C. Ensemencement sur milieux solides, Fe NE ct

en piqüre. — Fil de platine moyen, droit. d'un tube de gélatine, On peut opérer comme en A, sauf au Par piqûre. temps e :

e. Enfoncer le fil au milieu du cylindre solide, profondément, parallèlement au grand axe.

La technique suivante est préférable (fig. 80) :

a à c. Comme ci-dessus.

d. Prendre le tube neuf dans la main gauche, le placer verticalement, ouverture en bas.

e. Amener Île fil de platine, bien vertical, au contact du milieu solide; le maintenir fixé dans cette position. Laisser glisser le tube entre les doigts, verticalement ; le milieu s’empale sur l'aiguille. Une fois atteinte la profondeur voulue, laisser le fil de platine se dégager seul, en maintenant cette fois le tube.

f et g. Comme ci-dessus.

39 Variante suivant le milieu du prélèvement. — Prélèvement sur les milieux solides ; ensemencement en tube de bouillon. — Fil de platine moyen, en anse ou droit.

Comme en 1° ci-dessus, sauf aux temps c et e :

c. Porter le fil de platine sur la culture ; en prélever un fragment.

e. Porter l'extrémité du fil sur la paroi du tube neuf, légèrement au-dessus du liquide; incliner le tube pour amener un peu de liquide au niveau du fil; frotter ce dernier contre la paroi, pour dissocier la semence et la diluer dans le bouillon.

f et g. Comme en 1°.

Ensemencement à la pipette. — Nécessaire pour ensemencer de grandes quantités de milieux liquides en partant d'autres milieux liquides. Suivant la nature et la vitalité des germes, on ensemence par litre de milieu neuf quelques gouttes ou 1 centimètre cube de culture.

Nécessaire également pour les semences contenues dans des pipettes (cultures conservées, produits pathologiques).

Ensemencement de tube liquide à ballon liquide. —

a. Prendre le tube-semence dans la main gauche.

Dans la main droite, prendre une pipette stérilisée, l’effilure assez longue pour que seule elle ait à pénétrer dans le tube et dans le ballon. Avec une pince flambée, casser la pointe. Flamber l’effilure en passant {rois ou quatre fois dans la flamme. Laisser refroidir.

b. Déboucher le tube-semence.

c. Plonger la pipette, aspirer la semence; appliquer la pulpe de l'index sur l'extrémité libre pour maintenir le liquide aspiré. Retirer la pipette, sans toucher au bord du tube. Reboucher le tube.

d. De la main gauche, soulever le bouchon du ballon, flamber l'orifice; replacer le bouchon, en laissant à découvert juste la place nécessaire pour insinuer l'effilure de la pipette entre le bouchon et la paroi ; enfoncer l’effilure; enlever le doigt obturateur. Le liquide tombe. Enlever la pipette.