PRINCIPES GÉNÉRAUX DE COLORATION

coloration de certains cocci. En 1872, Eberth et Wagner réus»sissaient à colorer des cocci à Taide de rhématoxyline, mais échouaient pour les bacilles. La véritable découverte de la coloration pratique des microbes date de 1875, et elle appartient à Weigert ^ Le premier, Weigert emploie les couleurs d'aniline (le violet de méthyle) et montre que les cocci sont colorés par les réactifs du noyau; le premier, en outre, il réussit à décolorer les tissus autour des microbes. Il plongeait les coupes dans une solution d'hématoxyline qui colorait en bleu noyaux et cocci; il décolorait les noyaux àTaide d'une solution étendue de potasse et d'acide acétique; ces coupes furent les premières où seuls les microbes restaient colorés. L'hématoxyr line ne réussissant pas à colorer les bacilles, Wkioert leur appliqua les couleurs d'aniline; c'est en 1877 que furent ainsi obtenus les premiers bacilles colorés. Cette môme année 1877 voit naitro les t^-avaux de Koch * qui fait entrer définitivement dans la pratique l'usage des couleurs d'aniline en montrant l'intensité, la sûreté, la rapidité de cette méthode de coloration. En 1878, KoGH obtient des coupes entièrement décolorées, sauf les microbes, en les lavant dans une solution de carbonate de potasse ; il était sur la voie de la découverte du bacille tuberculeux. En 1881, Weigert montre les premières coupes avec double coloration; les microbes étant colorés par le bleu de méthylène, et les noyaux en rouge par le picro-carmin. En 1882, Koch colore une espèce déterminée (le B. tuberculeux) par un procédé non applicable aux noyaux et aux autres microbes. Les couleurs d'aniline étaient définitivement entrées dans la pratique. Mais quelles couleurs employer?

Ici se placent les travaux d'EuRLicn^ et de ses élèves ScHWARZE et Westphal (1880). Weigert, Eberth, et Wagner avaient fait admettre qu'il y avait une relation entre les réac-

* Weigert. Zm/* Technik der mikroskopischen Bactérien, UnlersuchuDgen Virchow's Archiv., t. LXXXIV.

* Koch, Untersuchungen ûber Bactérien, Cohn's Beitr&ge zur Biol. der PQanzeu, 11 [.

' Ehrlich, Technik des Bactérien Vntersuchung, Zeits. f. kl. MediciD, I et il.

EXAMEN MICROSCOPIQUE DBS MIGBOBBS

lions chimiques et la forme du microbe ; le carmin, Thématoxyline, la safran ine (un des meilleurs réactifs des noyaux) coloraient les cocci et non les bacilles. Oberbieyer (1873) croyait que les spirilles se coloraient moins bien que les autres formes microbiennes. C'était une erreur ; il n'y a aucune rela* .tion entre la forme et la réaction chimique, cette dernière est spéciale pour une espèce donnée et dépend de la couleur employée ; c'est ce qui va ressortir de l'exposé des expériences d'EuRLicu et de son école.

Ehrlich a divisé les couleurs d'aniline (lesquelles sont des sels) en basiques, acides ou neutres. Les couleurs basiques sont celles dont la base est colorante, tandis que Tacide ne Test pas; ainsi, dans Tacétate de rosaniline, la rosaniline est colorante et Tacide acétique ne Test pas. Dans les couleurs acides, au contraire, Tacide est colorant, la base ne Test pas ; ainsi, dans le picrate d'ammoniaque, c'est l'acide picrique qui aies propriétés colorantes. Les couleurs neutres sont celles qui sont composées d'un acide et d'une base doués tous les deux du pouvoir colorant; exemple : le picrate de rosaniline. Voici un tableau des principales couleurs d'aniline.

COULEURS BASIQITES

Violet

Rouge

Bleu Vert Brun