toujours excellent pour la conservation de la préparation et vaut mieux que la glycérine pure : il se produit une substitution partielle de celle-ci à une certaine quantité d'eau qui s'évapore. Au bout de quelques jours on n'a plus qu'à fermer la préparation. Mais la condition essentielle pour cela est d'enlever de la surface de la bande de verre, anloiir de la lame mince, toute trace de glycérine qui s'y pourrait trouver; autrement le corps résineux employé n'adhère pas au verre.

La glycérine est un réactif spécial du tissu osseux où elle fait appai-aîlre les cavités de la substiinre osseuse en y provoquant la production d'un gaz qui les remplit ainsi que leurs plus fins prolongements.

AlcooL — L'alcool est dans beaucoup de cas un excellent durcissant, soit qu'on remploie seul, soit qu'on en combine l'usage avec celui de Facide chromique ou de l'acide picrique. Il doit être seul employé pour durcir les tissus injectés. Nous donnerons en parlant du système vasculaire les indications générales sur la pratique des injections. L'alcool est essentiel pour faire les coupes, le rasoir doit toujours en être imprégné. L'alcool méthylique peut être employé pour ce dernier usage à la place de Talcool ordinaire.

Ramier a préconisé l'emploi de l'alcool a 30 degrés centésimaux (alcool au tiers, deux parties d'eau distillée pour une partie d'alcool à M degi*és Cartier) pour fixer les éléments anatomiques, particulièrement ceux qui sont isolés, tels que les hématies, les leucocytes, les spermatozoïdes, les ovules. Il fixe également les cellules nerveuses avec leui's prolongements, seulement la macération doit être prolongée pendant plusieurs semaines, tandis qu'on obtient le même résultat en deux ou trois jours par Tacide chromique à 1/3400.

On peut également employer l'alcool comme dissociant, en y laissant séjourner les fragments de tissu pendant vingt-quatre ou quarantehuit heures. On isole ainsi rapidement les cellules épithéliales. La liqueur de Muller demande un temps plus long, mais le résultat est meilleur.

Chloral. — Le chlond rend de grands services en histologie comme duix'issant. II peut servir à préparer les rétines. Il coagule aussi la

POICHET. 5

myéline [des nerfs, comme Talcool absolu. 11 nous n paru qu'aloi*s la myéline devenait susceptible d'être colorée par le carmin.

Acide acétique. — L'acide acétique jouit de la propriété de rendre gélatineux et transparent le tissu lamineux, tandis qu'il est à peu près sans action sur le tissu des glandes; il favorisera donc la recherche de celles-ci. Par le même effet il tend à détacher les revêtements épidermiques des tissus lamineux (derme ou chorion) sous-jacents.

L'acide acétique est aussi employé très-fréquemment comme éclaircissant. Faisant disparaître certains éléments des tissus, tels que les libres lamineuses, les fibres - cellules , il rend visibles les noyaux contenus au milieu de ces éléments et devient un utile auxiliaire pour les rechercher.

L'emploi de l'acide acétique faible se combine aussi, comme nous le dirons, avec l'emploi du chlorure d'or et de l'acide osmique. Il sert dans ce cas à gonfler et rendre transparents les tissus afin de faciliter l'examen des terminaisons nerveuses, après qu'on a artificiellement coloré celles-ci par les deux autres réactifs en question. On empêche les végétations de se développer dans les solutions étendues d'acide acétique en y mettant une goutte d'acide phénique.

On forme avec un mélange de huit à dix gouttes d'acide acétique dans 30 grammes d'alcool , le liquide de lieale où beaucoup de tissus acquièrent peu à peu un durcissement qui les rend propres à en faire des coupes, en même temps qu'ils deviennent transparents et un peu gonflés.

Acide chlor hydrique. — L'acide chloihydrique faible a à peu près les mêmes propriétés que l'acide acétique. On l'emploie en particulier à 1 ou !2 pour 1000 environ, pour la recherche des terminaisons neigeuses dans les muscles. Plus concentré il sert à détruire la plupart des éléments anatomiques en ne respectant que quelques rares substances dans l'économie : les fibres élastiques, la cristalloïde , la cuticule des dents. L'acide chlorhydrique très-étendu est un excellent dissociant, surtout pour les tissus des animaux inférieurs.

Acide azotique, — L'acide azotique, comme les précédents, gonfle et rend ti*ansparent le tissu lamineux, mais il a une action spéciale sur la substance musculaire ; il la durcit et finit par l'isoler. Il la colore en même temps en jaune, surtout quand il n'est pas pur. On a con-seillé à cause de cela de laisser plonger des fragments de bouchon dans l'acide azotique dont on se sert pour ces soiles de recherches.

UÉACilFS USUELS. 67

Acid€ picrique, — L'acide picrique s'emploie comme durcissant el comme colorant. H agit à peu près comme l'acide chromique sur les tissus appartenant au groupe des tissus conjonctifs. Il les durcit et les décalcifie, en même temps qu'il les colore fortement en jaune. Sa propriété colorante apparaît surtout quand il est combiné au carmin dans le picro-carminatc d'ammoniaque. Si le mélange a été bien l'ail on voit l'acide picrique se précipiter sur certiùns éléments et les teindre en jaune, aloi's que le carmin en colore d'autres en rouge. On aura un excellent exemple de cela sur le libro-cartilage de l'épiglotte du bœuf.

Acide osmique. — L'acide osmique est aujourd'liui d'un usage considérable en histologie ou il rend les plus importants services. Il c^i à la lois colorant de certaines substances et à un point de vue plus général durcissant. Il colore en violet puis en noir les corps gras et la myéline des nerfs. On l'emploie le plus souvent dans ce but à \ ou i pour 100. Concentré et même saturé, il sert à fixer instantanément certaines membranes minces comme la rétine, la lame du limaçon, les feuillets du blastoderme, etc., de telle sorte qu'on peut sur l'heure pratiquer des coupes. A ce point de vue encore l'acide osmique rend les plus grands services dans l'étude des jeunes embryons dont il permet de durcir instantanément les tissus, en altérant moins la forme des éléments que tout autre réactif. On remarque seulement qu'après avoir été ainsi traités, les noyaux el les coi'ps cellulaires se teignent un peu plus diflicilement par le carmin,

On peut con^biner l'emploi de l'acide osmique avec mAm de Tacidc acétique ou de l'acide chlorhydrique ; il permet de suivre facilement les plus fines ramifications nerveuses qui se trouvent alors teintes eu brun.

Acide chromique. — L'acide clu'omique, selon le degré de la solution où il se trouve, peut être employé soit comme dissociant, soit comme durcissant. En solution à i pour 2500 à 500(), il permet la dissociation lacile des éléments du tissu neneux principalement. Mais on doit être prévenu que dans ce cas son action ne se prolonge pas. Il faut surprendrf; en quelque soile la macération au moment propice, quand les éléments se séparent facilement les uns des autres et ont en même temps un degré de dureté suffisant. Cette remarque s'applique au reste à un grand nombre de réactifs dont il faut ainsi surveiller l'action à de^ espaces de temps parfois très-rapprochés : quand on fait bouillir, par exemple, un tissu comme celui des ongles dans un liquide tel que

la soude, qui en dissocie d'abord les élémenls et presque aussilôl le^ gonfle et les détruit.

L'acide chromique comme durcissant s^emploie à 1 ou 1 i/â à 3 pour . 1000 parties d'eau. Il est inutile pour ces soiles de macérations d'employer de l'eau distillée. Il sera seulement nécessaire de renouveler fréquemment le liquide, surtout s'il est peu abondant par rapport au volume du fragment mis à macérer. On devra placer celui-ci au moins pendant les premiers jours dans un vase à fond plat ou bien le suspendre au moyen d'un fil dans le haut du bocal. La solution chromique sera employée de préférence quand les parties à durcir contiendront des sels terreux ; elles seront décalcifiées et les coupes se feront sans difficulté.

Bichromates dépotasse et d'ammoniaque. — Quand les substances à durcir ne contiennent point de chaux, quand ce sont des parenchymes, il y a avantage à substituer le bichromate de potasse ou d'ammoniaque à l'acide chromique. Ces sels s'emploient à 3 ou 4 pour 100 dans F eau ordinaire.

Liqueur de Mûller. — La liqueur de Mûller est le dissociant par excellence. La composition de ce mélange est due à Henri Mùller. Nous l'avons indiqué, ce liquide serf à durcir les cellules épithéliale^J en même temps qu'il les isole les unes des autres; il les gonfle toutefois très-légèrement, mais sans les déformer d'une manière sensible. La liqueur de Mùller est également très-propice à l'étude de la rétine. On en peut dire autant des tout jeunes embrjons qui s'y conservent parfaitement. A la longue ils deviennent bruns, nuiis ceci ne nuit en rien à la netteté et à la Iransparence des coupes ; ils acquièrent après six mois, un an et jïIus de séjour dans la liqueur de Mûller, une certaine dureté qui permet de les trancher facilement. Au bout de ce temps les cellules du tissu conjonctif s'isolent presque aussi aisément que les cellules épithéliales. Elles ont de plus l'avantage d'être assez fortement teintes en jaune ce qui permet jusqu'à un certain point de ne pas les soumettre à une nouvelle réaction pour les colorei*.

Potasse et soude. — La potasse et la soude sont employées pour gonfler, détruire, éclaircir les tissus. Elles gonflent les tissus dui-s, comme les cheveux, les ongles, les épidermes, et permettent de reconnaître, quoique altérés, les éléments qui entrent dans la constitution de ces parties. On peut également détruire avec ces réactifs certains éléments anatomiques, alors que d'autres sont respectés. C'est le cas

pour les fibres élastiques qui résistentaux bases, même chaudes, pourvu qu'elles nesoient pas trop concentrées. La recherche, au moyen de la polasse,de certains champignons parasites (Trichophylon tonsuranSyAcho- Won, etc.) repose sur une réaction analogue. Les cellules épithéliales, qui constituent les cheveux dans ce cas, sont éclaircies et laissent voir facilement par transparence les amas de spores.

Li soude éclaircit instanUinément les préparations faites au moyen (le Tacide chromique, mais elle compromet la durée de la préparation qui reste altérée. La soude ne devra en conséquence être employée que sur des pièces sacrifiées d'avance.

Azotate d'argent, — L'azotate d'argent est un réactif extrêmement précieux, quoique d'un maniement difficile : il possède la propriété de se réduire au niveau des insterstices de certains éléments. On remploie dans ce but à la dose de 1 à 4- pour 1000. Nous reviendrons sur ce sujet en parlant de l'épithélium des séreuses. Le nitrate d'arpeut a de plus sur les cellules nerveuses et leurs prolongements une action très-singulière dont nous aurons aussi «^ reparler,

Chlarure (Tor. — On peut appliquer au chlorure d'or la mêmeremarque qu'au nitrate d'argent ; c'est un réactif précieux, mais dont l'emploi offre certaines difficultés. On en fait usage ordinairement k la dose de 1 pour 100. Le chlorure d'or agit en général, comme le carmin; il colore d'autant plus activement les éléments anatomiques que la vie de ceux-ci était plus intense. Les parties sur lesquelles on fait a{îir le chlorure d'or doivent toujours être préalablement acidifiées. Nous entrerons dans quelques détails sur la manière de l'employer, spécialement en traitant du tissu cornéen ; il est aussi d'un emploi profitable dans l'étude de la substance nerveuse.

Teinture d'iode. — La teinture d'iode sert comme colorant, et rend dans certains cas d'importants senices en faisant ressortir parfois les noyaux de certaines cellules qui resteraient sans cela à peine visibles. On l'emploie également pour bien mettre en lumière les cellules du carliljige frais au milieu de la substance amorphe où elles sont plongées. La réaction bleue avec l'amidon, utilisée surtout en histolojrie végétale, peut cependant servir a déceler au sein d'un tissu et même d'un élément anatomique la présence de grains de fécule ou d'amidon introduits accidentellement ou artificiellement dans l'économie. L'iode ♦•si également un réactif de la matière glycogène qu'il colore en jaune bnmAtre.

Hématoxyline. — L'hématoxyline est un réactif colorant. On l'extrait du bois de Campêche. Pour l'usage, on en fait une solution concentrée dans l'alcool ; on mélange 1 gramme de cette solution à 100 grammes de la solution suivante :

Alun, 4 gramme; eau, 800 grammes. (Lœvve.)

On obtient de la sorte un liquide violet dans lequel il suffît de plonger pendant quelques minutes une membrane pour que les noyaux soient colorés en beau violet. Nous indiquerons à leur place quelques-unes des réactions importantes de l'hématoxyline.

Fuchsine. — La fuchsine jouit d'un pouvoir colorant considérable, ainsi que du reste tous les sels d'aniline dont elle est un des dérivés. On l'emploie en solution alcoolique. Elle colore en rouge vif les noyaux, et de même les spermatozoïdes, les leucocytes, etc. Elle est surtout d'une application utile pour l'étude du système nerveux. Dans les nerfs, le cylindre-axe est la partie qui se colore avec le plus de facilité ; seulement la nuance qu'il offre alors n'est pas rouge, elle est lie de vin (Onimus).

• Sels d'aniline. — Nous ne pouvons signaler ici tous les sels d'aniline employés en histologie. Nous aurons occasion plus loin, à propos des différents éléments des tissus, de revenir sur l'action de ces sels, en particulier à propos de la rétine, de l'ovaire, etc. Toutes ces mîitières sont des colorants énergiques.

Le roug?. d'aniline s'emploie surtout pour l'étude de certains organismes inférieiu's (vibrions, bactéries, etc.), qu'il permet de distinguer plus aisément, en leur donnant une couleur tranchée.

Purpurine, — La purpurine est un extrait de garance dont Tiisape a été préconisé par Ranvier. On la prépare de la façon suivante : on porte à ébullition une solution d'alun à 4 pour 200, et on y ajoute une petite quantité de purpurine ; au bout de quelques minutes la dissolution s'est opérée ; on filtre et on ajoute un quart du volume total d'alcool. Le liquide ainsi obtenu est dichroïque et d'une belle couleur orangée, mais il ne se consene pas indéfiniment. Au bout de un à deux mois il a perdu une grande partie de son pouvoir colorant : il faut donc toujours employer une solution fraîche. La purpurine a comme colorant certains avantages qu'on peut résumer ainsi : elle se fixe sur les noyaux et à peine sur les corps cellulaires ; elle colore les fibrescellules, ce qui permet de. les distinguer facilement quand elles sont mêlées aux éléments du tissu conjonctif ; elle colore les cellules du

cartilage sans altérer leur forme quand on met celui-ci en mince lame dîins la solution : elle fixe donc en même temps qu'elle colore ces éléments. Enfin elle ne colore pas les noyaux des cellules nerveuses.

Teinture de tournesol. — La teinture de tournesol peut être employée pour l'étude des nerfs périphériques à l'état frais. Au bout de un à deux jours d'imbibition, les noyaux de la gaine de Schwann et du périnèvre sont colorés en bleu intense. Si l'on vient h faiie agir ensuite une solution acide, les noyaux, de bleus qu'ils étaient, deviennent roses.